
hfob 1.19細胞(人SV40轉染成骨細胞) (暫不提供)
- 來源:成骨細胞;SV40轉化,條件永生
- 細胞特征:貼壁細胞 , 梭形細胞
- 培養(yang) 基:生長培養(yang) 基:DMEM/F12+0.3mg/mL G418+10% FBS+1% P/S
- 其他:hfob 1.19細胞永生化方式為(wei) SV40大T抗原轉化
hfob 1.19細胞(人SV40轉染成骨細胞)是在0.6 mg/mL G418存在下,通過用溫度敏感表達載體(ti) pUCSVtsA58和新黴素抗性表達載體(ti) pSV2-neo轉染從(cong) 自發流產(chan) 獲得的肢體(ti) 組織而建立的成骨細胞係。
hfob 1.19細胞特性
hfob 1.19細胞提供了同質、快速增殖的模型係統,用於(yu) 研究正常人成骨細胞分化、成骨細胞生理學等。
hfob 1.19細胞永生化方式為(wei) SV40大T抗原轉化。
hfob 1.19細胞是二倍體(ti) (43%)和四倍體(ti) (57%)。
抗原表達:SV40 T抗原。
基因表達:堿性磷酸酶。
在允許溫度33.5°C下生長,表現出快速的細胞分裂(加倍時間36小時),在39.5°C的限製溫度下幾乎沒有細胞分裂,加倍時間為(wei) 96小時。
hfob 1.19細胞具有分化為(wei) 表達正常成骨細胞表型的成熟成骨細胞能力。在限製性溫度下,細胞分裂減慢,分化增加,並產(chan) 生更成熟的成骨細胞表型。
引種自ATCC CRL-11372。
hfob 1.19細胞參數表
細胞名稱 | hFOB 1.19 |
細胞別稱 | hFOB1.19; hFOB |
細胞類型 | 人SV40轉染成骨細胞 |
細胞來源 | 自然流產的胎兒四肢組織 |
轉染載體 | 溫度敏感表達載體pUCSVtsA58,新黴素抗性表達載體pSV2-neo |
選擇劑 | 0.6 mg/mL G418 |
形態 | 成骨細胞樣 |
生長特性 | 貼壁生長 |
分裂時間 | 在33.5℃下約36小時,在39.5℃下約96小時 |
分化特性 | 在限製溫度下(39.5℃)分化增加,生成更成熟的成骨細胞表型 |
永生化方法 | SV40大T抗原轉化 |
抗原表達 | SV40 T抗原 |
基因表達 | 堿性磷酸酶 |
倍體 | 二倍體(43%),四倍體(57%) |
生長特性 | 在33.5°C下快速生長(加倍時間36小時),在39.5°C下幾乎無細胞分裂(加倍時間96小時) |
培養基 | Alpha MEM(Minimum Essential Medium)+0% FBS(胎牛血清)+0.6 mg/mL G418 |
培養溫度 | 33.5℃(許可溫度),39.5℃(限製溫度) |
細胞傳代 | 傳代比率:1:4到1:8 |
消化液 | 0.25% 胰蛋白酶-EDTA溶液 |
凍存條件 | 90% FBS + 10% DMSO |
應用領域 | 成骨細胞分化和生理學,激素和生長因子對成骨細胞功能及分化的影響 |
模型係統 | 提供同質、快速增殖的模型係統,用於研究正常人成骨細胞 |
特殊說明 | 在培養過程中需要注意溫度變化對細胞生長和分化的影響 |
來源機構 | ATCC CRL-11372 |
培養教程
hfob 1.19細胞培養教程
複蘇細胞步驟
將含有1mL hFOB 1.19細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍。
加入5mL預熱的培養(yang) 基混合均勻。
在1000RPM條件下離心5分鍾,棄去上清液。
補加4-6mL培養(yang) 基後輕輕吹打使細胞懸浮。
將所有細胞懸液加入培養(yang) 瓶中培養(yang) 過夜(或將細胞懸液加入6cm皿中)。
第二天換液並檢查細胞密度。
細胞傳代步驟
當hFOB 1.19細胞密度達80%-90%時,即可進行傳(chuan) 代培養(yang) 。
棄去培養(yang) 上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
加1-2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)於(yu) 培養(yang) 瓶中,置於(yu) 37℃培養(yang) 箱中消化1-2分鍾。
在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓並脫落,迅速取回操作台,輕敲幾下培養(yang) 瓶後加5ml含10%血清的培養(yang) 基終止消化。
輕輕吹打細胞,使細胞完全脫落後吸出,在1000RPM條件下離心8-10分鍾,棄去上清液。
補加1-2mL培養(yang) 基後輕輕吹打使細胞懸浮。
按5-6ml/瓶補加培養(yang) 基,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含5-6 ml培養(yang) 基的新皿中或者瓶中。
收到細胞後處理
若客戶收到2ml小管hFOB 1.19細胞,用75%酒精噴灑整個(ge) 管子消毒後放到超淨台或安全櫃內(nei) ,嚴(yan) 格無菌操作。
將小管細胞轉移至T25培養(yang) 瓶或6cm培養(yang) 皿,加入5ml左右培養(yang) 基混勻,放入培養(yang) 箱過夜培養(yang) 。
次日查看細胞密度:
若密度未超過80%,換液繼續培養(yang) ,視情況傳(chuan) 代或者凍存。
若密度超過80%,可直接進行傳(chuan) 代(方法同上)。
相關資料
STR鑒定及相關
Amelogenin | X |
CSF1PO | 10,13 |
D2S1338 | 23,24 |
D3S1358 | 17,18 |
D5S818 | 11,12 |
D6S1043 | 13,16 |
D7S820 | 8,10 |
D8S1179 | 10,14 |
D12S391 | 20,23 |
D13S317 | 11,12 |
D16S539 | 9,13 |
D18S51 | 10,17 |
D19S433 | 13,15 |
D21S11 | 29,32.2 |
FGA | 19,22 |
Penta E | 8,11 |
TH01 | 7,9.3 |
TPOX | 11 |
vWA | 16,18 |