
k562細胞係 (人慢性髓係白血病細胞)
- 來源:K-562細胞係(人慢性髓原白血病細胞)是從(cong) 一名53歲的慢性粒細胞白血病患者的骨髓中分離的成淋巴細胞。
- 細胞特征:K562細胞是非粘附性的懸浮細胞,通常呈現出圓形或卵圓形,其大小和形態會(hui) 根據培養(yang) 條件的不同而有所變化
- 培養(yang) 基:生長培養(yang) 基:RPMI-1640+10% FBS+1% P/S
- 其他:K-562細胞係被廣泛用作自然殺傷(shang) 測定的高靈敏度體(ti) 外靶標。
K562細胞係源自於(yu) 一位患有慢性髓係白血病(CML)的患者的骨髓樣本。k562細胞係最初是由Peter Nowell和David Hungerford於(yu) 1960年代早期首次分離和鑒定的。科學家通過對白血病患者骨髓樣本的研究,發現了一種獨特的染色體(ti) 異常,即所謂的Philadelphia染色體(ti) 。這個(ge) 染色體(ti) 異常在CML患者中很常見,成為(wei) CML的標誌性特征之一,通過細胞培養(yang) 技術,Nowell和Hungerford成功地從(cong) 患者的骨髓中分離出了這種異常細胞,並建立了K562細胞係。
K-562細胞還具有分化的潛力,可以通過添加特定的誘導劑或改變培養(yang) 條件來誘導其向特定細胞類型分化,如紅細胞、粒細胞、巨噬細胞等。這些分化通常通過添加相應的細胞因子或化合物來實現,如5-羥基尿嘧啶、花青素、Retinoic Acid等。
K-562細胞抗原表達中CD7占25%;同工酶包括AK-1、ES-D、G6PD、GLO-I、Me-2、PGM1和PGM3等。
k562細胞係是一種三倍體(ti) 的幹細胞,其中2S組分約占總核型的4.2%。在S中期,幾乎所有細胞都會(hui) 出現15個(ge) 標記物(M1和M(15))。雖然偶爾會(hui) 出現自發性非特異性雙心室現象,但發生頻率較低,且不穩定的標記物也相對較少。X染色體(ti) 不育,而N9是無效的。
K-562細胞表現出一定的致瘤性,裸鼠皮下接種107個(ge) 細胞後,在21天內(nei) 以100%的頻率(5/5)發展成腫瘤。
K-562細胞群體(ti) 具有高度未分化和粒細胞係列的特征。通過對表麵膜性質的研究,Anderson等人得出了K-562是人類紅白血病係的結論。K-562母細胞是多能造血惡性細胞,可自發分化為(wei) 紅細胞、粒細胞和單核細胞係列的可識別祖細胞。此外,Koeffler和Golde對源自原始K-562細胞係的亞(ya) 係的誘導劑影響進行了綜述,而Dimery等人將K-562亞(ya) 係的核型研究分為(wei) 三組(A、B、C)。
EBNA測試結果顯示K-562細胞係為(wei) 陰性。
K-562細胞係參數表
名稱 | k562細胞係-人慢性髓係白血病細胞 |
別稱 | K562; K 562; GM05372; KO; GM05372E |
種屬 | 人 |
細胞形態 | 淋巴細胞樣 |
生長特性 | 懸浮細胞 |
凍存條件 | 凍存液:90%FBS+10%DMSO |
生長培養基 | RPMI-1640+10%FBS+1% P/S |
生長條件 | 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。 |
推薦換液頻率 | 2-3次/周 |
倍增時間 | ~48 hours |
致瘤性 | Yes, in nude mice (Tumors developed within 21 days at 100% frequency (5/5) in nude mice inoculated subcutaneously with 1 × 10^7 cells). |
抗原表達 | CD7 (25%) |
背景描述 | 連續細胞株K-562是由Lozzio從一位臨終的53歲女性慢性骨髓性白血病患者的胸水中建立。 |
年齡(性別) | 女性;53歲 |
組織來源 | 骨髓;慢性骨髓性白血病(CML) |
細胞類型 | 腫瘤細胞 |
腫瘤類型 | 白血病細胞 |
生物安全等級 | BSL-1 |
收藏機構 | ATCC; CCL-243 BCRC; 60007 BCRJ; 0126 CCLV; CCLV-RIE 0439 DSMZ; ACC-10 ECACC; 89121407 |
Comments | 該細胞為高度未分化的粒性白細胞係,EBNA陰性。研究表明其為紅白血病細胞係。 |
培養教程
培養基和添加劑:
使用高糖培養(yang) 基(例如DMEM)或RPMI 1640等基本培養(yang) 基。
添加10-20%的熱滅活的胎牛血清(FBS)或人血清(HS)作為(wei) 生長因子。
可選添加抗生素(例如青黴素/鏈黴素)以預防細菌汙染。
培養條件:
將K-562細胞以懸浮培養(yang) 方式進行。
培養(yang) 溫度通常為(wei) 37攝氏度。
CO2濃度一般為(wei) 5%。
定期更換培養(yang) 基,通常每2-3天更換一次。
傳代:
采用離心收集細胞,洗滌後重新懸浮。
