
ARH77細胞(人漿細胞白血病細胞係)
- 來源:外周血
- 細胞特征:懸浮細胞 ,淋巴母細胞樣
- 培養(yang) 基:RPMI-1640+10% FBS+1% P/S
- 其他:ARH-77細胞呈漿母細胞形態,具有間變性特點;細胞表麵表達經典的漿細胞標誌CD38和CD138
ARH77細胞係是來源於(yu) 一名33歲白人女性(患有IgG型漿細胞白血病)的外周血樣本。最初被認為(wei) 是漿細胞白血病的模型,但研究發現,ARH77細胞係是通過EB病毒(EBV)轉化形成的B淋巴母細胞樣細胞係。
ARH77細胞係也用於(yu) 衍生其他相關(guan) 細胞株,如HMy2.C1R,通過照射和選擇I類抗原丟(diu) 失的突變體(ti) HMy2後,進一步開發出C1R-neo、C1R-sB7和C1R-B7細胞株。
ARH77細胞係廣泛用於(yu) 研究免疫學及相關(guan) 免疫係統疾病,尤其在多發性骨髓瘤和漿細胞白血病的藥物篩選及治療靶點探索中具有重要意義(yi) 。ARH77細胞係在美國國家標準與(yu) 技術研究院(ATCC)被命名為(wei) CRL-1621。
ARH77細胞特性特征
ARH77細胞表麵表達經典的漿細胞標誌CD38和CD138
少數細胞表達CD20、CD44、CD45、CD19和CD23
ARH77細胞對EB核抗原(EBNA+)和EB病毒衣殼抗原(EBVCA+)呈陽性,表明細胞被EB病毒轉化
ARH77細胞表達CD11a、CD19、CD28、CD49e,不表達CD38
ARH77細胞免疫球蛋白表型為(wei) IgG1,κ輕鏈
ARH77細胞之前曾感染支原體(ti) ,但已經治愈
ARH77細胞係被廣泛用於(yu) 多發性骨髓瘤和漿細胞白血病的研究,尤其是藥物篩選和治療靶點的探索
ARH77細胞參數表
細胞名稱 | ARH77細胞(人漿細胞白血病細胞) |
別名 | ARH 77; ARH77 |
源自患者 | 33歲白人女性,IgG型漿細胞白血病 |
細胞類型 | B淋巴母細胞樣細胞係 |
保藏機構 | ATCC: CRL-1621, BCRC: 60385, DSMZ: ACC-512, ECACC: 88121201 |
形態特征 | 淋巴母細胞樣,圓形單細胞或成簇懸浮,少數貼壁細胞不規則 |
培養基 | RPMI 1640 + 10% 胎牛血清 (FBS) + 1% 青黴素/鏈黴素 (P/S) |
完全培養基 | ARH-77人外周血淋巴細胞完全培養基(配方:88% RPMI-1640 + 10% 特級胎牛血清 + 1% 雙抗 + 1% 丙酮酸鈉) |
氣體組成 | 95%空氣,5%二氧化碳;37℃ |
傳代頻率 | 每2-3天傳代,細胞密度達到80%-90%時進行傳代 |
倍增時間 | ~30-110小時 |
凍存液 | 含10% DMSO的細胞保存液;液氮存儲 |
無菌檢測 | 細菌、酵母、支原體檢測均為陰性 |
病原體檢查 | HIV、乙型肝炎、丙型肝炎檢測均為陰性 |
生物安全等級 | BSL-2 |
抗原表達 | CD11a+、CD19+、CD20+、CD28+、CD38-、CD49e+ |
同種型 | IgG1,κ輕鏈 |
EB病毒狀態 | EB核抗原(EBNA+)和EB病毒衣殼抗原(EBVCA+)陽性 |
運輸方式 | 複蘇發貨或幹冰冷凍發貨 |
供應限製 | 僅供科學研究之用 |
細胞密度 | 1 x 10^6 viable cells/ml |
細胞處理注意 | 處理時請注意收集貼壁細胞,避免直接倒掉培養液 |
細胞凍存注意 | 凍存時,細胞密度不低於1 x 10^6/ml,每支凍存管凍存1ml細胞懸液 |
注意事項 | ARH77細胞為懸浮細胞,請注意離心收集細胞懸液;請勿直接倒掉細胞培養液 |
