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hfob 1.19細胞(人SV40轉染成骨細胞)貨號:STM-CL-5166 規格:1×10⁶cells/T25培養(yang) 瓶或1mL凍存管

hfob 1.19細胞(人SV40轉染成骨細胞) (暫不提供)

  • 來源:成骨細胞;SV40轉化,條件永生
  • 細胞特征:貼壁細胞 , 梭形細胞
  • 培養(yang) 基:生長培養(yang) 基:DMEM/F12+0.3mg/mL G418+10% FBS+1% P/S
  • 其他:hfob 1.19細胞永生化方式為(wei) SV40大T抗原轉化
Tags: 成骨細胞    
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價(jia) 格:¥ 1,500.00
提供STR鑒定報告

hfob 1.19細胞(人SV40轉染成骨細胞)是在0.6 mg/mL G418存在下,通過用溫度敏感表達載體(ti) pUCSVtsA58和新黴素抗性表達載體(ti) pSV2-neo轉染從(cong) 自發流產(chan) 獲得的肢體(ti) 組織而建立的成骨細胞係。

hfob 1.19細胞特性

  • hfob 1.19細胞提供了同質、快速增殖的模型係統,用於(yu) 研究正常人成骨細胞分化、成骨細胞生理學等。

  • hfob 1.19細胞永生化方式為(wei) SV40大T抗原轉化。

  • hfob 1.19細胞是二倍體(ti) (43%)和四倍體(ti) (57%)。

  • 抗原表達:SV40 T抗原。

  • 基因表達:堿性磷酸酶。

  • 在允許溫度33.5°C下生長,表現出快速的細胞分裂(加倍時間36小時),在39.5°C的限製溫度下幾乎沒有細胞分裂,加倍時間為(wei) 96小時。

  • hfob 1.19細胞具有分化為(wei) 表達正常成骨細胞表型的成熟成骨細胞能力。在限製性溫度下,細胞分裂減慢,分化增加,並產(chan) 生更成熟的成骨細胞表型。

  • 引種自ATCC CRL-11372。

hfob 1.19細胞參數表

細胞名稱hFOB 1.19
細胞別稱hFOB1.19; hFOB
細胞類型人SV40轉染成骨細胞
細胞來源自然流產的胎兒四肢組織
轉染載體溫度敏感表達載體pUCSVtsA58,新黴素抗性表達載體pSV2-neo
選擇劑0.6 mg/mL G418
形態成骨細胞樣
生長特性貼壁生長
分裂時間在33.5℃下約36小時,在39.5℃下約96小時
分化特性在限製溫度下(39.5℃)分化增加,生成更成熟的成骨細胞表型
永生化方法SV40大T抗原轉化
抗原表達SV40 T抗原
基因表達堿性磷酸酶
倍體二倍體(43%),四倍體(57%)
生長特性在33.5°C下快速生長(加倍時間36小時),在39.5°C下幾乎無細胞分裂(加倍時間96小時)
培養基Alpha MEM(Minimum Essential Medium)+0% FBS(胎牛血清)+0.6 mg/mL G418
培養溫度33.5℃(許可溫度),39.5℃(限製溫度)
細胞傳代傳代比率:1:4到1:8
消化液0.25% 胰蛋白酶-EDTA溶液
凍存條件90% FBS + 10% DMSO
應用領域成骨細胞分化和生理學,激素和生長因子對成骨細胞功能及分化的影響
模型係統提供同質、快速增殖的模型係統,用於研究正常人成骨細胞
特殊說明在培養過程中需要注意溫度變化對細胞生長和分化的影響
來源機構ATCC CRL-11372

培養教程

hfob 1.19細胞培養教程

複蘇細胞步驟

  • 將含有1mL hFOB 1.19細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍。

  • 加入5mL預熱的培養(yang) 基混合均勻。

  • 在1000RPM條件下離心5分鍾,棄去上清液。

  • 補加4-6mL培養(yang) 基後輕輕吹打使細胞懸浮。

  • 將所有細胞懸液加入培養(yang) 瓶中培養(yang) 過夜(或將細胞懸液加入6cm皿中)。

  • 第二天換液並檢查細胞密度。

細胞傳代步驟

  • 當hFOB 1.19細胞密度達80%-90%時,即可進行傳(chuan) 代培養(yang) 。

  • 棄去培養(yang) 上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。

  • 加1-2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)於(yu) 培養(yang) 瓶中,置於(yu) 37℃培養(yang) 箱中消化1-2分鍾。

  • 在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓並脫落,迅速取回操作台,輕敲幾下培養(yang) 瓶後加5ml含10%血清的培養(yang) 基終止消化。

  • 輕輕吹打細胞,使細胞完全脫落後吸出,在1000RPM條件下離心8-10分鍾,棄去上清液。

  • 補加1-2mL培養(yang) 基後輕輕吹打使細胞懸浮。

  • 按5-6ml/瓶補加培養(yang) 基,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含5-6 ml培養(yang) 基的新皿中或者瓶中。

收到細胞後處理

  • 若客戶收到2ml小管hFOB 1.19細胞,用75%酒精噴灑整個(ge) 管子消毒後放到超淨台或安全櫃內(nei) ,嚴(yan) 格無菌操作。

  • 將小管細胞轉移至T25培養(yang) 瓶或6cm培養(yang) 皿,加入5ml左右培養(yang) 基混勻,放入培養(yang) 箱過夜培養(yang) 。

  • 次日查看細胞密度:

  • 若密度未超過80%,換液繼續培養(yang) ,視情況傳(chuan) 代或者凍存。

  • 若密度超過80%,可直接進行傳(chuan) 代(方法同上)。

相關資料

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STR鑒定及相關

AmelogeninX
CSF1PO10,13
D2S133823,24
D3S135817,18
D5S81811,12
D6S104313,16
D7S8208,10
D8S117910,14
D12S39120,23
D13S31711,12
D16S5399,13
D18S5110,17
D19S43313,15
D21S1129,32.2
FGA19,22
Penta E8,11
TH017,9.3
TPOX11
vWA16,18

參考文獻

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