
TMD8細胞(人彌漫性大B淋巴瘤細胞)
- 來源:B細胞
- 細胞特征:懸浮生長 , 淋巴母細胞樣
- 培養(yang) 基:RPMI-1640+10%FBS+1%P/S
- 其他:TMD8細胞攜帶MYD88 L265P突變、TMD8細胞具備強烈的NF-κB活性
TMD8細胞係源自一位62歲日本男性患者的骨髓樣本,患者患有彌漫性大B細胞淋巴瘤(DLBCL),這是非霍奇金淋巴瘤中最常見的亞(ya) 型。TMD8細胞係的形態為(wei) 淋巴母細胞樣,表現出典型的懸浮生長特性。作為(wei) DLBCL研究的重要工具,TMD8細胞係在探索疾病機製及開發針對性治療方法方麵具有廣泛的應用潛力。
TMD8細胞特性特征
遺傳(chuan) 異質性:TMD8細胞係表現出遺傳(chuan) 異質性,包含多個(ge) 亞(ya) 克隆(至少3個(ge) 亞(ya) 克隆)。
基因表達:TMD8細胞表達Notch信號通路相關(guan) 蛋白,如HES1 mRNA,表明其在腫瘤發生中的潛在作用。
信號通路:研究顯示,γ-分泌酶對TMD8細胞生長有影響,這可能與(yu) Notch信號通路的激活有關(guan) 。
藥物敏感性測試:TMD8細胞用於(yu) 評估新藥物(如鹽酸氯丙嗪)在DLBCL中的抑癌作用。
分子機製研究:TMD8細胞用於(yu) 探討Notch信號通路及其他相關(guan) 機製在腫瘤發展中的角色。
TMD8細胞參數表
細胞名稱 | TMD8細胞(人彌漫性大B淋巴瘤細胞) |
細胞別稱 | TMD-8;Tokyo Medical and Dental University 8 |
組織來源 | B細胞 |
疾病特征 | 彌漫性大B細胞淋巴瘤(DLBCL) |
細胞形態 | 淋巴母細胞樣 |
生長特性 | 懸浮生長 |
細胞代數 | 10代以內 |
細胞規格 | 1×10^6 cells/T25 或 1 mL凍存管 |
支原體檢測 | 陰性 |
培養基 | RPMI-1640 + 10% FBS + 1% 雙抗 |
培養條件 | 溫度:37℃;氣相:95%空氣 + 5%二氧化碳 |
倍增時間 | ~30小時 |
傳代方法 | 每周2次,比例1:2至1:6 |
凍存條件 | 90% 完全培養基 + 10% DMSO,液氮儲存 |
遺傳特征 | 遺傳異質性,包含多個亞克隆(至少3個亞克隆) |
基因表達分析 | 深度外顯子組分析、RNA測序分析、SNP陣列分析、轉錄組分析 |
供應限製 | 僅限於科學研究,不可用於治療或其他臨床應用 |
培養教程
TMD8人彌漫性大B淋巴瘤細胞培養教程
TMD8細胞複蘇步驟
從(cong) 液氮中取出TMD8細胞凍存管,立即放入37℃水浴中快速解凍,時間控製在1-2分鍾內(nei) 。
解凍後,用75%乙醇消毒管表麵,將細胞轉移至含有4 mL預熱培養(yang) 基的離心管中,輕輕混勻。
以1000 rpm離心3分鍾,棄去上清液以去除冷凍保護劑。
加入1-2 mL新鮮培養(yang) 基,輕輕吹打使TMD8細胞均勻分布。
將細胞懸液轉移至培養(yang) 瓶或培養(yang) 皿,加入約8 mL培養(yang) 基,置於(yu) 培養(yang) 箱中過夜。
24小時後更換培養(yang) 基,檢查TMD8細胞狀態與(yu) 密度,並繼續培養(yang) 。
TMD8細胞傳代步驟
當TMD8細胞密度達到80%-90%時進行傳(chuan) 代。
棄去上清液,用無鈣、無鎂的PBS輕輕漂洗TMD8細胞。
添加1 mL 0.25%胰蛋白酶溶液(含0.53 mM EDTA),覆蓋所有TMD8細胞。
在37℃培養(yang) 箱中消化1分鍾,觀察細胞形態變化,當TMD8細胞變圓並脫落時,輕敲培養(yang) 瓶幾下,隨後加入培養(yang) 基終止消化。
添加6-8 mL培養(yang) 基,輕輕吹打均勻後,將TMD8細胞懸液轉移至無菌離心管中,在1000 rpm條件下離心4分鍾,棄去上清液。
用1-2 mL新鮮培養(yang) 基重懸TMD8細胞。
按1:2比例將TMD8細胞懸液分配至新的培養(yang) 皿或培養(yang) 瓶中,加入適量培養(yang) 基,繼續置於(yu) 37℃培養(yang) 箱中培養(yang) 。
TMD8細胞凍存步驟
當TMD8細胞生長狀態良好且密度適宜時,收集培養(yang) 液和細胞,轉移至無菌離心管中,1000 rpm下離心4分鍾,棄去上清液。
加入適量血清重懸TMD8細胞,進行細胞計數,確保TMD8細胞密度在5×10^6至1×10^7/mL之間。
按1:1比例將TMD8細胞懸液與(yu) 10% DMSO的無血清凍存液混合,輕輕吹勻。
將1 mL的TMD8細胞懸液加入凍存管中,做好標識後,將凍存管放入程序降溫盒中,置於(yu) -80℃冰箱中冷凍24小時。
24小時後,將凍存管轉移至液氮中進行長期儲(chu) 存。