TF-1細胞（人血液白血病細胞）

TF-1細胞係是由Kitamura T.等人於(yu) 1987年從(cong) 一名患有嚴(yan) 重全血細胞減少症的35歲日本男性的骨髓中分離。TF-1細胞是研究骨髓祖細胞增殖和分化的有力工具。

TF-1細胞係起源於(yu) 骨髓，並表現出紅係譜係的特征，盡管TF-1細胞來自一位被診斷為(wei) 紅白血病的患者。

TF-1細胞特性特征

• 反應性：TF-1細胞對其他淋巴因子和多種細胞因子有反應，包括IL-1、IL-4、IL-6、IL-9、IL-11、IL-13、幹細胞因子（SCF）、白血病抑製因子（LIF）和神經生長因子（NGF）。
  

• 無反應：對IL-5無反應，這是一個(ge) 獨特特征。

• 不表達：TF-1細胞不表達血型糖蛋白A（GPA）和碳酸酐酶I。
  

• 組成性表達：珠蛋白基因的組成性表達表明TF-1細胞對紅係譜係的承諾。

• 分化能力：可被誘導分化為(wei) 紅細胞或巨噬細胞樣細胞。
  

• 誘導劑：血紅素和δ-氨基乙酰丙酸可誘導血紅蛋白合成，TPA可誘導向巨噬細胞樣細胞分化

• TF-1 細胞完全依賴白細胞介素3（IL-3）或粒細胞-巨噬細胞集落刺激因子（GM-CSF）進行長期生長。

TF-1細胞參數表

TF-1人血液白血病細胞培養教程

TF-1細胞複蘇操作

• 將TF-1細胞凍存管從(cong) 液氮中取出，迅速放入37°C水浴中解凍。

• 解凍後立即將TF-1細胞懸液轉移到含有預熱培養(yang) 基的離心管中。

• 低速離心（約200g，5分鍾）去除凍存液。

• 棄上清，用新鮮培養(yang) 基重懸TF-1細胞。

• 將TF-1細胞轉移到培養(yang) 瓶中，置於(yu) 培養(yang) 箱內(nei) 培養(yang) 。

TF-1細胞傳代操作

• TF-1細胞呈半貼壁半懸浮生長，傳(chuan) 代時盡量減少離心操作。

• 傳(chuan) 代時可直接補液或輕輕吹打貼壁的TF-1細胞後收集。

• 維持TF-1細胞密度在>1x10^6個(ge) /T25方瓶。

• TF-1細胞傳(chuan) 代比例通常為(wei) 1:2到1:3，每3-4天傳(chuan) 代一次。

TF-1細胞注意事項

• 確保TF-1細胞培養(yang) 基中始終含有足夠的GM-CSF，因TF-1細胞對生長因子依賴性強。

• 如果TF-1細胞狀態不佳，可適當增加血清濃度（>10% FBS）。

• 觀察TF-1細胞形態：正常生長的TF-1細胞呈圓形或貼壁鋪開。

• TF-1細胞倍增時間約為(wei) 36-72小時，根據實際生長情況調整傳(chuan) 代頻率。

• 區分TF-1細胞脫落的細胞質顆粒與(yu) 細菌汙染。

TF-1細胞凍存操作

• 使用無血清凍存液凍存TF-1細胞。

• TF-1細胞密度約為(wei) 1x10^6個(ge) /ml。

• 緩慢降溫後將TF-1細胞轉移到液氮中長期保存。

TF-1細胞質量控製

• 定期進行TF-1細胞支原體(ti) 檢測。

• 觀察TF-1細胞形態，確保無異常變化。

• 必要時進行TF-1細胞STR鑒定，以確保細胞係純度。

TF-1細胞在不同條件下的表現

TF-1細胞在添加GM-CSF和IL-3時的表現區別

• GM-CSF:

• 生長特性: 在添加GM-CSF的培養(yang) 基中，TF-1細胞能夠良好生長，呈現半貼壁半懸浮狀態。

• 形態特征: TF-1細胞呈圓形或貼壁鋪開，細胞質顆粒較多。

• 依賴性: GM-CSF是TF-1細胞生長所必需的因子，缺乏GM-CSF會(hui) 導致TF-1細胞生長速度嚴(yan) 重下降或停止。

  
  

• IL-3:

• 生長特性: 在添加IL-3的培養(yang) 基中，TF-1細胞表現出與(yu) GM-CSF相似的生長特性。

• 形態特征: TF-1細胞形態與(yu) GM-CSF培養(yang) 條件下相似，呈圓形或貼壁鋪開。

• 依賴性: IL-3也是TF-1細胞生長所必需的因子，缺乏IL-3會(hui) 導致TF-1細胞生長速度下降。

TF-1細胞在不同培養基中的形態變化

• 標準培養(yang) 基（RPMI-1640 + 10% FBS + 2 ng/ml GM-CSF或IL-3）:

• 形態: 正常生長的TF-1細胞呈圓形或貼壁鋪開，細胞脫落大量的細胞質顆粒，TF-1細胞直徑為(wei) 15-20 μm，細胞核大而粗，胞漿嗜堿性，胞漿泡多發。

• 電鏡下形態: 透射電子顯微鏡下，TF-1細胞核呈鋸齒狀；掃描電子顯微鏡下，TF-1細胞表麵呈絨毛狀，有少量泡。

  
  

• 無因子培養(yang) 基:

• 形態變化: 在不添加GM-CSF或IL-3的培養(yang) 基中，TF-1細胞生長速度顯著下降，TF-1細胞形態變差，出現較多細胞碎片和死亡TF-1細胞。

  
  

• 高血清培養(yang) 基:

• 形態變化: 在高血清（>10% FBS）的培養(yang) 基中，TF-1細胞的生長狀態可能有所改善，特別是在TF-1細胞狀態不佳時，適當增加血清濃度有助於(yu) 維持TF-1細胞活力。

TF-1細胞對FBS的依賴性

• 依賴程度:

• TF-1細胞對胎牛血清（FBS）有一定的依賴性，標準培養(yang) 基中通常添加10% FBS以維持TF-1細胞的正常生長。

• 在TF-1細胞狀態不佳時，適當增加血清濃度（如15% FBS）可以改善TF-1細胞生長狀態。