EOL-1細胞（急性髓細胞－嗜酸粒細胞－白血病細胞）

EOL-1細胞係源自於(yu) 1984年診斷的33歲男性急性髓係（嗜酸性粒細胞）白血病患者的外周血。EOL-1細胞係以其攜帶的KMT2A (MLL)部分串聯重複為(wei) 特征，廣泛應用於(yu) 研究急性髓係白血病的生物學特性和病理機製，以及藥物篩選的研究。
EOL-1細胞在標準培養(yang) 條件下展示了成肌細胞的特征，並能夠在多種刺激下分化為(wei) 成熟的嗜酸性粒細胞，是研究免疫反應和嗜酸性粒細胞功能的有價(jia) 值模型。

EOL-1細胞攜帶一個(ge) MLL部分串聯重複部分、也被用於(yu) 評估針對分化簇-37（CD37）的抗體(ti) -藥物偶聯物AGS67E在治療B/T細胞惡性腫瘤中的作用，以及抗血管細胞粘附分子-1（VCAM-1）單克隆抗體(ti) 在小鼠哮喘模型中的抑製效果。這使得EOL-1細胞不僅(jin) 在白血病研究中具有重要意義(yi) ，也在免疫和過敏反應研究中發揮了關(guan) 鍵作用。

EOL-1細胞特性特征

• 分化能力：在適當的刺激下，EOL-1細胞能夠分化為(wei) 功能成熟的嗜酸粒細胞，這使其成為(wei) 研究嗜酸粒細胞生物學及其在免疫反應中的作用的重要模型。

• 基因特征：EOL-1細胞攜帶KMT2A (MLL)的部分串聯重複，這與(yu) 多種白血病的發生相關(guan) 。

• 抗原表達：EOL-1細胞表達多種與(yu) 嗜酸粒細胞相關(guan) 的標誌物，包括白血球介素3、顆粒白血球-巨噬細胞集落刺激因子受體(ti) CD95及CD49d等。

• 功能特征：EOL-1細胞在分化過程中會(hui) 合成嗜伊紅性白血球陽離子蛋白，表明其在嗜酸粒細胞功能中的活躍參與(yu)

EOL-1細胞參數表

EOL-1急性髓細胞－嗜酸粒細胞－白血病細胞培養教程

細胞複蘇

• 從(cong) 液氮中取出凍存管，立即將其放入37°C水浴中，迅速解凍（約1-2分鍾），並輕輕搖晃以加速解凍過程。
  

• 將解凍後的EOL-1細胞懸液轉移至含有4 mL完全培養(yang) 基（RPMI-1640 + 10% FBS + 1% P/S）的離心管中，輕輕混合均勻。
  

• 在1000 rpm下離心4分鍾，棄去上清液。
  

• 向離心管中加入1-2 mL完全培養(yang) 基，輕輕吹打混勻。
  

• 將EOL-1細胞懸液轉移至T25培養(yang) 瓶中，添加約8 mL的完全培養(yang) 基，然後放入37°C、5% CO₂的培養(yang) 箱中靜置過夜。
  

• 第二天檢查EOL-1細胞狀態，並更換培養(yang) 基。
  

細胞傳代

• 當EOL-1細胞密度達到80%-90%時進行傳(chuan) 代。
  

• 棄去培養(yang) 上清，使用不含鈣、鎂離子的PBS洗滌EOL-1細胞1-2次。
  

• 加入1 mL消化液（0.25%胰酶 + 0.53 mM EDTA），在37°C培養(yang) 箱中消化1-2分鍾，觀察細胞是否大部分變圓並脫落。
  

• 消化結束後，加入適量的完全培養(yang) 基終止消化，輕輕吹打使EOL-1細胞懸浮。
  

• 在1000 rpm下離心4分鍾，棄去上清液。根據需要，將EOL-1細胞按1:2的比例分配到新的培養(yang) 瓶中，添加適量的完全培養(yang) 基（通常為(wei) 8 mL）。
  

細胞凍存

• 棄去培養(yang) 基後，用PBS清洗EOL-1細胞。加入1 mL胰酶，待細胞變圓並脫落後，加入等體(ti) 積的含血清培養(yang) 基終止消化。
  

• 在1000 rpm下離心4分鍾，棄去上清液。
  

• 將EOL-1細胞重懸在凍存液中，通常每管約為(wei) 1 mL，並分裝到凍存管中。
  

• 將凍存管放入-80°C冰箱中緩慢冷凍24小時，然後轉移至液氮罐中保存。
  

細胞培養注意事項

• 初期生長：EOL-1細胞在複蘇後初期生長較慢，可能需要長達5天才能達到適合傳(chuan) 代的狀態。

• 簇狀細胞團：避免過度吹散EOL-1細胞團，因為(wei) 這些細胞通常以簇狀形式生長。

• 培養(yang) 基顏色：培養(yang) 基的顏色變化可以作為(wei) EOL-1細胞健康狀態的指示。EOL-1細胞在微酸性條件下生長更佳，建議使用含15%胎牛血清的培養(yang) 基以優(you) 化複蘇效果。

• 細胞汙染：定期檢查EOL-1細胞是否受到汙染，發現汙染應及時處理並報告。

EOL-1細胞在微酸性條件下的優勢

• 在微酸性環境中，EOL-1細胞表現出更高的存活率和增殖能力。這種環境促進EOL-1細胞代謝活性，提高對培養(yang) 基中營養(yang) 物質的吸收，從(cong) 而加快細胞生長。
  

• 微酸性條件有助於(yu) EOL-1細胞有效分化為(wei) 成熟的嗜酸性粒細胞，並增加特定標誌物的表達，如白血球介素3和顆粒白血球-巨噬細胞集落刺激因子受體(ti) ，增強免疫功能。
  

• 在微酸性條件下，EOL-1細胞能夠更好地合成嗜酸性粒細胞的功能相關(guan) 蛋白，如嗜伊紅性白血球陽離子蛋白，這有助於(yu) 提升細胞對過敏反應和寄生蟲感染的抵抗力。
  

• 在微酸性條件下處理EOL-1細胞複蘇能夠顯著提高複蘇後的存活率。使用含15%胎牛血清的培養(yang) 基可以更好地支持EOL-1細胞從(cong) 冷凍狀態複蘇，提升其生長狀態和活力。
  

• 使用適當配方的培養(yang) 基（如RPMI-1640 + 10% FBS），並維持微酸性環境，優(you) 化EOL-1細胞的生長條件。這種配方提供必要的營養(yang) 物質，並維持適宜的pH值，從(cong) 而支持EOL-1細胞的健康生長。