DB細胞係【彌漫大B細胞淋巴瘤細胞係（dlbcl細胞）】

DB彌漫性大B細胞淋巴瘤細胞（DLBCL細胞）是從(cong) 一名45歲白人男性患者的腹水中分離出的B淋巴母細胞，廣泛應用於(yu) 免疫學研究。彌漫性大B細胞淋巴瘤（Diffuse Large B-cell Lymphoma, DLBCL）是起源於(yu) 成熟B細胞的侵襲性腫瘤，是非霍奇金淋巴瘤中最常見的類型，占所有非霍奇金淋巴瘤的25%至50%。

DLBCL表現出快速增殖的特點，可能在淋巴結或其他器官（如脾髒、肝髒等）中形成腫瘤。隨著年齡增長，特別是在60歲以上人群中，DLBCL的發病率顯著上升。盡管這種疾病具有較強的侵襲性，但許多患者在接受適當治療後可以實現治愈。
DLBCL顯示出高度的異質性。根據2016年WHO的分類，DLBCL包含多個(ge) 亞(ya) 型，其中生發中心B細胞型（GCB）和活化B細胞型（ABC）最為(wei) 常見。

DB細胞係（dlbcl細胞）特性特征

• 抗原表達：CD19+；CD20+；CD22+；Hle-1+；CD21-；CD25-

• 不表達的抗原：HLA-DR、HLA-DQ、IgM、IgD

• T細胞抗原受體(ti) ：DB細胞不屬於(yu) T細胞。

• 基因表達：表達免疫球蛋白基因，表明其B細胞來源。

• 對愛潑斯坦-巴爾病毒（EBV）基因組呈陰性，DB細胞不受EBV感染影響。

• 暴露於(yu) 激活蛋白激酶C的佛波酯（PMA或PdBu）會(hui) 導致DB細胞嚴(yan) 重的生長抑製，表明其對某些刺激的敏感性。
  

• 通過用BM細胞周期素治療21天，DB細胞成功治愈了之前的支原體(ti) 汙染。
  

DB細胞係（dlbcl細胞）參數表

DB彌漫大B細胞淋巴瘤細胞係培養教程

DB細胞複蘇

• 從(cong) 液氮罐中取出凍存的DB細胞管，迅速放入37°C水浴中，輕輕搖晃，直至DB細胞完全融化（約1-2分鍾）。

• 將融化的DB細胞懸液轉移至15 mL離心管中，加入9 mL預冷的RPMI-1640培養(yang) 基，輕輕混勻。

• 以1000 rpm離心5分鍾，棄去上清液。

DB細胞重懸

• 將離心後的DB細胞沉澱重懸於(yu) 5 mL RPMI-1640培養(yang) 基中，並加入10% 膠牛血清和1% 青黴素-鏈黴素。

• 將重懸後的DB細胞轉移至培養(yang) 瓶中，密封後放入37°C、5% CO₂培養(yang) 箱中進行培養(yang) 。

DB細胞培養

• 每2-3天檢查DB細胞狀態，觀察細胞的形態和生長情況。

• 當DB細胞密度達到1×10^6細胞/mL時，進行傳(chuan) 代培養(yang) 。

• 傳(chuan) 代時，輕輕移除部分培養(yang) 基，並加入新鮮的RPMI-1640培養(yang) 基，以稀釋DB細胞密度。

生長抑製實驗

• 為(wei) 研究DB細胞的生長抑製反應，可將其暴露於(yu) 佛波酯（PMA或PdBu）中，觀察DB細胞的生長抑製情況。

支原體汙染處理

• 如果在培養(yang) 過程中檢測到DB細胞的支原體(ti) 汙染，可使用BM細胞周期素進行處理，通常需要21天的處理時間以徹底清除汙染。

注意事項

• 無菌操作：所有操作均需在生物安全櫃內(nei) 進行，以確保無菌環境，防止DB細胞汙染。

• 細胞密度：保持DB細胞在適宜的密度範圍內(nei) ，避免細胞過度擁擠或死亡，以維持細胞的健康狀態。

• 培養(yang) 基更換：定期更換DB細胞的培養(yang) 基以去除代謝廢物，提供新鮮的營養(yang) 支持，一般每2-3天更換一次。

• 生長監測：定期觀察DB細胞的形態，確保其保持正常形態特征，若發現異常，應立即采取措施。

培養時間和周期

• 培養(yang) 時間：DB細胞通常在37°C、5% CO₂的條件下培養(yang) ，培養(yang) 時間一般為(wei) 7-14天，具體(ti) 時間根據實驗需求和DB細胞的生長狀態而定。

• 傳(chuan) 代周期：當DB細胞密度達到1×10^6細胞/mL時，應及時進行傳(chuan) 代培養(yang) 。一般每2-3天檢查一次DB細胞狀態，並根據細胞密度決(jue) 定是否傳(chuan) 代。

• 細胞密度：在傳(chuan) 代過程中，DB細胞應保持在1×10^5至1×10^6細胞/mL的濃度範圍內(nei) ，以確保細胞的健康生長。