細胞密度應根據實驗需要進行調整,通常維持在5x10^5到1x10^6細胞/ml。
k562細胞該細胞為(wei) 懸浮細胞,請注意離心收集細胞懸液;請勿直接倒掉細胞培養(yang) 液。
分化誘導:
K-562細胞具有分化潛力,可通過添加特定的誘導劑或改變培養(yang) 條件來誘導其向特定細胞類型分化。
常用的誘導劑包括5-羥基尿嘧啶、花青素和Retinoic Acid等。
細胞凍存:
使用適當的凍存液,如含10% DMSO的培養(yang) 基和20% FBS或HS。
快速凍存並存儲(chu) 於(yu) 液氮中,以確保細胞的長期保存。
檢測細胞認證和純度:
定期檢測細胞的特性,確保其保持所需的形態、生長特性和分化能力。
確認細胞的純度和認證狀態,以避免實驗結果的誤差。
常見問答
- 我如何傳代培養K-562-GFP細胞?
- 對細胞進行胰蛋白酶化並測定總的活細胞。在新鮮完全生長培養基中將細胞稀釋至所需的接種密度(1 x 105個細胞/mL),並在適當的培養皿中加入二氫嘌呤黴素(Sigma目錄號P9620)至最終濃度為0.5µg/mL。
- 對於體內應用,大多數成像係統的預期熒光水平是多少?
- 測試所有體內熒光素酶報告細胞係以實現最小1000光子/秒/細胞。大多數細胞類型可以實現相當多的熒光(>100000光子/秒/細胞)
- 在體內小鼠模型中,應該使用多少細胞進行注射?
- 研究結果表明,大約3 x 106個細胞可用於注射。實驗參數可以根據需要進行優化。
- 動物注射的植入途徑是什麽?
- 對於大多數細胞係,在兩側皮下注射用於測試和驗證。根據具體的實驗設計,也可以使用其他路線。
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STR鑒定及相關
STR點位信息
Amelogenin | X |
CSF1PO | 9,10 |
D1S1656 | 15,16 |
D2S441 | 10,14 |
D2S1338 | 17 |
D3S1358 | 14,16 (DSMZ) |
16 (CCRID; CLS; Genomics_Center_BCF_Technion; PubMed=14642717; PubMed=19372543; PubMed=25877200) | |
D5S818 | 11,12 (AddexBio; ATCC; CCRID; CLS; Cosmic-CLP; COG; DSMZ; ECACC; Genomics_Center_BCF_Technion; JCRB; KCLB; PubMed=14642717; PubMed=15637111; PubMed=19372543; PubMed=25877200; TKG) |
11,12,13 (RCB) | |
D7S820 | 9,11 |
D8S1179 | 12 |
D10S1248 | 12 |
D12S391 | 23 |
D13S317 | 8 |
D16S539 | 11,12 (AddexBio; ATCC; CCRID; CLS; Cosmic-CLP; COG; ECACC; Genomics_Center_BCF_Technion; JCRB; PubMed=14642717; PubMed=15637111; PubMed=19372543; PubMed=25877200; TKG) |
D18S51 | 15 (CLS) |
15,16 (CCRID; Genomics_Center_BCF_Technion; PubMed=14642717; PubMed=15637111; PubMed=19372543) | |
D19S433 | 14,14.2 (CCRID; CLS; Genomics_Center_BCF_Technion; PubMed=14642717; PubMed=19372543) |
14,15 (DSMZ) | |
D21S11 | 29,30 (CLS; DSMZ; PubMed=15637111) |
29,30,31 (Genomics_Center_BCF_Technion; PubMed=14642717; PubMed=19372543; PubMed=25877200) | |
D22S1045 | 16 |
DXS101 | 23,24 |
FGA | 21,24 |
Penta D | 9,13 |
Penta E | 5,14 |
SE33 | 26.2,28.2 |
TH01 | 9.3 |
TPOX | 8,9 |
vWA | 16 |
參考文獻
- 《實驗生物學報》 1993年04期
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- 中華放射醫學與防護雜誌 > 2009年1期
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- 《福建醫科大學》 2007年
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