nalm6細胞係（人B淋巴白血病細胞係）

NALM-6細胞係來源於(yu) 1976年複發的19歲急性淋巴細胞白血病（ALL）患者的外周血，是一種B細胞前體(ti) 白血病細胞係，廣泛應用於(yu) 急性白血病研究。

NALM-6細胞係的建立促進了對白血病細胞代謝重編程的研究，包括糖酵解、脂質和碳水化合物代謝以及mTORC1途徑相關(guan) 基因的表達譜研究。nalm6細胞係在反向遺傳(chuan) 學和全轉錄組分析中的應用，有助於(yu) 解析白血病進展和耐藥性的分子機製。
利用NALM-6細胞係的克隆變體(ti) （如G5克隆）和抗性細胞係（如高HPRT突變頻率或抗性指數的C9克隆），可以深入了解白血病的異質性。對白血病細胞動力學的研究，特別是在糖皮質激素耐藥性和MSH2表達背景下，有助於(yu) 提出更有效的ALL治療方法。
NALM-6細胞係還被用於(yu) 研究治療靶點的療效和現有耐藥機製，對細胞毒性試劑的敏感性及其在同源重組（HDR）修複功能中的作用。

NALM-6細胞呈淋巴細胞樣形態，通常為(wei) 圓形或卵圓形，細胞核較大，細胞質較少。

nalm6細胞係特性

• nalm6細胞代表早期B細胞發育階段的白血病細胞

• nalm6細胞表達B細胞特異性標記物，如CD19和CD79a；缺乏表麵免疫球蛋白（sIg）表達；表達終末脫氧核苷酸轉移酶（TdT）

• nalm6細胞攜帶t(5;12)(q33.2;p13.2)染色體(ti) 易位，導致ETV6-PDGFRB融合基因的形成

• nalm6細胞具有近二倍體(ti) 核型、攜帶野生型p53基因、CDKN2A/B基因缺失

• 免疫表型：CD10+, CD19+, CD79a+, HLA-DR+，CD20-, CD34-

• 基因表達特點：高表達PAX5和EBF1等B細胞特異性轉錄因子、表達RAG1和RAG2基因，與(yu) V(D)J重組相關(guan)

• 藥物敏感性：對某些靶向B細胞受體(ti) 信號通路的抑製劑敏感、對某些DNA損傷(shang) 誘導劑和拓撲異構酶抑製劑敏感

• nalm6細胞具有較高的基因編輯效率，特別適合CRISPR/Cas9介導的基因編輯、可用於(yu) 研究B細胞發育和白血病發生機製

• nalm6細胞生長速度相對較快，細胞形態均一，適合形態學研究，可用於(yu) 體(ti) 外藥物篩選和機製研究

nalm6細胞係參數表

nalm6人B淋巴白血病細胞係培養教程

細胞複蘇步驟

• 從(cong) 液氮中取出 NALM-6 細胞凍存管，迅速置於(yu) 37°C水浴中快速解凍。

• 解凍後，將 NALM-6 細胞懸液轉移到含有預熱培養(yang) 基的離心管中。

• 以1000 rpm離心4分鍾，棄上清。

• 用新鮮培養(yang) 基重懸 NALM-6 細胞，轉移到培養(yang) 瓶中。

日常培養

• 細胞密度：保持在0.5-2 × 10⁶ cells/mL之間。

• 換液頻率：每2-3天換液一次。

• 觀察：定期觀察 NALM-6 細胞形態和生長狀況。

傳代方法

• 當 NALM-6 細胞密度達到80%-90%時進行傳(chuan) 代，傳(chuan) 代比例通常為(wei) 1:2到1:4。

方法一（補充新鮮培養基）：

• 輕輕混勻培養(yang) 瓶中的 NALM-6 細胞懸液。

• 按1:2到1:4的比例直接加入新鮮培養(yang) 基稀釋 NALM-6 細胞。

• 輕輕混勻後分裝到新的培養(yang) 瓶中。

方法二（離心換液）：

• 收集 NALM-6 細胞懸液到離心管中。

• 以900-1200 rpm（約250g）離心3-5分鍾。

• 棄去上清，用新鮮培養(yang) 基重懸 NALM-6 細胞。

• 按所需密度分裝到新的培養(yang) 瓶中。

細胞凍存

• 凍存液配方：55% 基礎培養(yang) 基 + 40% FBS + 5% DMSO

• 將 NALM-6 細胞密度調整到1-2 × 10⁶ cells/mL。

• 將 NALM-6 細胞懸液分裝到凍存管中，每管1mL。

• 使用程序降溫盒或細胞凍存容器，將 NALM-6 細胞緩慢降溫至-80°C。

• 24小時後轉移到液氮中長期保存。

注意事項

• 所有操作需在無菌條件下進行。

• 定期檢查 NALM-6 細胞是否有汙染。

• 避免 NALM-6 細胞過度生長或密度過低。

• 傳(chuan) 代次數不宜過多，建議使用10代以內(nei) 的 NALM-6 細胞。

• 定期進行支原體(ti) 檢測。

細胞狀態監測

• 每天觀察 NALM-6 細胞形態和密度。

• 使用台盼藍染色法檢測 NALM-6 細胞活力。

• 必要時進行 NALM-6 細胞周期分析和免疫表型檢測。

傳代的均勻性措施

• 充分混勻 NALM-6 細胞懸液：

• 輕輕搖晃或輕拍培養(yang) 瓶，使 NALM-6 細胞充分懸浮。

• 使用移液器反複輕柔吹打 NALM-6 細胞懸液5-10次，確保細胞分散均勻。

  準確計數：

• 使用血球計數板或自動細胞計數儀(yi) 準確計數 NALM-6 細胞濃度。

• 計數前再次輕輕混勻 NALM-6 細胞懸液，確保取樣代表性。

  標準化操作：

• 製定標準操作流程（SOP），包括具體(ti) 的混勻次數、離心參數等。

• 培訓操作人員嚴(yan) 格按照SOP執行，減少人為(wei) 差異。

  使用適當的離心參數：

• 離心速度通常為(wei) 900-1200 rpm（約250g），時間3-5分鍾。

• 離心後輕輕重懸 NALM-6 細胞沉澱，避免形成細胞團塊。

  均勻分裝：

• 使用移液器多次輕柔吹打重懸後的 NALM-6 細胞，確保充分混勻。

• 緩慢均勻地將 NALM-6 細胞懸液分裝到新的培養(yang) 瓶中。

  控製細胞密度：

• 保持一致的傳(chuan) 代密度，通常為(wei) 0.5-2 × 10⁶ cells/mL。

• 定期監測 NALM-6 細胞生長曲線，確保傳(chuan) 代時機的一致性。

  使用細胞篩網：

• 如果出現 NALM-6 細胞團塊，可使用40-70μm的細胞篩網過濾細胞懸液。

  定期檢查：

• 傳(chuan) 代後24小時內(nei) 檢查各個(ge) 培養(yang) 瓶的 NALM-6 細胞狀態，確保均勻性。

  記錄和追蹤：

• 詳細記錄每次傳(chuan) 代的操作細節和觀察結果。

• 定期分析數據，及時發現和解決(jue) 潛在問題。