SF126人腦瘤細胞

SF126人腦瘤細胞係源自一位50歲女性患者的星形膠質細胞瘤組織，起源於(yu) 額葉腫瘤。SF126細胞用於(yu) 非致瘤性人膠質母細胞瘤模型研究。

SF126人腦瘤細胞特性特征

• 多倍體(ti) : SF126細胞在培養(yang) 中表現出多倍體(ti) 特性

• 膠質標誌物: 缺乏膠質纖維酸性蛋白（GFAP）和穀氨酰胺合成酶的表達
  

• 間充質標誌物: 在早期傳(chuan) 代中顯示層粘連蛋白和纖維連接蛋白的陽性表達

• 特異性結合: SF126細胞可以特異性地結合β-內(nei) 啡肽

• III型前膠原: 通過III型前膠原的免疫染色得到證實，進一步表征了它們(men) 的間充質性質

• 非致瘤性: SF126細胞在無胸腺小鼠中表現為(wei) 非致瘤性

• 膠原纖維形成: SF126細胞能夠在體(ti) 外形成膠原纖維

SF126人腦瘤細胞參數表

SF126人腦瘤細胞培養教程

傳代步驟

• 吸出培養(yang) 基: 吸除培養(yang) 瓶中的舊培養(yang) 基。

• 潤洗細胞: 用3-4 ml PBS輕輕潤洗SF126細胞10-20秒，然後吸走。

• 消化細胞: 加入1 ml左右胰酶，輕輕晃動使其均勻覆蓋SF126細胞。

• 培養(yang) 箱消化: 將培養(yang) 瓶放入37℃培養(yang) 箱消化。

• 終止消化: 當SF126細胞間隙變大但未完全脫落時，加入2-3 ml完全培養(yang) 基終止消化。

• 離心細胞: 混勻SF126細胞，900 rpm離心3-5分鍾，棄去上清液。

• 重懸細胞: 加入新的完全培養(yang) 基重懸SF126細胞。

• 分瓶培養(yang) : 按1:2到1:4的比例分配到新的培養(yang) 瓶中。

• 補充培養(yang) 基: 補足培養(yang) 基，將培養(yang) 瓶放回培養(yang) 箱。

注意事項

• 細胞貼壁: SF126細胞貼壁較弱，消化時間需嚴(yan) 格控製。

• 胰酶消化時間: 不同品牌胰酶消化時間差異大，需要根據具體(ti) 情況調整。

• 操作輕柔: 吹打SF126細胞時動作要輕柔，避免產(chan) 生過多氣泡。

• 黑點處理: 培養(yang) 過程中可能出現黑點，需參考操作說明處理。

凍存方法

• 凍存液配方:92% FBS + 8% DMSO或92% 完全培養(yang) 基 + 8% DMSO

• 細胞密度: 200-300萬(wan) /ml，每管1 ml。

• 細胞消化離心: 消化離心後獲得SF126細胞沉澱。

• 重懸細胞: 加入凍存液輕輕重懸SF126細胞。

• 轉移凍存管: 迅速轉移到標記好的凍存管中。

• 程序降溫: 使用程序降溫盒或特定溫度梯度冷凍SF126細胞。

• 液氮保存: 最終將SF126細胞轉入液氮中長期保存。

質量控製

• 支原體(ti) 檢測: 定期檢查SF126細胞支原體(ti) ，結果應為(wei) 陰性。

• 內(nei) 毒素檢測: 監測SF126細胞內(nei) 毒素含量，應≤3 EU/mL。

• 細胞形態: 觀察SF126細胞形態，SF126細胞應呈現成纖維細胞樣。

細節注意事項

• 培養(yang) 基選擇與(yu) 準備：使用推薦的完全培養(yang) 基，如DMEM基礎培養(yang) 基，添加10% FBS和1% P/S。確保培養(yang) 基新鮮並預熱至37℃，避免溫度驟變對SF126細胞造成應激。

• 細胞貼壁與(yu) 消化：SF126細胞貼壁較弱，消化時間需嚴(yan) 格控製，通常使用胰酶消化時間較短。在消化過程中，觀察SF126細胞間隙變大但未完全脫落時，立即加入完全培養(yang) 基終止消化。

• 傳(chuan) 代與(yu) 換液：傳(chuan) 代比例一般為(wei) 1:2到1:4，具體(ti) 視SF126細胞生長速度和密度決(jue) 定。每2-3天換液一次，確保SF126細胞有足夠的營養(yang) 和適宜的生長環境。

• 細胞狀態監測：定期鏡檢SF126細胞，拍照記錄細胞狀態，觀察SF126細胞形態是否正常，是否呈現成纖維細胞樣。SF126細胞狀態不佳時，及時調整培養(yang) 條件或更換培養(yang) 基。

• 支原體(ti) 與(yu) 內(nei) 毒素檢測：定期進行支原體(ti) 檢測，確保SF126細胞結果為(wei) 陰性。監測SF126細胞內(nei) 毒素含量，應≤3 EU/mL，以防止SF126細胞受到汙染。

• 環境控製：培養(yang) 溫度保持在37℃，CO2濃度為(wei) 5%，濕度保持在飽和狀態。避免頻繁開關(guan) 培養(yang) 箱門，以減少溫度和CO2濃度的波動對SF126細胞的影響。

培養環境的穩定性

• 培養(yang) 箱維護：定期校準培養(yang) 箱的溫度和CO2濃度，確保其穩定性。定期清潔培養(yang) 箱，防止汙染源的積累。

• 培養(yang) 基的質量控製：使用經過驗證的培養(yang) 基和試劑，確保其無汙染。每次使用前檢查培養(yang) 基的顏色和透明度，避免使用變質的培養(yang) 基，以確保SF126細胞的生長環境。

• 操作規範：在無菌環境下進行SF126細胞操作，使用無菌器具和耗材。操作過程中盡量減少SF126細胞暴露在外界環境的時間，迅速完成傳(chuan) 代和換液操作。