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Jurkat, Clone E61細胞(人T淋巴細胞白血病細胞)貨號:STM-CL-5030 規格:1×10⁶cells/T25培養(yang) 瓶或1mL凍存管

Jurkat, Clone E61細胞(人T淋巴細胞白血病細胞)

  • 來源:T淋巴細胞;急性T細胞白血病
  • 細胞特征:懸浮細胞, 淋巴細胞樣
  • 培養(yang) 基:1640+10% FBS+1% P/S
  • 其他:E61細胞係能夠在佛波酯和外源凝集素或抗T3單克隆抗體(ti) 的誘導下產(chan) 生大量IL-2
Tags: T淋巴細胞     白血病細胞    
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價(jia) 格:¥ 1,400.00
提供STR鑒定報告

Jurkat, Clone E6-1細胞是一種來源於(yu) 急性T淋巴細胞白血病的假二倍體(ti) 人類細胞係,由Schneider博士在1984年建立,源自一名14歲男性患者的外周血樣本。E61細胞為(wei) Jurkat-FHCRC細胞株的克隆衍生物,專(zhuan) 門用於(yu) 研究免疫係統疾病以及免疫學和免疫腫瘤學。

Jurkat, Clone E6-1細胞具有T淋巴細胞的特性,具有46條染色體(ti) (核型46,XY,-2,-18,del(2)(p21p23),del(18)(p11.2)),其中74%的細胞具有模式染色體(ti) 數目,5.3%的細胞為(wei) 多倍體(ti) 。E61細胞係不含支原體(ti) 汙染,且大部分細胞具有正常的X和Y染色體(ti) 。

E61細胞特性特征

  • 抗原表達:E61細胞係表達T細胞表麵抗原CD3。Jurkat細胞係表達T細胞抗原受體(ti) (TCR)。

  • 白細胞介素-2(IL-2):Jurkat, Clone E6-1細胞能夠在佛波酯和外源凝集素或抗T3單克隆抗體(ti) 的刺激下產(chan) 生大量IL-2,這使其成為(wei) 研究T細胞功能和信號傳(chuan) 導的重要模型。

E61細胞參數表

細胞名稱Jurkat, Clone E61細胞(人T淋巴細胞白血病細胞)
別稱Jurkat E6-1; Jurkat; Clone E6-1; Jurkat Clone E6-1; JURKAT E-6.1; JURKAT E-61; Jurkat-E6; Jurkat E6; J.E6-1; E6-1
來源急性T淋巴細胞白血病,來自14歲男性的外周血
細胞類型腫瘤細胞(T淋巴細胞)
細胞形態淋巴母細胞樣
生長特性懸浮生長
倍增時間24-48小時
細胞直徑10-16 μm
抗原表達CD3
基因表達白細胞介素-2(IL-2)
T細胞受體表達T細胞抗原受體(TCR)
生物安全等級1
汙染檢測無支原體、細菌、真菌汙染
推薦培養基RPMI 1640 + 10% FBS + 1% P/S
培養條件37℃,5% CO₂
換液周期每2-3天
培養基體積T25瓶10-12ml;10cm皿12-15ml
傳代比例1:2 - 1:4(視細胞生長速度及密度而定)
細胞濃度2 × 10^5 到 1 × 10^6 細胞/ml
培養環境空氣95%,二氧化碳5%
pH範圍7.2 - 7.4
凍存液配方92% FBS + 8% DMSO
細胞表麵標記CD3、CD4、CD8
細胞因子IL-2、IL-6、TNF-α
信號通路NF-κB、MAPK、PI3K/Akt信號通路
轉染效率高(適合基因功能研究)
研究用途免疫係統疾病研究,免疫學和免疫腫瘤學研究
特定應用IL-2產生實驗,細胞信號傳導研究,轉染實驗,細胞毒性研究
其他應用細胞獨立遞送機製研究,藥物篩選,幹擾素表達研究

