
C8166-CD4細胞係是通過將新生兒(er) 臍帶血中的T細胞與(yu) 患有T細胞白血病患者的HTLV-1轉化細胞融合獲得的。C8166-CD4細胞係融合了原代T細胞的特性和白血病細胞的特征,具有持續增殖能力並呈現典型的淋巴母細胞樣形態學特征。其基因組中含有缺陷的HTLV-1基因組,這與(yu) T細胞白血病的發展密切相關(guan) 。
C8166-CD4細胞在HIV感染下可能會(hui) 形成合胞體(ti) 。C8166-CD4細胞係廣泛應用於(yu) 免疫學和腫瘤學的研究,特別是在T淋巴細胞增殖、凋亡機製以及藥物篩選等領域,因其來源於(yu) 白血病細胞,在白血病的臨(lin) 床相關(guan) 研究中具有重要價(jia) 值。
C8166-CD4細胞特性特征
基因組特征:C8166細胞含有HTLV-1病毒的基因組,該病毒與(yu) T細胞白血病的發生密切相關(guan) 。C8166-CD4細胞係在HIV感染下能夠形成合胞體(ti) ,進一步影響其生物學行為(wei) 。
CD4表達:C8166-CD4細胞顯著表達CD4分子,這使其在功能上更接近於(yu) 成熟的T輔助細胞。CD4作為(wei) T細胞表麵標誌物,在免疫反應中起著重要作用。
C8166-CD4細胞也可能表達其他相關(guan) 的免疫表麵標誌物,如CD25和CD69,具體(ti) 取決(jue) 於(yu) 培養(yang) 條件和刺激狀態。
C8166-CD4細胞應用於(yu) 研究T細胞白血病的機製、藥物篩選、信號通路分析以及HIV感染與(yu) 合胞體(ti) 形成等方麵。
C8166-CD4細胞來源於(yu) 人類白血病患者,因此在基礎研究和臨(lin) 床前研究中具有重要價(jia) 值。
C8166-CD4細胞參數表
細胞名稱 | C8166-CD4細胞(人T淋巴細胞白血病細胞) |
細胞名稱 | C8166-CD4 |
細胞類型 | 人T淋巴細胞白血病細胞 |
細胞來源 | 新生兒臍帶血細胞與成人T細胞白血病淋巴瘤(HTLV-1)細胞融合獲得 |
細胞形態 | 淋巴母細胞樣 |
生長特性 | 懸浮生長 |
培養基 | RPMI-1640 + 2mM Glutamine + 10% Foetal Bovine Serum (FBS) |
培養條件 | 氣相:空氣,95%;CO2,5% 溫度:37℃ |
傳代方法 | 1:2至1:6,每周2次 |
傳代密度 | 2~3x10^5 cells/ml |
凍存介質 | 90% 完全培養基 + 10% DMSO;液氮保存 |
支原體檢測 | 陰性 |
細胞活力 | ≥95% |
代數 | ≤5代 |
規格 | 1×10^6 cells/T25培養瓶 |
用途 | 僅用於科研,不得用於其他目的 |
培養教程
C8166-CD4人T淋巴細胞白血病細胞培養教程
收到C8166-CD4細胞後的處理
收到C8166-CD4細胞後,檢查包裝是否完好,是否有漏液。如有任何異常,需立即與(yu) 供應商聯係。
使用顯微鏡觀察C8166-CD4細胞的狀態,確認細胞健康並無汙染。將培養(yang) 瓶置於(yu) 37°C培養(yang) 箱中靜置2-3小時,使C8166-CD4細胞適應環境。
棄去原始培養(yang) 基,加入6mL RPMI-1640完全培養(yang) 基(含10%胎牛血清FBS和1%青黴素-鏈黴素),以確保C8166-CD4細胞能夠在最佳條件下生長。
定期檢查C8166-CD4細胞的生長狀態。當細胞密度達到80%-90%時,需進行傳(chuan) 代操作。
收到C8166-CD4細胞後的第二天,需再度檢查是否有汙染跡象。如發現汙染,立即處理。
