
Kasumi-1細胞係源自一名7歲男性急性原粒細胞白血病(AML)患者的外周血。在體(ti) 外增殖試驗中,Kasumi-1細胞對IL-3、IL-6、G-CSF(粒細胞集落刺激因子)和GM-CSF(粒細胞-巨噬細胞集落刺激因子)有反應,但對IL-1和IL-5無反應。即使在培養(yang) 過程中分別加入二甲亞(ya) 碸、G-CSF或IL-5,細胞也未顯示出粒細胞或嗜酸性粒細胞的成熟跡象。相反,加入佛波酯可以誘導細胞向巨噬細胞樣細胞分化。此外,1,25S-(OH)2-16,23-二烯-26-F3-10-或D3可以抑製其增殖。
Kasumi-1細胞可用於(yu) 3D細胞培養(yang) 、免疫係統紊亂(luan) 和免疫學相關(guan) 的研究。由於(yu) AML1-ETO融合基因的存在,kasumi-1細胞係成為(wei) 研究白血病發病機製及潛在治療策略的重要工具。
Kasumi-1細胞特性特征
細胞形態:kasumi-1細胞呈原粒細胞形態,顯示出髓性成熟的特征。
生長特性:Kasumi-1細胞為(wei) 懸浮生長,適合在液體(ti) 培養(yang) 基中繁殖。
染色體(ti) 特征:Kasumi-1細胞具有8號和21號染色體(ti) 的易位,導致AML1基因與(yu) ETO(或MTG8)基因的融合,形成AML1-ETO融合基因(也稱為(wei) AML1-MTG或RUNX1-CBF2T1)。
融合蛋白:Kasumi-1細胞產(chan) 生的嵌合AML1-ETO蛋白下調CEBPA mRNA和蛋白質的表達,抑製其DNA結合活性。這一過程對粒細胞的正常分化至關(guan) 重要。
髓過氧化物酶(MPO):Kasumi-1細胞對髓過氧化物酶呈陽性反應,表明其具有髓係細胞的特征。
Kasumi-1細胞參數表
細胞名稱 | Kasumi-1細胞(人急性原粒細胞白血病細胞) |
別稱 | KASUMI-1; Kasumi1; KASUMI1; Kasumi1 |
種屬來源 | 人 |
患者信息 | 7歲,男性 |
組織來源 | 外周血 |
細胞形態 | 原粒細胞 |
生長特性 | 懸浮生長 |
細胞代數 | 10代以內 |
生物安全等級 | 1 |
支原體檢測 | 無 |
培養基 | RPMI 1640 + 20% FBS + 1% P/S |
凍存液 | RPMI 1640 + 20% FBS + 10% DMSO |
培養條件 | 37℃,5% CO₂ |
細胞密度 | 3×10^5到3×10^6細胞/ml |
傳代頻率 | 每2-3天進行傳代 |
傳代比例 | 1:3到1:5 |
培養容器 | T-25或T-75培養瓶 |
重要提示 | 收貨時可能有部分死細胞和細胞碎片,輕輕吹開聚團即可 |
染色體特征 | 8號和21號染色體易位 |
融合基因 | AML1-ETO融合基因 |
蛋白表達 | 嵌合AML1-ETO蛋白 |
髓過氧化物酶 | 陽性 |
研究應用 | 藥物篩選、免疫係統研究、3D細胞培養、分子機製研究 |
誘導特性 | 加入佛波酯可誘導巨噬細胞樣細胞 |
增殖抑製 | 沙利度胺和幹擾素對細胞增殖的抑製作用 |
IC50值 | 沙利度胺:451.13 µg/ml(24h),362.50 µg/ml(48h) |
細胞規格 | 1×10^6 cells/T25培養瓶或1 mL凍存管包裝 |
背景描述 | 具有人急性淋巴白血病細胞的典型特征 |
培養教程
Kasumi-1人急性原粒細胞白血病細胞培養教程
傳代方法
傳(chuan) 代頻率:每2-3天對Kasumi1細胞進行一次傳(chuan) 代。
傳(chuan) 代比例:推薦使用1:3到1:5的比例進行Kasumi1細胞的傳(chuan) 代。
輕輕吹打Kasumi1細胞懸液,確保Kasumi1細胞團塊充分分散。
