REH細胞係（人急性非B非T淋巴細胞白血病）

Reh細胞係源自急性淋巴細胞白血病（ALL）患者的組織，呈現淋巴母細胞的形態。REH細胞是一種前體(ti) B細胞，既不屬於(yu) B細胞也不屬於(yu) T細胞。可用於(yu) 免疫係統疾病和癌症研究。

REH細胞係特征特性

• 抗原表達：cd3a（17%）B（17%）C（20%）、CD4（15%）、CD10（55%）

• 基因表達：cd3a（17%）、B（17%）和C（20%）；CD4（15%）；CD10（55%）

• 染色體(ti) 異常：常見染色體(ti) 易位t(12;21)(p13;q22)，涉及ETV6和RUNX1基因

• 基因突變：可能存在與(yu) 白血病相關(guan) 的基因突變

REH細胞係參數表

REH人急性非B非T淋巴細胞白血病培養教程

REH細胞複蘇

• 解凍培養(yang) 基和血清，保持在4°C。
  

• 使用75%酒精對培養(yang) 瓶及工作區進行消毒。

• 從(cong) 液氮罐中取出凍存的REH細胞管，迅速放入37°C水浴中解凍，輕輕搖晃，直至完全解凍（約1-2分鍾）。
  

• 用75%酒精擦拭細胞管外部。

• 將REH細胞懸液轉移到15mL離心管中，加入10mL預溫的RPMI-1640培養(yang) 基，輕輕混勻。

• 以1000rpm離心REH細胞5分鍾，棄去上清。

• 重新懸浮細胞於(yu) 10mL新鮮RPMI-1640培養(yang) 基中，轉移至培養(yang) 瓶中。

• 將培養(yang) 瓶置於(yu) 37°C、5% CO2的培養(yang) 箱中靜置2-4小時，以幫助REH細胞恢複狀態。

• 使用顯微鏡觀察REH細胞分布和狀態，確保均勻分布且無汙染。

REH細胞培養

• 將REH細胞懸液轉移到離心管中，以1000rpm離心5分鍾。
  

• 棄去上清，加入新鮮培養(yang) 基重新懸浮REH細胞。

• 按需要的比例將細胞懸液分裝到新的培養(yang) 瓶中。

• 每2-3天更換一次培養(yang) 基，保持REH細胞密度在3-6×10^5 cells/mL。

• 傳(chuan) 代比例：1:2-1:3。

REH細胞凍存

• 將REH細胞懸液轉移到離心管中，以1000rpm離心5分鍾，棄去上清。
  

• 重新懸浮細胞於(yu) 凍存液中（約1-2×10^6 cells/mL）。

• 分裝到凍存管中，每管1mL。

• 使用程序降溫盒將凍存管置於(yu) -80°C預凍過夜。

• 次日，將凍存管轉移到液氮罐中長期保存。

注意事項

• 無菌操作：在整個(ge) REH細胞培養(yang) 過程中，嚴(yan) 格遵守無菌操作規程，以避免細胞汙染。

• 顯微鏡觀察：定期觀察REH細胞狀態，確保健康生長。

• 汙染控製：如發現培養(yang) 液渾濁或細胞狀態異常，立即處理汙染問題。

常見問題與解決方案

• 汙染控製：

• 細菌和真菌：使用無菌材料，定期檢查REH細胞培養(yang) 液的透明度和細胞形態。

• 原蟲汙染：如培養(yang) 液輕微渾濁，需立即處理。

  
  

• 細胞複蘇：

• 解凍REH細胞：快速解凍細胞，避免長時間暴露在37°C水浴中，解凍後立即轉移到預溫培養(yang) 基中。

• 細胞恢複：解凍後的REH細胞需要2-4小時在培養(yang) 箱中恢複。

  
  

• 培養(yang) 基和血清：

• 培養(yang) 基：使用RPMI-1640，添加10%胎牛血清。確保培養(yang) 基和血清質量穩定。

• 血清批次：不同批次的胎牛血清可能影響REH細胞生長，需進行預實驗以確定最佳批次。

  
  

• 傳(chuan) 代和細胞密度：

• 傳(chuan) 代比例：通常為(wei) 1:2-1:3，每2-3天傳(chuan) 代一次，保持REH細胞密度在3-6×10^5 cells/mL。

• 細胞密度：高或低的REH細胞密度都會(hui) 影響細胞生長。

  
  

• 環境條件：

• 溫度和CO2濃度：維持37°C和5% CO2，確保培養(yang) 箱穩定。

• 培養(yang) 基pH值：保持在7.2-7.4之間，避免pH值過酸或過堿。

不同培養條件下的表現

• 血清濃度：

• 標準條件：10%胎牛血清支持REH細胞的良好生長。

• 低血清條件：降低血清濃度可用於(yu) 研究REH細胞在營養(yang) 缺乏下的應激反應。

  
  

• 培養(yang) 基成分：

• 標準RPMI-1640：適合一般REH細胞培養(yang) 。

• 添加細胞因子：根據實驗需求，可以添加特定的細胞因子（如IL-2、IL-7）研究對REH細胞生長和分化的影響。

  
  

• 培養(yang) 環境：

• 低氧環境：模擬體(ti) 內(nei) 微環境研究REH細胞在低氧下的特性。

• 高氧環境：高氧環境可能會(hui) 導致氧化應激，對REH細胞生長有負麵影響。

  
  

• 傳(chuan) 代頻率：

• 頻繁傳(chuan) 代：保持REH細胞在對數生長期，但注意避免過度傳(chuan) 代導致細胞老化。

• 延長傳(chuan) 代間隔：觀察REH細胞在高密度下的生長特性，避免細胞過度擁擠導致死亡。