C8166-CD4細胞複蘇步驟
將凍存的C8166-CD4細胞在37°C水浴中迅速解凍,輕輕搖晃凍存管,以確保細胞均勻混合。解凍後需立即進行後續操作,以減少細胞損失。
將解凍後的C8166-CD4細胞懸液轉移至含4mL完全培養(yang) 基的離心管中,在1000RPM條件下離心4分鍾,棄去上清液。
用1-2mL完全培養(yang) 基重懸C8166-CD4細胞,輕輕吹打,使細胞均勻分布。然後將細胞懸液轉移至新的培養(yang) 瓶中培養(yang) 過夜。
注意:為(wei) 了防止重新排列和/或刪除的粘粒擴增,我們(men) 建議在30°C的LB+amp平板上劃線培養(yang) ,並挑選小菌落進行液體(ti) 培養(yang) ,以確保後續實驗的準確性。
C8166-CD4細胞傳代培養
當C8166-CD4細胞密度達到80%-90%時,應及時進行傳(chuan) 代培養(yang) 。合適的傳(chuan) 代比例(1:2或1:3)有助於(yu) 保持C8166-CD4細胞的生長活力。
棄去培養(yang) 瓶中的培養(yang) 基,用無鈣、無鎂的PBS潤洗C8166-CD4細胞1-2次,去除殘留的血清和代謝廢物。
加入1mL胰酶-EDTA消化液(0.25%胰蛋白酶+0.53mM EDTA),置於(yu) 37°C培養(yang) 箱中消化1-2分鍾。當C8166-CD4細胞變圓並開始脫落時,立即加入完全培養(yang) 基中和消化作用。
收集C8166-CD4細胞至離心管中,在1000RPM下離心4分鍾,去除上清後用1-2mL完全培養(yang) 基重懸細胞。
將C8166-CD4細胞懸液按1:2或1:3的比例分裝至新的培養(yang) 瓶中,加入適量培養(yang) 基(8-10mL),放回培養(yang) 箱中繼續培養(yang) 。
C8166-CD4細胞凍存
當C8166-CD4細胞生長狀況良好時,可進行凍存操作。首先,棄去培養(yang) 基,用PBS洗滌細胞,並使用胰酶處理使細胞脫落。
在1000RPM下離心4分鍾,棄去上清。加入適量的培養(yang) 基重懸C8166-CD4細胞,然後加入DMSO,使終濃度為(wei) 10%。
將重懸的C8166-CD4細胞按1×10^6/mL的密度分裝至凍存管,每管凍存1mL細胞懸液,並做好標識。
將C8166-CD4細胞凍存管放入程序降溫盒,在-80°C冰箱中保存24小時後,轉移至液氮罐中長期保存。
注意事項
在C8166-CD4細胞操作過程中,需嚴(yan) 格遵循無菌操作,避免汙染。
定期觀察並記錄C8166-CD4細胞的生長狀態,以確保實驗數據的準確性。
在傳(chuan) 代培養(yang) 時,需避免過度消化,以免損傷(shang) C8166-CD4細胞。
C8166-CD4細胞凍存時,DMSO濃度應嚴(yan) 格控製,以確保細胞的存活率。
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STR鑒定及相關
Amelogenin | X,Y |
CSF1PO | 10 |
D13S317 | 10,11 |
D16S539 | 12,13 |
D18S51 | 14,17 |
D21S11 | 27,30 |
D3S1358 | 15,16 |
D5S818 | 12 |
D7S820 | 9,10 |
D8S1179 | 11,14 |
FGA | 21,22 |
PentaD | 11,15 |
PentaE | 7,11 |
TH01 | 6,9.3 |
TPOX | 11 |
vWA | 15,16 |