貨號：STM-CL-6222 規格：1×10⁶cells/T25培養(yang) 瓶或1mL凍存管

GC-2spd細胞(ts)【GC2細胞係-小鼠精母細胞】

來源：精母細胞；SV40大T抗原轉染
細胞特征：貼壁細胞，上皮細胞樣
培養(yang) 基：DMEM＋10% FBS＋1% P/S
其他：GC-2spd細胞通過SV40大T抗原轉化獲得無限增殖能力，且在培養(yang) 過程中經過G-418篩選和單細胞克隆化處理

Tags：精母細胞

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價(jia) 格：￥ 1,400.00

提供種屬鑒定報告

GC-2spd(ts)小鼠精母細胞是一種用於(yu) 生殖生理學研究的細胞係，源自6周齡雄性BALB/c小鼠的精母細胞。GC-2spd細胞係是通過共轉染SV40大T抗原基因（pSV3neo）和溫度敏感型p53腫瘤抑製基因突變體(ti) （LTRp53cG9）構建的。轉染後，細胞經過G-418抗性篩選，持續培養(yang) 6個(ge) 月，並通過三輪有限稀釋法進行單細胞克隆化處理。

在軟瓊脂培養(yang) 實驗中，GC-2spd細胞未表現出克隆增殖，表明它們(men) 已經永生化，但未發生轉化。SV40大T抗原的引入使得細胞獲得了無限增殖的能力，但由於(yu) 在減數分裂前期階段停滯，導致其失去了進一步分化的潛力。目前，GC-2spd細胞處於(yu) 生命前期階段，是研究精母細胞增殖和分化機製的有效模型。

GC-2spd細胞(ts)特性特征

永生化特性：GC-2spd細胞通過SV40大T抗原轉化獲得無限增殖能力，且在培養(yang) 過程中經過G-418篩選和單細胞克隆化處理，顯示出永生化特性，但未表現出轉化特征。
基因表達：GC-2spd(ts)細胞係中SV40大T抗原的表達使其獲得了對細胞周期調控的影響，導致細胞停滯在減數分裂前期，失去了分化潛力。
細胞周期：由於(yu) SV40大T抗原的作用，這些細胞在細胞周期中處於(yu) 生命前期階段，表現出特定的增殖特性。
研究領域：GC-2spd細胞係廣泛應用於(yu) 生殖生理學研究，尤其是在精子發生和生殖細胞發育的機製研究中。
實驗特性：在軟瓊脂培養(yang) 中未觀察到克隆增殖，進一步確認了其永生化但不轉化的特性

GC-2spd細胞(ts)參數表

細胞名稱	GC-2spd細胞(ts)（小鼠精母細胞）
別名	GC-2
細胞類型	精母細胞；SV40大T抗原轉染（與溫度敏感p53突變體共轉染）
細胞來源	6周齡雄性BALB/c小鼠（從精母細胞中提取）
生物安全等級	2
細胞形態	上皮細胞樣，貼壁生長
細胞周期	減數分裂前期停滯（失去分化潛力）
培養基	DMEM（高糖）+ 10% FBS + 1% P/S
培養條件	37°C，5% CO₂，95%空氣
傳代比例	1:4至1:6（根據細胞生長情況調整）
換液頻率	每周2-3次
培養瓶類型	T25或T75（根據細胞量選擇）
培養時間	48小時（觀察細胞生長狀態）
凍存方法	55%基礎培養基 + 40% FBS + 5% DMSO；液氮
解凍方法	快速解凍（37°C水浴中解凍）
凍存細胞密度	≥1×10⁶ cells/mL
凍存管	1.2 mL凍存管
生長特性	永生化，但未轉化（在軟瓊脂培養中未觀察到克隆增殖）
細胞增殖	快速增殖（適合長期培養）
適應性	對培養條件適應性強
汙染物檢測	陰性
研究方向	生殖生物學（精子發生及相關機製研究）
實驗特性	用於藥物篩選、基因功能研究
保存溫度	2-8℃（短期）或-20℃（長期）
保質期	2-8℃ 2個月，-20℃ 半年
注意事項	僅供科研使用，不可用於醫藥、臨床等領域

培養教程

GC-2spd小鼠精母細胞培養教程

細胞複蘇

從(cong) 液氮中取出凍存的GC-2細胞，迅速將其置於(yu) 37°C水浴中解凍，輕輕搖晃以加速解凍過程。
解凍完成後，立即將1 mL的GC-2細胞懸液轉移至含4 mL完全培養(yang) 基的離心管中，輕輕混勻。
在1000 RPM下離心4分鍾，棄去上清液，確保GC-2細胞中的凍存保護劑被徹底去除。
向離心管中加入1-2 mL完全培養(yang) 基，輕柔吹打GC-2細胞使其均勻重懸。
將GC-2細胞懸液轉移至培養(yang) 瓶（如T25培養(yang) 瓶），或根據需要轉移至10 cm培養(yang) 皿中，加入8 mL完全培養(yang) 基，置於(yu) 培養(yang) 箱中過夜培養(yang) 。
第二天檢查GC-2細胞的密度和狀態，及時更換培養(yang) 基以去除解凍過程中可能產(chan) 生的死細胞和碎片。

細胞傳代

密度檢查：當GC-2細胞達到80%-90%的融合密度時，準備進行傳(chuan) 代。
棄去舊的培養(yang) 基，用無鈣無鎂的PBS緩衝(chong) 液輕柔洗滌GC-2細胞1-2次，以去除殘留的培養(yang) 基。
加入1 mL消化液（0.25%胰蛋白酶和0.53 mM EDTA），將培養(yang) 瓶置於(yu) 37°C培養(yang) 箱中，觀察GC-2細胞消化情況。當大部分GC-2細胞變圓並開始脫落時，輕敲培養(yang) 瓶壁以促進細胞脫離，立即加入少量完全培養(yang) 基中和消化酶。
補充6-8 mL完全培養(yang) 基，輕輕混勻GC-2細胞懸液後，在1000 RPM下離心4分鍾，棄去上清液。
向離心後的GC-2細胞沉澱中加入1-2 mL完全培養(yang) 基重懸細胞，並按1:2的比例將GC-2細胞分裝至新的培養(yang) 瓶中，每瓶加入8 mL完全培養(yang) 基，繼續培養(yang) 。

細胞凍存

凍存準備：當GC-2細胞狀態良好、密度合適時，進行凍存準備。
棄去培養(yang) 基後，用PBS輕洗GC-2細胞一次，加入1 mL胰蛋白酶進行消化。待GC-2細胞變圓脫落後，立即加入1 mL含血清的完全培養(yang) 基以中止消化反應。
在1000 RPM下離心4分鍾，棄去上清液。
將GC-2細胞重懸於(yu) 含10% DMSO的培養(yang) 基中，確保GC-2細胞濃度適當。每支凍存管加入1 mL GC-2細胞懸液。
將標記好的GC-2細胞凍存管放入-80°C冰箱中，24小時後轉移至液氮中長期保存。

注意事項

整個(ge) 操作過程中應嚴(yan) 格遵守無菌操作，以防止GC-2細胞汙染。
定期監控GC-2細胞的生長狀態，確保其維持在健康狀態。
複蘇後的GC-2細胞應盡早傳(chuan) 代，以維持其活力和增殖能力。

STR鑒定及相關

參考文獻

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