取適量的Kasumi1細胞懸液轉移至新的培養(yang) 瓶中。
加入適量新鮮培養(yang) 基並充分混勻。
將Kasumi1細胞置於(yu) 培養(yang) 箱中繼續培養(yang) 。
凍存方法
細胞收集:在Kasumi1細胞處於(yu) 對數生長期時收集。
凍存液配置:使用10% DMSO、20% FBS與(yu) RPMI 1640培養(yang) 基混合配製Kasumi1細胞的凍存液。
以凍存液重懸Kasumi1細胞,將濃度調整至1×10^7細胞/ml。
將Kasumi1細胞懸液分裝到凍存管中,初步置於(yu) -80°C冰箱降溫24小時,然後轉移至液氮罐長期保存。
複蘇方法
快速解凍:將Kasumi1細胞凍存管從(cong) 液氮罐中取出,立即置於(yu) 37°C水浴中解凍,解凍時間控製在1分鍾以內(nei) 。
細胞收集:解凍後的Kasumi1細胞立即離心,棄去上清。
用預熱的完全培養(yang) 基重懸Kasumi1細胞。
將Kasumi1細胞懸液接種到新的培養(yang) 瓶中。
置於(yu) 培養(yang) 箱中培養(yang) ,24小時後更換培養(yang) 基以去除解凍過程中的DMSO。
注意事項
血清含量:Kasumi1細胞培養(yang) 基中FBS的含量應嚴(yan) 格保持在20%,不建議降低,以防影響Kasumi1細胞生長。
生長速度:Kasumi1細胞生長較為(wei) 緩慢,需要耐心。
操作建議:減少Kasumi1細胞懸液的吹打和振蕩,以防細胞損傷(shang) 。
環境穩定性:在Kasumi1細胞培養(yang) 過程中盡量減少對培養(yang) 瓶的移動和操作,以維持穩定的培養(yang) 環境。
相關資料
- 懸浮細胞傳代培養
- 大多數原代培養物、有限細胞係和連續細胞係都依賴於貼壁,因此會以單層形式附著在表麵生長。其他...
- THP-1細胞係在免疫學研究中的應用:CRISPR基因編輯與巨噬細胞極化機製的探究
- THP-1細胞係是一種源自急性單核細胞白血病患者的人類單核細胞係,具有在免疫學研究中廣泛應...
- THP-1細胞係的CRISPR/Cas9基因編輯技術及應用
- THP-1細胞係作為一種源自急性單核細胞白血病患者的人類單核細胞係,在免疫學和疾病研究領域...
- 查看完整內容 >
STR鑒定及相關
Amelogenin | X |
CSF1PO | 10,12 |
D1S1656 | 14,16 |
D2S441 | 11,14 |
D2S1338 | 19 |
D3S1358 | 15,17 |
D5S818 | 9,11 |
D7S820 | 8,11 |
D8S1179 | 13,14 |
D10S1248 | 13,15 |
D12S391 | 20 |
D13S317 | 11,13 |
D16S539 | 9,12 |
D18S51 | 15,16 |
D19S433 | 13,15.2 (ATCC=CRL-2724; COG; Technion Genomics Center BCF; PubMed=20922763) |
13,16 (DSMZ=ACC-220) | |
D21S11 | 30,31 |
D22S1045 | 17 |
FGA | 22,24 |
Penta D | 12 |
Penta E | 11 |
TH01 | 6,9 |
TPOX | 8,9 |
vWA | 14 (ATCC=CRL-2724; CLS=300226; Cosmic-CLP=907275; DSMZ=ACC-220; Technion Genomics Center BCF; JCRB=JCRB1003; PubMed=20922763; PubMed=25877200) |
14,18 (COG) |