培養教程

Jurkat, Clone E61人T淋巴細胞白血病細胞培養教程

E61細胞複蘇

  • 從(cong) 液氮中取出E61細胞的凍存管,迅速放入37℃水浴中解凍,期間輕輕搖動凍存管以加速解凍。

  • 解凍完成後,立即將E61細胞懸液轉移至含有預熱的完全培養(yang) 基(RPMI 1640 + 10% FBS + 1% P/S)的15ml離心管中,緩慢加入5ml培養(yang) 基以稀釋並去除DMSO。

  • 以1200rpm離心5分鍾,小心棄去上清。

  • 用5ml預熱的完全培養(yang) 基重懸E61細胞沉澱,然後轉移到T25培養(yang) 瓶中。

  • 加入足量完全培養(yang) 基,使總容量達到10-12ml。

  • 將E61細胞置於(yu) 37℃、5% CO₂培養(yang) 箱中培養(yang) 。

E61細胞常規傳代

  • 每2-3天進行一次傳(chuan) 代,當E61細胞密度達到1-2 × 10^6 cells/ml時,開始傳(chuan) 代操作。

  • 輕輕吹打E61細胞懸液,以確保形成單細胞懸液。

  • 將E61細胞懸液轉移至15ml離心管中,以1200rpm離心5分鍾。

  • 棄去上清,用預熱的完全培養(yang) 基重懸E61細胞沉澱。

  • 根據需要的傳(chuan) 代比例(通常為(wei) 1:2至1:4)將E61細胞懸液分配至新的培養(yang) 瓶中。

  • 加入適量的預熱完全培養(yang) 基,總體(ti) 積保持在10-12ml。

  • 繼續在37℃、5% CO₂條件下培養(yang) E61細胞。

E61細胞凍存

  • 將E61細胞懸液轉移至15ml離心管中,以1200rpm離心5分鍾。

  • 棄去上清,用凍存液(92% FBS + 8% DMSO)重懸E61細胞沉澱,使E61細胞濃度達到2-3 × 10^6 cells/ml。

  • 將重懸的E61細胞分裝至預冷的凍存管中,每管1ml。

  • 使用程序凍存機或泡沫盒在-80℃冰箱中進行程序性冷凍E61細胞。

  • 24小時後,將凍存管轉移至液氮罐中長期保存E61細胞。

注意事項

  • 傳(chuan) 代和操作過程中要避免E61細胞過度消化,並輕柔處理以減少氣泡的產(chan) 生。

  • 定期檢查E61細胞的生長狀態,確保E61細胞處於(yu) 對數生長期。

  • 定期進行支原體(ti) 、細菌、和真菌檢測,確保E61細胞培養(yang) 環境無汙染。

轉染技術優化E61細胞中IL-2表達的步驟

  • 選擇轉染試劑:可選擇使用脂質體(ti) 轉染試劑(如Lipofectamine 2000或JetPEI)或電轉法,具體(ti) 選擇取決(jue) 於(yu) 實驗需求及E61細胞的狀態。

  • 準備轉染質粒:構建含有IL-2基因的表達質粒,並確保使用適當的啟動子(如CMV啟動子)以驅動E61細胞中IL-2的表達。


  • 轉染過程

  • 按照轉染試劑的說明書(shu) ,準備轉染複合物(通常是將轉染試劑與(yu) 質粒DNA混合,靜置一段時間以形成複合物)。

  • 將轉染複合物加入重懸的E61細胞中,輕輕混勻。

  • 將混合液轉移至培養(yang) 瓶中,繼續在37℃、5% CO₂條件下培養(yang) E61細胞。


  • E61細胞中IL-2表達誘導:轉染後24-48小時,加入佛波酯和抗T3單克隆抗體(ti) ,刺激E61細胞以誘導IL-2的表達。

  • E61細胞中IL-2表達檢測:通過ELISA、流式細胞術或實時定量PCR(qPCR)等方法檢測E61細胞中IL-2的表達水平。


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