F81細胞（貓腎細胞）

F81細胞（貓腎細胞係）源自健康貓的腎髒組織，是通過kaiyun网站安全的傳(chuan) 代培養(yang) 和克隆篩選建立。F81細胞是Clone 81的亞(ya) 係，而Clone 81則來自CCC3a subline 8C，後者源自CRFK細胞係，具備良好的遺傳(chuan) 背景和生長穩定性。

F81細胞表現為(wei) 上皮樣貼壁生長，能夠在體(ti) 外連續傳(chuan) 代，且對多種病毒如犬細小病毒、貓泛白細胞減少症病毒和貓杯狀病毒等具有較高敏感性。且貓內(nei) 源性逆轉錄病毒（RD114）的分泌水平較低。F81細胞被廣泛應用於(yu) 疫苗研發和病毒學研究中，用於(yu) 評估疫苗效力和抗病毒藥物的篩選。

F81細胞特性特征

• 染色體(ti) 特征：F81細胞為(wei) 亞(ya) 二倍體(ti) 細胞係，染色體(ti) 眾(zhong) 數為(wei) 30，結構相對穩定，各代次間的染色體(ti) 畸變率較低。

• F81細胞對多種寵物病病毒表現出敏感性，包括：貓白血病病毒（FeLV）、犬細小病毒（CPV）、貓泛白細胞減少症病毒（FPLV）、貓杯狀病毒（FCV）、貓傳(chuan) 染性鼻氣管炎病毒（FIRV）、水貂病毒性腸炎病毒（MEV）

• 疫苗研發：由於(yu) 其對多種病毒的高敏感性，F81細胞廣泛應用於(yu) 寵物疫苗的研發和生產(chan) 。
  

• 檢測方法：在F81細胞中可以進行犬細小病毒的原位PCR檢測，顯示出其在病毒檢測中的應用潛力

F81貓腎細胞參數表

F81貓腎細胞培養教程

F81細胞複蘇

• 配製完全培養(yang) 基（RPMI-1640，添加10% 胎牛血清（FBS）和1% 青黴素/鏈黴素），以確保F81細胞的最佳生長狀態。
  

• 從(cong) 液氮罐中取出F81細胞凍存管，迅速放入37℃水浴中解凍，輕輕搖動，以加速F81細胞解凍過程，確保不超過1-2分鍾。

• 解凍後，將F81細胞懸液迅速轉移至含4-6 mL完全培養(yang) 基的15 mL離心管中，輕輕混勻。
  

• 以1000 RPM離心3-5分鍾，棄去上清液，保留F81細胞沉澱。

• 使用新鮮完全培養(yang) 基重懸F81細胞，將細胞轉移至T25或T75培養(yang) 瓶中，加入6-8 mL完全培養(yang) 基。
  

• 將培養(yang) 瓶置於(yu) 37℃、5% CO₂培養(yang) 箱中培養(yang) ，次日觀察F81細胞的貼壁情況。

F81細胞傳代

• 當F81細胞密度達到80%-90%時，適時進行傳(chuan) 代培養(yang) 。
  

• 棄去舊培養(yang) 基，用無鈣鎂的PBS緩衝(chong) 液洗滌F81細胞1-2次，去除殘留培養(yang) 基和代謝產(chan) 物。
  

• 加入0.25%胰蛋白酶-0.53 mM EDTA溶液（T25瓶1-2 mL，T75瓶2-3 mL），在37℃下消化1-2分鍾，期間觀察F81細胞形態。
  

• 當大部分F81細胞變圓且開始脫落時，立即加入含10% FBS的培養(yang) 基中和胰蛋白酶。

• 將F81細胞懸液以1000 RPM離心3-5分鍾，棄去上清液。
  

• 輕輕吹打重懸F81細胞，按1:2至1:5的比例分至新培養(yang) 瓶中，補加6-8 mL完全培養(yang) 基。

F81細胞凍存

• 配製F81細胞凍存液：55%基礎培養(yang) 基（RPMI-1640），40% FBS，5% 二甲基亞(ya) 碸（DMSO）。
  

• 在傳(chuan) 代後收集F81細胞，離心去除上清液。
  

• 使用凍存液重懸F81細胞，分裝至凍存管，每管1 mL細胞懸液。
  

• 將F81細胞凍存管置於(yu) 預冷的冷凍盒中，以每小時降溫1℃的速度降至-80℃，隨後轉移至液氮罐中長期保存。
  

注意事項

• 無菌操作：操作全程在生物安全櫃中進行，確保F81細胞無菌，避免汙染。

• 細胞狀態檢查：定期觀察F81細胞形態，確保其貼壁性和健康狀態良好。

• 避免過度傳(chuan) 代：過度傳(chuan) 代可能影響F81細胞的生長特性和病毒敏感性，建議控製傳(chuan) 代次數。