細胞培養(yang) 
細胞工程 
細胞生物學 
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品牌價(jia) 值 
貨號：STM-CL-8158 規格：1×10⁶cells/T25培養(yang) 瓶或1mL凍存管
CRFK細胞（貓腎細胞）
- 來源：腎，皮層；正常
- 細胞特征：貼壁細胞 , 上皮細胞樣
- 培養(yang) 基：MEM（ATCC改良）＋10% FBS＋1% P/S
- 其他：CRFK細胞可以傳(chuan) 代多達10代，CRFK細胞不含牛病毒性痢疾(BVD)病毒
CRFK（貓腎細胞）細胞係由RA Van Deusen於(yu) 1962年從(cong) 一隻12周齡雌性家貓的腎髒皮層分離建立，是一種永生化的上皮樣細胞，具有貼壁生長的特性。CRFK細胞廣泛應用於(yu) 病毒學研究、疫苗生產(chan) 以及抗病毒藥物篩選等領域，也常作為(wei) 基因轉染研究的宿主細胞，成為(wei) 研究貓科病毒感染機製和開發相關(guan) 治療方法的重要工具。CRFK貓腎細胞該細胞係由RA Van Deusen保藏，是合適的轉染宿主。
CRFK細胞特性特征
CRFK細胞對多種病毒表現出敏感性：貓泛白細胞減少症病毒（FPLV）、貓杯狀病毒、呼腸孤病毒（貓）、貓皰疹病毒1型、犬細小病毒、狂犬病病毒
CRFK細胞不含牛病毒性腹瀉（BVD）病毒，具有較高的實驗安全性
CRFK細胞係在基因表達方麵具有穩定性，適合用於(yu) 轉染實驗和基因功能研究。作為(wei) 轉染宿主，它能夠有效表達外源基因。
CRFK細胞參數表
| 細胞名稱 | CRFK細胞（貓腎細胞） |
| 細胞別稱 | CrFK; Crfk; Crandell Reese Feline Kidney; Crandell Feline Kidney; CCC; Crandell'sCat Cell |
| ATCC貨號 | ATCC: CCL-94 |
| 供體信息 | 雌性家貓，12周齡 |
| 組織來源 | 腎髒皮層 |
| 細胞形態 | 上皮樣（多角形或梭形） |
| 細胞類型 | 自發永生化細胞 |
| 生長特性 | 貼壁生長 |
| 生物安全等級 | 1 |
| 無菌檢測 | 細菌、酵母、支原體檢測均為陰性 |
| 病原體檢查 | HIV、乙型肝炎、丙型肝炎檢測均為陰性 |
| 培養基 | MEM（改良的最小必需培養基） + 10% FBS + 1% P/S |
| 培養環境 | 溫度：37°C；CO₂濃度：5%；空氣：95% |
| 換液頻次 | 每2-3天更換一次 |
| 傳代比例 | 1:3至1:4（具體情況視細胞生長速度及密度決定） |
| 消化時間 | 2-3分鍾 |
| 凍存液配方 | 55% 基礎培養基 + 40% FBS + 5% DMSO |
| 凍存條件 | 液氮存儲 |
培養教程
CRFK細胞（貓腎細胞）培養教程
CRFK細胞的傳代步驟
所有操作均需在生物安全櫃內(nei) 進行，以確保CRFK細胞培養(yang) 的無菌環境。
準備完全培養(yang) 基、PBS（磷酸鹽緩衝(chong) 液）和0.25%胰蛋白酶-EDTA溶液。
使用無菌吸管吸出CRFK細胞培養(yang) 瓶中的舊培養(yang) 基。
加入約2 ml的PBS，輕輕搖晃培養(yang) 瓶以清洗CRFK細胞表麵，隨後吸出PBS。
加入約1 ml的0.25%胰蛋白酶-EDTA溶液，輕輕搖動使其覆蓋CRFK細胞表麵。
在顯微鏡下觀察，消化時間為(wei) 2-3分鍾，直到CRFK細胞呈圓形並逐漸脫落。
當CRFK細胞大部分脫落時，加入3 ml含血清的培養(yang) 基，以中和胰蛋白酶作用。
輕輕吹打混勻，使CRFK細胞懸浮成為(wei) 單細胞狀態。
將CRFK細胞懸液轉移至離心管中，以1200 rpm離心3分鍾，棄去上清液。
加入新鮮的完全培養(yang) 基重懸CRFK細胞。
按1:3至1:4的比例將CRFK細胞接種至新的培養(yang) 瓶中。
擰鬆瓶蓋或使用透氣瓶蓋，將培養(yang) 瓶放置於(yu) 37°C、5% CO₂的培養(yang) 箱中繼續培養(yang) 。
CRFK細胞的凍存步驟
配製CRFK細胞凍存液，常用配方為(wei) ：55%完全培養(yang) 基 + 40%胎牛血清 + 5% DMSO（二甲基亞(ya) 碸）。
按照傳(chuan) 代步驟收集CRFK細胞沉澱，並加入凍存液重懸。
將CRFK細胞懸液分裝至凍存管中，放入程序冷凍盒中，緩慢降溫至-80°C。
隔夜後將凍存管轉移至液氮中長期保存。
CRFK細胞培養的注意事項
胰蛋白酶的消化時間需根據CRFK細胞密度和狀態靈活調整，避免過度消化損傷(shang) 細胞。
在傳(chuan) 代過程中，應避免過度吹打，以防止產(chan) 生氣泡影響CRFK細胞的生長。
定期檢查CRFK細胞的生長狀態，確保無汙染，並根據細胞密度及時進行傳(chuan) 代操作。