ccrf-cem細胞（人急性淋巴細胞白血病細胞）

CCRF-CEM細胞是由G.E. Foley等人於(yu) 1964年從(cong) 一名四歲高加索女性急性淋巴細胞白血病患者的外周血中分離出的T淋巴母細胞係。

ccrf-cem細胞具有淋巴母細胞樣的形態特征，以懸浮生長方式培養(yang) 。其染色體(ti) 數目為(wei) 47，變異範圍在41至95之間，沒有持續丟(diu) 失或獲得特定染色體(ti) 的現象。CCRF-CEM細胞在體(ti) 外培養(yang) 中顯示出較快的增殖速度，平均每24至30小時分裂一次。
ccrf-cem細胞50個(ge) 核型沒有顯示特定染色體(ti) 的持續丟(diu) 失或獲得。具有45條染色體(ti) 的細胞中28%為(wei) C-；53%的細胞具有額外的D，35%具有額外的F。隻有N1和N18不受增益或損失的影響。未發現標記染色體(ti) 。

ccrf-cem細胞特性

• ccrf-cem細胞形態：淋巴母細胞樣形態，懸浮生長，平均每24至30小時分裂一次。

• 染色體(ti) 數目：47，範圍41至95，無特定染色體(ti) 的持續丟(diu) 失或獲得。

• ccrf-cem細胞在敘利亞(ya) 倉(cang) 鼠中顯示致瘤性。

• 抗原表達：CD3；Homo sapiens，表達； CD4；Homo sapiens，表達；CD5；Homo sapiens，表達；CD7；Homo sapiens，表達

• 基因表達：CD3；CD5；CD7；CD4

• 同工酶：ADA，1；ES-D，1；G6PD，B；GLO-I，1；PEP-D，1；PGD，C；PGM1, 1；PGM3，0

ccrf-cem細胞參數表

ccrf-cem細胞培養

解凍步驟

• 盡快解凍並開始培養(yang) CCRF-CEM細胞。如需繼續冷凍存儲(chu) ，應在液氮蒸汽相中存儲(chu) ，不應在-70°C存儲(chu) ，以免影響細胞活力。

• 將CCRF-CEM凍存瓶輕輕振蕩後放入37°C的水浴中解凍。為(wei) 避免汙染，保持O形圈和瓶蓋遠離水中。解凍應迅速進行，約2分鍾。
  

• 一旦完全解凍，立即從(cong) 水浴中取出，用70%乙醇浸泡或噴灑消毒。從(cong) 此步驟開始，所有操作應在嚴(yan) 格無菌條件下進行。

• 將CCRF-CEM細胞懸浮液以約125 x g離心5至10分鍾。去除上清後，將細胞沉澱轉移到合適大小的培養(yang) 瓶中（參考具體(ti) 批次信息確定稀釋比例）。
  

• 重要的是在細胞恢複過程中避免培養(yang) 基過度堿化。建議在加入瓶內(nei) 內(nei) 容之前，將含有生長培養(yang) 基的培養(yang) 瓶放入孵育箱中至少15分鍾，使培養(yang) 基達到正常pH值（7.0至7.6）。

CCRF-CEM細胞的傳代方法

• 維持CCRF-CEM細胞密度在2至3 X 10^5 到 1至2 X 10^6 個(ge) 可存活細胞/mL之間。
  

• 可通過添加新鮮培養(yang) 基或更換培養(yang) 基來維持培養(yang) 。

• 或者，通過離心和後續懸浮在2至3 X 10^5 可存活細胞/mL的濃度來建立新的培養(yang) 。

• 每2至3天添加新鮮培養(yang) 基（體(ti) 積的20%至30%）。
  

CCRF-CEM細胞的凍存方法

• 使用含有95%完全培養(yang) 基和5% DMSO的凍存液。

• 凍存前建議在CCRF-CEM細胞的前3代進行細胞凍存，以備後續實驗使用。