
大鼠外周血中性粒細胞(kaiyun网站安全)
- 來源:外周血
- 細胞特征:懸浮 , 圓形
- 培養(yang) 基:kaiyun网站安全專(zhuan) 用培養(yang) 基
- 其他:在非特異性免疫中發揮重要作用,是機體(ti) 抵禦微生物病原體(ti) ,特別是化膿性細菌入侵的第一道防線
原代大鼠外周血中性粒細胞是從(cong) 大鼠外周血中分離出的細胞,通過密度梯度離心法獲得,是白細胞中的一類,在免疫係統中扮演著關(guan) 鍵角色。外周血中性粒細胞具有趨化、吞噬和殺菌等重要功能,能夠遷移至感染或損傷(shang) 部位,並吞噬和消化病原體(ti) 和細胞碎片。
大鼠外周血中性粒細胞在瑞氏染色血塗片中呈現:胞質呈無色或淡紅色,含有許多細小的顆粒;細胞核呈杆狀或分葉狀。
大鼠外周血中性粒細胞特征
大鼠外周血中性粒細胞來源於(yu) 大鼠的外周血,通過密度梯度離心法從(cong) 外周血中分離得到。
中性粒細胞是白細胞中的一類,主要通過趨化、吞噬和殺菌等機製參與(yu) 免疫反應。
中性粒細胞胞質呈無色或極淺的淡紅色,含有許多細小的淺紅或淺紫色顆粒,細胞核呈杆狀或分葉狀。
中性粒細胞具有趨化作用,可以遷移至感染或損傷(shang) 部位;具有吞噬作用,能夠吞噬並消化病原體(ti) 和細胞碎片;具有殺菌作用,通過溶酶體(ti) 酶分解吞噬的病原體(ti) 和組織碎片。
大鼠外周血中性粒細胞應用在研究免疫反應、藥物篩選、疾病模型和細胞生物學等方麵。
在臨(lin) 床上,外周血是指除骨髓之外的循環血液,通過某些方法可將骨髓中的造血幹細胞釋放到血液中,再從(cong) 血液中提取分離得到造血幹細胞,稱為(wei) 外周血幹細胞。
中性粒細胞是人體(ti) 內(nei) 壽命最短的細胞,一般體(ti) 外培養(yang) 12-24h內(nei) 活性穩定,48h活性下降,96h基本死亡。
大鼠外周血中性粒細胞參數表
細胞類型 | 大鼠外周血中性粒細胞(kaiyun网站安全) |
來源 | 大鼠外周血,通過密度梯度離心法分離得到 |
細胞類型 | 白細胞中的中性粒細胞 |
染色特性 | 瑞氏染色(Wright staining),胞質無色或極淺淡紅色,含許多細小(0.2~0.4微米)的淺紅或淺紫色特有顆粒 |
細胞核形態 | 杆狀或2~5分葉狀,葉與葉之間有細絲相連 |
生長特性 | 懸浮 |
細胞形態 | 圓形 |
培養基 | kaiyun网站安全專用培養基 |
培養環境 | 95%空氣,5%二氧化碳,溫度37℃ |
換液頻率 | 每2-3天換液一次 |
傳代特性 | 不增殖,不傳代,建議在細胞活性最佳期內使用 |
消化液 | 0.25%胰蛋白酶用於細胞處理 |
細胞鑒定 | CD11b/Integrin alpha M+、CD15+、CD45+或CD18+免疫熒光染色陽性,細胞純度高於90% |
支原體檢測 | 確保細胞不含HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌 |
功能 | 趨化作用、吞噬作用和殺菌作用 |
胞漿顆粒 | 中性細顆粒,多為溶酶體,內含髓過氧化酶、溶菌酶、堿性磷酸酶和酸性水解酶等酶類 |
免疫作用 | 在機體抵禦微生物病原體(特別是化膿性細菌)過程中起重要作用,具有很強的吞噬活性,可吞噬細菌、衰老紅細胞、抗原-抗體複合物和壞死細胞 |
