
Detroit 562細胞(人咽頭癌胸水轉移細胞)
- 來源:器官:咽頭;疾病:癌;取材轉移灶:胸水
- 細胞特征:貼壁細胞 , 上皮細胞樣
- 培養(yang) 基:生長培養(yang) 基:MEM(含NEAA)+10% FBS+1% P/S
- 其他:基因表達:角蛋白;Detroit 562細胞係存在細胞遺傳(chuan) 學不穩定性
Detroit 562細胞是從(cong) 一名白人女性咽頭癌患者的咽部分離得到的上皮細胞,廣泛應用在癌症研究、3D細胞培養(yang) ,Detroit 562細胞係存在細胞遺傳(chuan) 學不穩定性。
Detroit 562細胞在病毒感染方麵顯示對人類脊髓灰質炎病毒1和水泡性口腔炎病毒具有易感性。細胞表現出角蛋白的基因表達,並通過免疫過氧化物酶染色顯示對角蛋白陽性。
Detroit 562細胞特性
細胞來源:白人女性咽頭癌患者的咽部
細胞類型:上皮細胞
應用:用於(yu) 癌症研究和3D細胞培養(yang)
細胞模態數:64,範圍在58到128之間
核型:94%的細胞具有大的近端標記染色體(ti) ,臂比為(wei) 3:4,每個(ge) 細胞有5到6分鍾的染色體(ti)
細胞遺傳(chuan) 學不穩定性:文獻報道了Detroit 562細胞係存在細胞遺傳(chuan) 學不穩定性
轉移性:胸腔積液
病毒易感性:人類脊髓灰質炎病毒1、水泡性口腔炎病毒
基因表達:角蛋白
同工酶:G6PD,B
免疫染色:Detroit 562細胞對角蛋白免疫過氧化物酶染色陽性
Detroit 562細胞參數表
細胞名稱 | Detroit 562人咽頭癌胸水轉移細胞 |
別稱 | DETROIT 562; Detroit-562; Detroit562; Det 562; Det. 562; D562 |
種屬 | 人 |
組織來源 | 咽頭,來自轉移部位:胸腔積液 |
疾病特征 | 咽頭癌 |
年齡(性別) | 成年白人女性 |
細胞形態 | 上皮細胞樣 |
生長特性 | 貼壁細胞 |
生物安全等級 | BSL-1 |
基因表達 | 角蛋白 |
同工酶 | G6PD,B |
凍存條件 | 凍存液:90% 完全培養基 + 10% DMSO,液氮保存 |
培養基 | MEM培養基(含NEAA)+ 10% FBS + 1% P/S |
培養條件 | 氣相:空氣,95%;CO2,5%;溫度:37℃ |
推薦傳代比例 | 1:2-1:4 |
推薦換液頻率 | 2-3次/周 |
生長速率 | 倍增時間約為2-3天 |
免疫染色 | 角蛋白免疫過氧化物酶染色陽性 |
細胞模態數 | 64;範圍在58到128之間 |
核型特征 | 94%的細胞具有大的近端標記染色體,臂比為3:4,每個細胞有5到6分鍾的染色體 |
細胞遺傳學特性 | 存在細胞遺傳學不穩定性 |
轉移性 | 胸腔積液 |
病毒易感性 | 對人類脊髓灰質炎病毒1、水泡性口炎病毒易感 |
培養教程
Detroit 562人咽頭癌胸水轉移細胞培養
解凍操作
在收到後盡快解凍,並立即進行培養(yang) 。
如需繼續凍存,應在液氮蒸汽相中存儲(chu) ,避免-70°C存儲(chu) 以防失活。
在37°C水浴中輕輕搖動解凍,約2分鍾。
解凍過程中保持O型環和蓋子遠離水麵,以減少汙染風險。
解凍完成後立即從(cong) 水浴中取出,用70%乙醇浸泡或噴灑進行消毒。
傳代操作
移除和丟(diu) 棄培養(yang) 基
用0.25% (w/v) Trypsin- 0.53 mM EDTA溶液輕輕衝(chong) 洗細胞層,去除所有含有胰酶抑製劑的血清殘留物。
向瓶中加入2.0至3.0 mL Trypsin-EDTA溶液,觀察細胞在倒置顯微鏡下分散(通常在5至15分鍾內(nei) )。
不要在等待Detroit 562細胞脫落時通過敲擊或搖晃培養(yang) 瓶來攪動細胞,難以分散的細胞可放置在37°C條件下促進分散。
加入6.0至8.0 mL完全培養(yang) 基,輕輕吸取細胞懸液。
向新的培養(yang) 容器中加入適量的細胞懸液。
在37°C下孵育細胞。
凍存操作
用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
加入2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA),置於(yu) 37℃培養(yang) 箱中消化1-2分鍾,觀察細胞消化情況。
Detroit 562細胞大部分變圓並脫落後,快速將培養(yang) 瓶拿回操作台,輕敲幾下培養(yang) 瓶後加入適量培養(yang) 基終止消化。
在1000RPM條件下離心4分鍾,去除上清液。
加入1-2mL培養(yang) 基,輕輕混勻後吹勻。
將細胞懸液按細胞密度不低於(yu) 1x10(6)/ml加入含DMSO的凍存液,終濃度為(wei) 5%。
標識凍存管,放入-80°C冰箱冷凍2小時後轉入液氮灌存。
記錄凍存管位置以便下次使用。
相關資料
STR鑒定及相關
Amelogenin | X |
CSF1PO | 11,13 |
D2S1338 | 25 |
D3S1358 | 15,16 |
D5S818 | 11,12 |
D7S820 | 8 (CLS=300399) |
8,10 (ATCC=CCL-138; Cosmic-CLP=906837; ECACC=87042205; IZSLER=BS TCL 16; PubMed=21868764; PubMed=25275298; PubMed=25877200) | |
D8S1179 | 13,14 |
D13S317 | 12 |
D16S539 | 11 |
D18S51 | 15 |
D19S433 | 14 |
D21S11 | 28,30 |
FGA | 21 |
Penta D | 13 |
Penta E | 13 |
TH01 | 8 (CLS=300399) |
8,9 (ATCC=CCL-138; Cosmic-CLP=906837; ECACC=87042205; IZSLER=BS TCL 16; PubMed=21868764; PubMed=25275298; PubMed=25877200) | |
TPOX | 8,10 |
vWA | 16 |
參考文獻
- 中華放射醫學與防護雜誌 > 2009年1期
- 摘要:目的 研究60Co γ線不同劑量照射條件培養液(ICM)培養k562細胞後引發的旁效應.
- 《實驗生物學報》 1993年04期
- 摘要:本文利用脂質體轉基因技術與細胞融合相結合的方法所建立的雜交細胞為研究對象,采用選擇性多步抽...
- 《福建醫科大學》 2007年
- 摘要:Grb2分子是細胞內一個重要的連接蛋白,在細胞內信號傳遞中起重要作用,尤其介導由生長因子誘...
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