
WSU-DLCL2細胞(人彌漫大B淋巴瘤細胞)
- 來源:胸腔積液
- 細胞特征:懸浮細胞 ,圓形和橢圓形細胞,單個(ge) 或小塊懸浮生長
- 培養(yang) 基:RPMI-1640+10% FBS+1% P/S
- 其他:WSU-DLCL2攜帶EZH2 Y641F突變, 可用的外顯子組和RNA序列數據
WSU-DLCL2細胞係來源於(yu) 1990年從(cong) 一名41歲的男性B細胞非霍奇金淋巴瘤(B-NHL)患者的胸腔積液。患者確診為(wei) 彌漫性大B細胞淋巴瘤(DLBCL),其病變由低級別濾泡性小裂細胞淋巴瘤轉化而來,最終發展為(wei) 中級別、非裂解型的彌漫大B細胞淋巴瘤。WSU-DLCL2細胞在體(ti) 外培養(yang) 條件下表現為(wei) 懸浮生長,細胞形態主要為(wei) 圓形或橢圓形,增殖能力強。
WSU-DLCL2細胞特性特征
基因突變:WSU-DLCL2細胞攜帶EZH2 Y641F突變,這一突變與(yu) 腫瘤的生物學行為(wei) 和治療反應密切相關(guan) 。
基因組和轉錄組數據:外顯子組和RNA序列數據可用,為(wei) 研究提供了豐(feng) 富的分子背景。
免疫表型:WSU-DLCL2細胞通常表現為(wei) CD20陽性,這使其成為(wei) 研究B細胞功能及淋巴瘤生物學的重要模型。
增殖能力:WSU-DLCL2在體(ti) 外培養(yang) 中表現出較高的增殖能力,並且能夠在懸浮狀態下生長。
研究用途:由於(yu) 其來源於(yu) 臨(lin) 床病例,WSU-DLCL2被廣泛用於(yu) 研究淋巴瘤的發病機製、藥物敏感性及腫瘤生物學,尤其在新藥開發和療效評估方麵具有重要價(jia) 值
WSU-DLCL2細胞參數表
細胞名稱 | WSU-DLCL2細胞(人彌漫大B淋巴瘤細胞) |
細胞別稱 | WSU-DLCL-2; WSU-DLCL(2); WSUDLCL2 |
細胞來源 | 1990年41歲男性患者的胸腔積液,診斷為彌漫大B細胞淋巴瘤(DLBCL) |
細胞類型 | B細胞非霍奇金淋巴瘤(B-NHL),非裂解型中等級別 |
突變特征 | EZH2 Y641F突變 |
細胞形態 | 圓形和橢圓形,單個或小塊懸浮生長 |
細胞規格 | ≥ 1×10^6 細胞 |
培養基 | RPMI-1640 + 10% 胎牛血清 + 1% 雙抗 |
培養條件 | 溫度:37℃;CO₂濃度:5%;濕度:70%-80% |
傳代比例 | 1:2至1:3 |
倍增時間 | 18 hours (PubMed=9607591); ~50-70 hours (DSMZ=ACC-575) |
凍存液配方 | 90% 完全培養基 + 10% DMSO |
儲存條件 | - 凍存:-80℃過夜後轉入液氮長期保存 |
運輸條件 | 冷藏運輸(冰袋) |
檢測標準 | 細菌檢測:陰性;真菌檢測:陰性;支原體檢測:陰性 |
內毒素含量 | ≤3 EU/mL |
用途 | 僅供科研使用 |
培養教程
WSU-DLCL2人彌漫大B淋巴瘤細胞培養教程
WSU-DLCL2細胞接收後的處理
在收到WSU-DLCL2細胞後,檢查運輸培養(yang) 瓶是否完好無損,有無漏液或破損現象。
使用75%酒精擦拭培養(yang) 瓶外部以消毒表麵。
將WSU-DLCL2細胞培養(yang) 瓶靜置於(yu) 37℃的培養(yang) 箱中2-4小時,以便細胞適應環境。
WSU-DLCL2細胞複蘇步驟
使用RPMI-1640作為(wei) 基礎培養(yang) 基,補充10%胎牛血清(FBS)和1%青黴素-鏈黴素混合物(P/S)以製備完全培養(yang) 基。
從(cong) 液氮中取出WSU-DLCL2細胞凍存管,迅速置於(yu) 37℃的水浴中,輕輕搖晃,確保在1分鍾內(nei) 完成解凍。
解凍後,迅速將WSU-DLCL2細胞懸液轉入含5ml預熱的完全培養(yang) 基的15ml離心管中。
在1000 rpm下離心5分鍾,棄去上清液。
使用2ml完全培養(yang) 基輕輕重懸WSU-DLCL2細胞,然後將細胞轉移至T25培養(yang) 瓶中,標記並置於(yu) 37℃、5% CO₂的培養(yang) 箱中培養(yang) 。
24小時後檢查WSU-DLCL2細胞狀態。如果WSU-DLCL2細胞無法貼壁生長或明顯死亡,則需要及時更換培養(yang) 基。通常應更換新鮮預熱的完全培養(yang) 基。
WSU-DLCL2細胞傳代步驟
當WSU-DLCL2細胞達到80%-90%的匯合度時,應進行傳(chuan) 代。
首先,移除舊培養(yang) 基,用無鈣鎂的PBS溶液衝(chong) 洗WSU-DLCL2細胞一次,以去除殘留的培養(yang) 基和血清。
加入1ml 0.25%胰蛋白酶溶液,放置於(yu) 37℃培養(yang) 箱中1-2分鍾,直到WSU-DLCL2細胞開始回縮變圓。
然後,加入等體(ti) 積的完全培養(yang) 基中和消化反應,輕拍培養(yang) 瓶使WSU-DLCL2細胞脫落。
將WSU-DLCL2細胞懸液轉移至15ml離心管,在1000 rpm下離心5分鍾,棄去上清液。
收集WSU-DLCL2細胞沉澱後,用適量完全培養(yang) 基重懸細胞,按1:3至1:5的比例進行分瓶。
將分瓶後的WSU-DLCL2細胞移入37℃、5% CO₂的培養(yang) 箱中繼續培養(yang) 。定期觀察WSU-DLCL2細胞增殖和狀態,確保其健康生長。
WSU-DLCL2細胞凍存步驟
配製凍存液:55%基礎培養(yang) 基 + 40% FBS + 5%二甲基亞(ya) 碸(DMSO)。
按照傳(chuan) 代方法進行WSU-DLCL2細胞消化,收集細胞沉澱並用凍存液重懸。取一部分WSU-DLCL2細胞用於(yu) 計數,以確保凍存細胞的濃度合適。
將重懸後的WSU-DLCL2細胞轉入凍存管,放入-80℃冰箱中進行預凍,待過夜後將WSU-DLCL2細胞移入液氮中長期保存。
相關資料
STR鑒定及相關
Amelogenin | X,Y |
CSF1PO | 11 |
D2S1338 | 22,25 |
D3S1358 | 14,16 |
D5S818 | 11,12 |
D7S820 | 10,12 |
D8S1179 | 12,13 |
D13S317 | 11,14 |
D16S539 | 10,13 |
D18S51 | 15,16 |
D19S433 | 12 |
D21S11 | 29,32.2 |
FGA | 22 |
Penta D | 10,13 |
Penta E | 14,19 |
TH01 | 8,9 |
TPOX | 8 |
vWA | 16,17 |