應用領域 | 免疫反應研究、藥物篩選、疾病模型和細胞生物學研究 |
形態學特征 | 在瑞氏染色血塗片中,胞質無色或極淺淡紅色,有許多細小的淺紅或淺紫色特有顆粒,細胞核呈杆狀或2~5分葉狀,葉與葉之間有細絲相連 |
吞噬能力 | 吞噬細菌、衰老紅細胞、抗原-抗體複合物和壞死細胞等,吞噬數十個細菌後細胞自身解體,釋放的溶酶體酶類能溶解周圍組織,形成膿液 |
生命特征 | 在非特異性免疫中扮演重要角色,抵禦微生物病原體特別是化膿性細菌入侵 |
細胞分布 | 骨髓、血液和結締組織中分布比例為28:1:25 |
白細胞比例 | 在成年人大鼠血液中,中性粒細胞占白細胞總數的55%-70% |
培養條件 | 體外培養12-24小時內活性穩定,48小時活性下降,96小時基本死亡 |
胞漿酶類 | 含有髓過氧化酶、溶菌酶、堿性磷酸酶和酸性水解酶等酶類,這些酶類與細胞的吞噬和消化功能密切相關 |
特殊功能 | 在非特異性免疫中發揮重要作用,是機體抵禦微生物病原體,特別是化膿性細菌入侵的第一道防線 |
培養教程
大鼠外周血中性粒細胞處理
收集T25細胞培養(yang) 瓶中的培養(yang) 基至50ml離心管中,並用PBS清洗細胞培養(yang) 瓶1-2次,收集清洗液。
進行離心(1200-1500rpm,3分鍾),棄去上清,收集細胞沉澱。
向細胞沉澱中加入5ml新鮮完全培養(yang) 基,用吸管輕輕吹打混勻、分散細胞。調整合適密度的細胞接種至培養(yang) 器皿中,置於(yu) 37℃、5% CO2、飽和濕度的細胞培養(yang) 箱中靜置培養(yang) 。
若遇到懸浮細胞團塊較大,無法機械吹散,可添加0.25%胰蛋白酶消化液2ml,37℃溫浴2-3分鍾後終止消化,進行細胞分散。
細胞狀態穩定後,進行培養(yang) 觀察。按照換液頻率每2-3天更換新鮮的完全培養(yang) 基。
大鼠外周血中性粒細胞傳代
當細胞達到80%匯合時,準備進行傳(chuan) 代培養(yang) 。
用PBS清洗細胞一次,添加0.25%胰蛋白酶消化液1ml至培養(yang) 瓶中,37℃溫浴1-3分鍾後終止消化。
吹打混勻後按1:2-1:3適當的比例進行細胞傳(chuan) 代接種,補充新鮮的完全培養(yang) 基至5ml,置於(yu) 37℃、5% CO2、飽和濕度的細胞培養(yang) 箱中靜置培養(yang) 。
待細胞完全貼壁後,進行培養(yang) 觀察,每隔2-3天更換新鮮的完全培養(yang) 基。
注意事項
培養(yang) 基於(yu) 4℃條件下可保存3-6個(ge) 月,保持無菌操作。
傳(chuan) 代培養(yang) 過程中,胰酶消化時間不宜過長,避免影響細胞貼壁及生長狀態。
相關資料
STR鑒定及相關
參考文獻
- 蘇州大學
- 摘要:目的:探討牛黃膽酸鈉誘導的重症急性胰腺炎(SAP)大鼠外周血中性粒細胞(PMN)蛋白質組學...
- 《第三軍醫大學學報》 2003年22期
- 摘要:目的 研究大鼠燙傷後外周血中性粒細胞和淋巴細胞的TNF αmRNA表達的動態變化 ,以了解...
- 中華實驗外科雜誌 > 2013年1期
- 摘要:目的 觀察急性壞死性胰腺炎(ANP)大鼠外周血中性粒細胞(PMN)蛋白組學的變化.方法 S...
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