
BDCM細胞是從(cong) 一位急性髓係白血病男性患者的外周血中分離得到的B淋巴母細胞係。除了典型的B細胞標誌外,BDCM細胞還展現了樹突狀細胞的許多特征,並對Epstein-Barr病毒(EBV)呈陽性反應。BDCM被認為(wei) 是一種與(yu) 樹突狀細胞具有遺傳(chuan) 和功能相似性的新型 B 細胞係。BDCM細胞為(wei) 深入探討急性髓係白血病的生物學特性和可能的治療途徑提供了重要線索。
BDCM細胞特性特征
BDCM細胞表現出多種抗原,如CD20、CD19、CD40、CD80、CD83、CD86、HLA-DR、CD1a和CD11c。
BDCM細胞能夠分泌多種細胞因子,包括肌成束蛋白、白細胞介素1α(IL-1α)、白細胞介素2(IL-2)、白細胞介素6(IL-6)、白細胞介素16(IL-16)、轉化生長因子β1(TGF-β1)和腫瘤壞死因子(TNF)
其他標記物:BDCM細胞還表達白細胞介素3(IL-3),進一步支持其作為(wei) 免疫反應中的活躍參與(yu) 者。
BDCM細胞與(yu) 樹突狀細胞在遺傳(chuan) 和功能上具有相似性,這使得它們(men) 在研究免疫反應和腫瘤微環境中的作用時成為(wei) 重要的模型。
BDCM細胞參數表
細胞名稱 | BDCM細胞(人急性髓係細胞白血病細胞) |
細胞別稱 | B-cell with DC Morphology |
來源 | 患有急性髓係白血病的男性患者的外周血 |
細胞類型 | B淋巴母細胞係 |
形態 | 淋巴母細胞,懸浮生長 |
細胞密度 | >1×10^6 細胞數/ml |
規格 | T25瓶或1mL凍存管包裝 |
用途 | 僅供科研使用 |
表達標記 | IL-3 |
抗原表達 | CD20, CD19, CD40, CD80, CD83, CD86, HLA-DR, CD1a, CD11c |
細胞因子產生 | IL-1α, IL-2, IL-6, IL-16, TGFβ1, TNF |
培養基 | RPMI-1640 + 10% 胎牛血清 + 1% 青黴素/鏈黴素 |
培養條件 | 37℃,5% CO₂ |
接種密度 | 1×10^6 細胞/ml |
換液頻率 | 每2-3天更換培養基,或當細胞密度達到70%-80%時進行傳代 |
傳代比例 | 1:2至1:5 |
凍存液 | 含10% DMSO的胎牛血清 |
凍存密度 | 1×10^6至1×10^7個活細胞/ml |
運輸方式 | 幹冰運輸 |
解凍過程 | 在37℃水浴中快速解凍,隨後加入完全培養基 |
生長速度 | 通常在接種後24小時內觀察細胞狀態 |
細胞活率 | 應保持在90%以上 |
儲存條件 | 液氮中長期保存 |
培養教程
BDCM人急性髓係細胞白血病細胞培養教程
BDCM細胞培養步驟
將BDCM細胞按1×10^6細胞/mL的密度接種於(yu) T25培養(yang) 瓶中。
培養(yang) 瓶置於(yu) 37℃、5% CO₂的培養(yang) 箱中,確保細胞的正常生長。
每日觀察BDCM細胞的生長狀態,用倒置顯微鏡檢查其形態和密度。
當細胞密度達到70%-80%時,進行換液或傳(chuan) 代操作,以維持細胞的健康狀態。
BDCM細胞傳代
吸去培養(yang) 基後,用3-4 mL無菌PBS輕輕洗滌BDCM細胞,去除殘留培養(yang) 基。
加入1 mL胰酶,輕輕搖晃,使胰酶均勻覆蓋BDCM細胞。
將培養(yang) 瓶置於(yu) 37℃培養(yang) 箱中,觀察消化過程。當細胞開始收縮但未完全脫落時,加入2-3 mL完全培養(yang) 基終止消化。
將消化後的BDCM細胞以900 rpm離心3-5分鍾,棄去上清液。
加入新鮮的完全培養(yang) 基,輕輕重懸細胞,並將細胞均勻分配至新的培養(yang) 瓶中繼續培養(yang) 。
傳(chuan) 代後的BDCM細胞應靜置培養(yang) 於(yu) 37℃、5% CO₂培養(yang) 箱中,確保其良好生長。
BDCM細胞凍存
凍存液由90%胎牛血清(FBS)和10%二甲基亞(ya) 碸(DMSO)組成,確保細胞凍存過程中的細胞活性。
按照傳(chuan) 代步驟進行細胞消化和離心,棄去上清液後,用預冷凍存液重懸BDCM細胞。
將細胞懸液分裝至凍存管中,放入程序性凍存盒,置於(yu) -80℃冰箱中過夜。
24小時後,將凍存管轉移至液氮罐中,以實現長期保存。
BDCM細胞複蘇
將完全培養(yang) 基在37℃水浴中預熱,以確保複蘇時迅速提供適宜環境。
從(cong) 液氮中取出BDCM細胞凍存管,迅速將其放入37℃水浴中解凍。輕輕搖晃凍存管,當冰塊幾乎完全融化時,迅速終止水浴。
解凍後的BDCM細胞以150 g(約900 rpm)離心1-2分鍾,棄去凍存液。
加入預熱的完全培養(yang) 基,輕柔重懸細胞,並將其接種於(yu) T25培養(yang) 瓶中,置於(yu) 培養(yang) 箱中繼續培養(yang) 。
複蘇後的24小時內(nei) 需要密切觀察BDCM細胞的狀態,並在24小時後換液,去除潛在的死亡細胞,以確保細胞的健康生長。
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STR鑒定及相關
Amelogenin | X,Y |
CSF1PO | 10,11 |
D2S1338 | 19 |
D3S1358 | 15,16 |
D5S818 | 12,13 |
D7S820 | 9,11 |
D8S1179 | 14,15 |
D13S317 | 11 |
D16S539 | 10,11 |
D18S51 | 12,18 |
D19S433 | 13,13.1,14 |
D21S11 | 29,30 |
FGA | 21,24 |
Penta D | 9,11 |
Penta E | 10,17 |
TH01 | 6,9.3 |
TPOX | 9,10 |
vWA | 16,17 |