skm-1細胞株（人急性髓係白血病細胞株）

SKM-1細胞係於(yu) 1989年建立，來源於(yu) 一名76歲男性患者的外周血。患者被診斷為(wei) 骨髓增生異常綜合征（MDS），並發展為(wei) 急性單核細胞白血病（AMLM5）。SKM-1細胞係的特征包括遺傳(chuan) 不穩定性、DNA修複缺陷及細胞增殖和分化控製的異常，這使其成為(wei) 急性髓係白血病研究的理想模型。SKM-1細胞係為(wei) 研究急性髓係白血病及其發病機製提供了重要實驗材料，尤其是在探索耐藥機製和藥物作用方麵，如地西他濱（DAC）。

skm-1細胞株特性特征

• Bmi-1基因：在SKM-1細胞中，Bmi-1基因的mRNA和蛋白表達水平顯著高於(yu) 正常骨髓組織，這表明其在MDS的發病中可能具有重要作用。
  

• ras基因突變：最初患者存在多個(ge) ras基因的點突變，但在疾病進展過程中這些突變消失，同時伴隨有p53抗腫瘤基因的染色體(ti) 異常，這與(yu) 遺傳(chuan) 不穩定性相關(guan) 。

• 核型異常：研究發現SKM-1細胞伴有染色體(ti) 缺失（如del(9)(q13;q22)）和重排（如der(17)t(17;?)（p13;?）），這些異常與(yu) MDS及其向AML轉化的過程密切相關(guan) 。

• 藥物耐藥性：SKM-1細胞對地西他濱（DAC）的耐藥性研究表明，hENT1基因的沉默會(hui) 降低細胞對DAC誘導凋亡和去甲基化作用的敏感性，這為(wei) 理解藥物耐藥機製提供了重要線

skm-1細胞株參數表

skm-1人急性髓係白血病細胞株培養教程

SKM-1細胞複蘇

• 從(cong) 液氮罐中取出凍存的SKM-1細胞，迅速放入37°C水浴中解凍，約需1-2分鍾，直至完全融化。

• 將解凍的SKM-1細胞轉移至含10% FBS的RPMI-1640培養(yang) 基中，輕輕混勻。

• 以500×g離心3分鍾，去除上清液，加入新鮮的完全培養(yang) 基，重懸SKM-1細胞。

• 將SKM-1細胞接種於(yu) 適當的培養(yang) 瓶中，放入CO₂培養(yang) 箱中培養(yang) 。

SKM-1細胞培養

• 每2-3天更換一次培養(yang) 基，以去除代謝廢物並提供新鮮營養(yang) 。

• 定期觀察SKM-1細胞的生長狀態，待細胞密度達到80%-90%時進行傳(chuan) 代。

SKM-1細胞傳代步驟

• 收集懸浮的SKM-1細胞，轉移至無菌離心管中，500×g離心3分鍾。

• 棄去上清液，用新鮮的RPMI-1640完全培養(yang) 基重懸SKM-1細胞。

• 根據實驗需要調整接種密度，通常為(wei) 1:2至1:4，將SKM-1細胞接種至新的培養(yang) 瓶中。

• 將接種後的SKM-1細胞放入CO₂培養(yang) 箱中繼續培養(yang) 。

注意事項

• 定期檢查SKM-1細胞培養(yang) 基的顏色變化（酚紅指示），若出現變黃現象需及時更換。

• 使用顯微鏡觀察SKM-1細胞狀態，如發現異常需采取相應措施。

SKM-1細胞凍存步驟

• 在傳(chuan) 代過程中，收集健康的SKM-1細胞，離心後去除上清。

• 將SKM-1細胞加入凍存液（55% RPMI + 40% FBS + 5% DMSO），輕輕混勻。

• 將混合液分裝至凍存管中，標記清晰。

• 將凍存管放入程序降溫設備中，按照設定程序降溫至−80°C，然後轉移至液氮罐中保存。