NFS-60細胞（小鼠髓性白血病淋巴細胞）

NFS-60細胞係源自小鼠髓性白血病，通過Cas-Br-MuLV野生小鼠生態型逆轉錄病毒誘導產(chan) 生。NFS60細胞係在形態上表現為(wei) 淋巴母細胞，適合用於(yu) 免疫係統疾病研究，並且是進行轉染實驗的理想宿主。

NFS-60細胞特性特征

• 依賴性：NFS60細胞對粒細胞集落刺激因子（G-CSF）有依賴性
  

• 反應性：NFS60細胞對白細胞介素-3（IL-3）和巨噬細胞集落刺激因子（M-CSF）有反應

• 基因特征：NFS60細胞含有由逆轉錄病毒整合引起的截短型c-myb原癌基因

NFS60細胞參數表

NFS-60小鼠髓性白血病淋巴細胞培養教程

NFS-60細胞複蘇

• 從(cong) 液氮中取出凍存的NFS-60細胞，迅速在37°C水浴中解凍。

• 將NFS-60細胞懸液轉移到含有預熱培養(yang) 基的離心管中。

• 低速離心（約200g，5分鍾）去除凍存保護劑。

• 棄去上清液，用新鮮培養(yang) 基重懸NFS-60細胞。

• 將NFS-60細胞轉移到培養(yang) 瓶中，置於(yu) 培養(yang) 箱中培養(yang) 。

日常維護

• 每2-3天更換一次培養(yang) 基。

• 觀察NFS-60細胞生長狀態，保持NFS-60細胞密度在適當範圍內(nei) 。

傳代

• 當NFS-60細胞密度達到約1×10^6 cells/ml時進行傳(chuan) 代。

• 傳(chuan) 代比例通常為(wei) 1:2至1:4，根據NFS-60細胞生長情況調整。

• 收集NFS-60細胞懸液，低速離心。

• 棄去上清液，用新鮮培養(yang) 基重懸NFS-60細胞。

• 將適量NFS-60細胞轉移到新的培養(yang) 瓶中。

細胞凍存

• 凍存液：90% FBS + 10% DMSO

• 收集對數生長期的NFS-60細胞，調整密度至約5×10^6 cells/ml。

• 緩慢加入等體(ti) 積凍存液，輕輕混勻。

• 將NFS-60細胞懸液分裝到凍存管中，每管1ml。

• 使用程序降溫盒在-80°C冰箱中緩慢降溫。

• 24小時後轉移到液氮中長期保存。

NFS-60細胞的培養時間和可能遇到的問題

培養時間

• NFS-60細胞的培養(yang) 時間取決(jue) 於(yu) 實驗的具體(ti) 需求和NFS-60細胞的生長速度。一般情況下，每2-3天更換一次培養(yang) 基並進行傳(chuan) 代。傳(chuan) 代比例通常為(wei) 1:2至1:4，NFS-60細胞的生長周期大約為(wei) 2-3天。具體(ti) 的培養(yang) 時間可根據NFS-60細胞的生長狀態和實驗需求進行調整。

可能遇到的問題

• 汙染問題

• 細菌、真菌、黴菌汙染：會(hui) 導致NFS-60細胞死亡或生長異常，需保持無菌操作並定期檢查培養(yang) 基和NFS-60細胞狀態。

• 支原體(ti) 汙染：難以察覺，但會(hui) 影響NFS-60細胞的生長和實驗結果，需定期進行支原體(ti) 檢測。

  
  

• NFS-60細胞狀態不良

• 細胞形態異常：可能由於(yu) 培養(yang) 條件不適或汙染引起，應檢查培養(yang) 基成分和環境條件。

• 細胞增殖緩慢：可能由於(yu) 培養(yang) 基成分不足或細胞因子（如G-CSF）濃度不夠，應確保培養(yang) 基和添加劑的新鮮和正確比例。

  
  

• NFS-60細胞凍存和複蘇問題

• 細胞凍存不當：若凍存過程中NFS-60細胞受損，會(hui) 影響複蘇後的NFS-60細胞活力，應確保凍存液配比正確（10% DMSO + 90% FBS）並使用程序降溫盒。

• 複蘇後細胞活力低：複蘇過程中操作不當或凍存時間過長會(hui) 影響NFS-60細胞活力，應迅速解凍並及時轉移到預熱的培養(yang) 基中。

  
  

• NFS-60細胞依賴性問題

• G-CSF依賴性：NFS-60細胞對G-CSF有依賴性，缺乏G-CSF會(hui) 導致NFS-60細胞無法正常生長，應確保培養(yang) 基中G-CSF的濃度適宜（15 ng/ml）。

  
  

• NFS-60細胞傳(chuan) 代問題

• 傳(chuan) 代比例不當：傳(chuan) 代比例過高或過低都會(hui) 影響NFS-60細胞的生長狀態，應根據NFS-60細胞密度和生長情況調整傳(chuan) 代比例，一般為(wei) 1:2至1:4。

• 傳(chuan) 代頻率不當：傳(chuan) 代過頻或過稀都會(hui) 影響NFS-60細胞的健康狀態，應根據NFS-60細胞生長速度每2-3天進行一次傳(chuan) 代。