HEP-2細胞（人喉表皮樣癌細胞） （暫不提供）

HEP-2細胞（Human Epithelioma-2）最初被認為(wei) 來源於(yu) 一名30歲女性的喉部鱗狀細胞癌，於(yu) 1952年首次建立。然而，後續研究表明，HEp-2細胞的實際來源並非最初所認為(wei) 的喉癌，而是由於(yu) HeLa細胞的汙染所致。

1968年，遺傳(chuan) 學家Stanley Gartler首次通過同工酶分析、HeLa標記染色體(ti) 及DNA指紋分析，發現HEp-2細胞實際上是被HeLa細胞汙染的。

盡管HEP-2細胞被確認為(wei) HeLa細胞汙染的產(chan) 物，它仍然被廣泛用於(yu) 研究，尤其是在病毒學和免疫學領域。HEP-2細胞偶爾會(hui) 出現多倍體(ti) ，具有幾個(ge) 標記染色體(ti) 和頻繁的分鍾染色體(ti) ，這些特征與(yu) HeLa細胞密切相關(guan) 。

盡管汙染問題已得到證實，但許多研究仍然將HEP-2細胞誤認為(wei) 是來源於(yu) 喉部鱗狀細胞癌，並在相關(guan) 文獻中繼續引用這一錯誤。

HEP-2細胞特性特征

• 細胞代數：通常在10代以內(nei) 使用。
  

• 染色體(ti) 特征：HEP-2細胞的染色體(ti) 數目通常在69到73之間，偶爾出現多倍體(ti) ，且觀察到多個(ge) 標記染色體(ti) 和頻繁的微小染色體(ti) 。
  

• HeLa標記染色體(ti) ：HEP-2細胞中包含一個(ge) M2拷貝、兩(liang) 個(ge) M3拷貝和一個(ge) M4拷貝，這些特征通過G-帶模式得到確認。

• 基因表達：HEP-2細胞在角蛋白免疫過氧化物酶染色中呈陽性，表明其表達角蛋白，顯示出上皮細胞的特性。
  

• 同功酶：HEP-2細胞表達G6PD和A同功酶。

• HEP-2細胞對多種病毒具有易感性，包括：人腺病毒3、人脊髓灰質炎病毒1、水皰性口炎病毒

HEP-2細胞參數表

HEP-2人喉表皮樣癌細胞培養教程

細胞複蘇

• 從(cong) 液氮罐中取出凍存的HEP-2細胞凍存管，迅速放入37℃的水浴中，輕輕搖晃直至HEP-2細胞完全融化。

• 將融化後的HEP-2細胞懸液迅速轉移至含有10%胎牛血清的DMEM培養(yang) 基中，緩慢加入培養(yang) 基以稀釋DMSO。

• 以1000rpm離心5分鍾，棄去上清液，加入預溫的完全培養(yang) 基重懸HEP-2細胞。

• 將HEP-2細胞懸液接種於(yu) T25培養(yang) 瓶中，置於(yu) 37℃、5% CO₂的培養(yang) 箱中培養(yang) 。

細胞傳代

• 當HEP-2細胞在培養(yang) 瓶中生長至70-80%融合時，棄去培養(yang) 基，用PBS緩慢洗滌HEP-2細胞2次。

• 加入適量的0.25%胰蛋白酶-EDTA溶液，置於(yu) 37℃培養(yang) 箱中消化5-10分鍾，直至HEP-2細胞變圓並輕鬆脫離瓶壁。

• 加入含血清的培養(yang) 基終止消化過程，將HEP-2細胞懸液轉移至15ml離心管中，1000rpm離心5分鍾。

• 棄去上清液，用預溫的完全培養(yang) 基重懸HEP-2細胞，並輕輕吹打均勻。

• 按1:3的比例將HEP-2細胞懸液接種至新的培養(yang) 瓶中，置於(yu) 培養(yang) 箱中繼續培養(yang) 。

細胞計數

• 取0.5ml HEp-2細胞懸液，加入等量的0.4%台盼藍染液，混勻。

• 吸取染色後的HEP-2細胞懸液至血球計數板中，在顯微鏡下計數細胞數目。

• 分別計算未染色的活HEP-2細胞數和染色的死細胞數。

• 計算活細胞率：活HEP-2細胞數/總細胞數×100%。

細胞凍存

• 收集對數生長期的HEP-2細胞，以1000rpm離心5分鍾收集細胞。

• 棄去上清液，加入預冷的凍存液（10% DMSO、20% FBS、70% DMEM）重懸HEP-2細胞，將細胞密度調整為(wei) 1-2×10^6/ml。

• 將重懸後的HEP-2細胞分裝入凍存管中，置於(yu) -80℃冰箱中過夜凍存。

• 次日，將凍存管轉移至液氮罐中長期保存。