kg-1細胞（人急性骨髓性白血病細胞）

KG-1細胞是由H.P. Koeffler和D.W. Golde建立的人急性骨髓性白血病細胞係，源自59歲白人男性（起初患有紅白血病，後演變為(wei) 急性粒細胞性白血病）的骨髓抽取物。

KG-1細胞在形態上表現急性髓性白血病特征，以多形性為(wei) 主，骨髓母細胞和骨髓細胞占主要部分，少量為(wei) 成熟的粒細胞和少數巨噬細胞及嗜曙紅細胞。

KG-1細胞的染色體(ti) 接近二倍體(ti) ，2S組分占1.8%。在大多數中期分裂相中，五個(ge) 標誌物（組成型標誌物）較為(wei) 常見。模態染色體(ti) 數目為(wei) 47（或46加上一個(ge) 小於(yu) G1組的中心染色體(ti) ），正常染色體(ti) 5、7、8、12和17為(wei) 單體(ti) ，其他染色體(ti) 為(wei) 二體(ti) 。在Q帶製劑中可以檢測到Y染色體(ti) 。

kg-1細胞特性

• kg-1細胞形態上類似急性髓原白血病，表現為(wei) 明顯的多形性。

• 在佛波酯存在下，kg-1細胞可以分化為(wei) 巨噬細胞，並對集落刺激因子（CSF）表現出良好的反應。
  

• kg-1細胞係適用於(yu) 癌症、免疫學和毒理學研究，同時也是轉染宿主的理想選擇。

• 抗原表達包括HLA A30、A31、B35、Cw4。
  

• 基因表達為(wei) HLA DR。

• kg-1細胞係為(wei) EBNA陰性（EBNA-）。
  

• 同工酶表達包括AK-1（0）、ES-D（1）、G6PD（B）、GLO-I（2）、Me-2（1）、PGM1（1-2）、PGM3（0）。

kg-1細胞參數表

kg-1人急性骨髓性白血病細胞培養教程

KG-1細胞複蘇

• 迅速將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中搖晃解凍。

• 將解凍後的KG-1細胞懸液加入到含有4-6mL完全培養(yang) 基的離心管中，混合均勻。

• 在1000 RPM條件下離心3-5分鍾，棄去上清液，用完全培養(yang) 基重懸KG-1細胞。

• 將KG-1細胞懸液加入到含有6-8mL完全培養(yang) 基的培養(yang) 瓶（或培養(yang) 皿）中，37℃培養(yang) 過夜。

• 第二天顯微鏡下觀察KG-1細胞生長情況和細胞密度。

KG-1細胞傳代

• 當KG-1細胞密度達到80%-90%時，即可進行傳(chuan) 代。

• 將懸浮狀態下的KG-1細胞收集到離心管中，1000 RPM離心5分鍾，棄去上清液。

• 按照2-4×10^5個(ge) /mL的密度用新鮮培養(yang) 基重懸KG-1細胞，將細胞懸液按1:2至1:4的比例分到新的T25瓶中，添加6-8mL新鮮培養(yang) 基。

• 每間隔2-3天更換培養(yang) 基或進行傳(chuan) 代。

KG-1細胞凍存

• 收集KG-1細胞並進行計數，確定凍存密度為(wei) 1×10^6至1×10^7個(ge) 活細胞/mL。

• 1000 RPM離心3-5分鍾，去除上清液，用70%IMDM+20%FBS+10%DMSO凍存液重懸KG-1細胞。

• 將KG-1細胞懸液分配到凍存管中，每管1mL，標記好名稱、代數和日期。

• 將凍存管置於(yu) 程序降溫盒中，-80℃冰箱中過夜，然後轉入液氮中儲(chu) 存。

注意事項

• KG-1細胞凍存複蘇後的24小時內(nei) 存活率可能降至50%以下，可見細胞間隙大量碎片，這是正常現象。

• 定期檢查KG-1細胞狀態，確保無支原體(ti) 汙染，細胞生長正常。