培養教程
ARH77人漿細胞白血病細胞培養教程
ARH77細胞複蘇
配製完全培養(yang) 基:RPMI-1640培養(yang) 基,添加10%胎牛血清(FBS)和1%青黴素/鏈黴素(P/S)。提前將完全培養(yang) 基預熱至37℃。
將凍存的ARH77細胞懸液快速放入37℃水浴中,注意甩動凍存管使ARH77細胞均勻解凍,避免長時間水浴。
解凍後的ARH77細胞懸液轉移至15ml離心管,加入4ml完全培養(yang) 基,輕輕混勻。以1000 RPM離心4分鍾,棄去上清液。
使用1-2ml完全培養(yang) 基輕輕吹打重懸ARH77細胞。確認細胞充分分散,避免細胞團聚。
將重懸的ARH77細胞懸液轉移至T25培養(yang) 瓶中,或將其放入10cm培養(yang) 皿中,補充約8ml完全培養(yang) 基。置於(yu) 37℃、5% CO₂培養(yang) 箱中孵育過夜。
ARH77細胞傳代
第二天觀察ARH77細胞的生長狀態,確保細胞密度達到80%-90%,並確認無汙染。ARH77細胞為(wei) 懸浮生長型細胞,容易在培養(yang) 基中形成懸浮團塊。
傳(chuan) 代時,先棄去舊的培養(yang) 基,用無鈣、鎂的PBS洗滌ARH77細胞1-2次。
因ARH77細胞為(wei) 懸浮細胞,無需胰蛋白酶消化,直接通過離心收集細胞懸液。將細胞懸液轉移至15ml離心管中,1000 RPM離心4分鍾,棄去上清。
使用新鮮的完全培養(yang) 基重懸ARH77細胞懸液,按1:2或1:3比例進行稀釋傳(chuan) 代。重懸後的ARH77細胞移入新的培養(yang) 瓶中,添加8-10ml新鮮培養(yang) 基。繼續孵育於(yu) 37℃、5% CO₂的培養(yang) 箱中。
ARH77細胞凍存
當ARH77細胞生長良好、密度合適時(通常為(wei) 80%-90%),準備凍存。
先將ARH77細胞收集並離心,棄去上清。使用冷凍保護劑(如90%胎牛血清+10%DMSO)重懸細胞,確保細胞密度不低於(yu) 1 x 10⁶/ml。
每管凍存1ml的ARH77細胞懸液,並對凍存管進行清晰標識。
將凍存管置於(yu) 程序降溫盒中,慢速降溫至-80℃,之後轉移至液氮罐中長期保存。
ARH77細胞培養中的注意事項
ARH77細胞為(wei) 懸浮型生長,進行傳(chuan) 代時要注意小心處理懸浮細胞,避免操作時細胞流失。離心步驟尤其重要,避免使用胰酶等消化劑。
培養(yang) 基需按標準配製,新鮮的培養(yang) 基能夠提供更好的ARH77細胞生長環境,避免使用經過多次處理的舊培養(yang) 基。
所有操作應在二級生物安全櫃內(nei) 進行,防止汙染。工作人員需穿戴合適的個(ge) 人防護裝備,確保安全操作。
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STR鑒定及相關
Amelogenin | X |
CSF1PO | 6,10 |
D2S1338 | 17 |
D3S1358 | 16 |
D5S818 | 10,13 |
D6S1043 | 11,19 |
D7S820 | 7,12 |
D8S1179 | 14,15 |
D12S391 | 19,20 |
D13S317 | 11,13 |
D16S539 | 9,13 |
D18S51 | 14,16 |
D19S433 | 14,15 |
D21S11 | 29,30 |
FGA | 20,21 |
Penta D | 10 |
Penta E | 12 |
TH01 | 8,9.3 |
TPOX | 8 |
vWA | 17 |