DAMI細胞係（人巨核細胞白血病細胞係）

DAMI細胞是一株從(cong) 巨核細胞白血病患者外周血中建立的人類巨核細胞白血病細胞係，廣泛用於(yu) 研究巨核細胞的生化特性及分化機製。

DAMI細胞在巨核細胞研究中具有獨特的優(you) 勢，適合用於(yu) 探索血小板生成和巨核細胞分化的生物過程。盡管DAMI細胞係與(yu) 另一個(ge) 巨核細胞白血病細胞係HEL 92.1.7在STR（短串聯重複序列）檢測中表現出相似性，但由於(yu) DAMI細胞被存入ATCC專(zhuan) 利庫以支持專(zhuan) 利申請，其仍然對研究者公開使用。

DAMI細胞係特性特征

• 生長特性：DAMI細胞主要以懸浮形式生長，倍增時間為(wei) 24-30小時。這種生長方式使其適合於(yu) 大規模培養(yang) 和實驗研究。

• 形態特征：DAMI細胞呈現淋巴母細胞樣的形態，主要以懸浮形式存在，少量細胞可能貼壁。

• 陽性反應：至少89%的DAMI細胞能夠與(yu) 血小板糖蛋白（如GP Ib和IIb/IIIa）及血型糖蛋白單克隆抗體(ti) 反應。
  

• 陰性反應：DAMI細胞不與(yu) 抗淋巴腺、單核細胞、粒性白細胞和巨噬細胞抗原的抗體(ti) 反應。是研究巨核細胞特異性功能的重要工具。

• 基因表達：DAMI細胞的基因表達特征與(yu) 巨核細胞的分化和功能密切相關(guan) ，具體(ti) 的基因表達譜尚需進一步研究以揭示其在巨核細胞生物學中的作用。

• 細胞標記：DAMI細胞的特定糖蛋白標記使其在流式細胞術和其他免疫學研究中具有重要應用價(jia) 值。

DAMI細胞係參數表

DAMI人巨核細胞白血病細胞係培養教程

細胞複蘇

• 凍存DAMI細胞：從(cong) 液氮中取出凍存管，迅速放入37℃水浴中並輕輕搖動，直至完全解凍。

• 移液：將解凍的DAMI細胞懸液轉移至15ml離心管中，加入9ml預熱的IMDM培養(yang) 基。

• 離心：以1000rpm（約200g）離心3-5分鍾，去除上清液以去除凍存介質。

• 重懸細胞：使用適量預熱的IMDM培養(yang) 基重懸DAMI細胞，並轉移至T25培養(yang) 瓶中，輕輕混勻。

• 初始培養(yang) ：將DAMI細胞置於(yu) 37℃、5% CO₂培養(yang) 箱中培養(yang) ，24小時後觀察細胞的附著及生長狀態。

細胞培養

• 細胞生長環境：將DAMI細胞培養(yang) 瓶放置於(yu) 37℃、5% CO₂的培養(yang) 箱中，維持懸浮狀態。
  

• 換液頻率：每2-3天更換培養(yang) 基，確保DAMI細胞的良好生長。

• 細胞觀察：每隔1-2天通過顯微鏡觀察DAMI細胞的形態和生長情況，確認細胞處於(yu) 健康狀態。

細胞傳代

• 傳(chuan) 代條件：當DAMI細胞密度達到3×10⁵ - 7×10⁵ cells/mL時，進行傳(chuan) 代。一般傳(chuan) 代比例為(wei) 1:3或1:5。

• 吸去舊培養(yang) 基，用PBS輕輕衝(chong) 洗DAMI細胞。
  

• 加入胰酶（1-2分鍾）消化懸浮細胞至脫落。

• 立即加入培養(yang) 基終止消化反應，確保細胞完整性。

• 1000rpm離心3-5分鍾，去除上清液後用新鮮培養(yang) 基重懸DAMI細胞。

• 傳(chuan) 代培養(yang) ：將DAMI細胞懸液按1:3至1:5的比例重新分至新培養(yang) 瓶中，繼續在培養(yang) 箱中孵育。

DAMI細胞凍存

• 凍存液準備：使用90% FBS和10% DMSO配製凍存液。

• 細胞狀態：在DAMI細胞進入對數生長期時進行凍存，以確保細胞活性和存活率。

• 將DAMI細胞懸液重懸於(yu) 凍存液中，輕輕混勻。
  

• 按比例分裝至凍存管中，貼好標簽。

• 將凍存管放入-80℃冰箱中降溫過夜，隨後移至液氮中長期保存。

注意事項

• 無菌操作：所有DAMI細胞操作必須在超淨工作台內(nei) 完成，確保無菌條件，避免汙染。

• 細胞狀態監測：定期觀察DAMI細胞生長狀態，檢查懸浮細胞的健康狀況，及時處理異常情況。

• 凍存和複蘇時的速度：凍存和複蘇過程需要快速、穩妥，以減少DAMI細胞的損傷(shang) 和死亡率。

• 細胞培養(yang) 條件的穩定性：確保DAMI細胞培養(yang) 環境的穩定性，包括培養(yang) 箱內(nei) 的溫度和氣體(ti) 條件，避免細胞狀態波動。