貨號：STM-CL-5203 規格：1×10⁶cells/T25培養(yang) 瓶或1mL凍存管

KHM5M細胞【人甲狀腺癌細胞(未分化)】

Tags：甲狀腺癌細胞

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價(jia) 格：￥ 1,700.00

提供STR鑒定報告

KHM-5M細胞是一種來源於(yu) 日本男性患者的未分化甲狀腺癌細胞係，原發於(yu) 其右頸前區和鎖骨上區的硬腫瘤的胸腔積液轉移病灶。KHM-5M細胞表現出產(chan) 生中性粒細胞趨化因子白介素8（IL-8）的能力，用於(yu) 研究腫瘤免疫病理學和細胞因子在腫瘤微環境中作用等。

KHM-5M細胞在裸鼠體(ti) 內(nei) 移植時能引起中性粒細胞的浸潤，進一步驗證了趨化活性。實驗中使用了改良的Boyden室技術來評估細胞的趨化能力，並通過DNA克隆技術鑒定了其產(chan) 生的細胞因子，包括白介素8。

KHM5M細胞特性

細胞名稱	KHM5M細胞【人甲狀腺癌細胞(未分化)】
細胞別稱	KHM/5M; KHM5M
來源	甲狀腺未分化癌轉移，胸腔積液，65歲男性
細胞形態	成纖維細胞樣
生長特性	貼壁生長
細胞類型	腫瘤細胞
供體年齡	65歲
組織來源	甲狀腺未分化(間變性)癌轉移部位：胸腔積液
相關疾病	未分化甲狀腺癌、中性粒細胞增多症、惡性胸膜炎
生物安全等級	BSL-1
倍增時間	約27小時(JCRB)
生長條件	CA、不含MG的PBS中含有0.25%胰蛋白酶和0.02%EDTA
生物學功能	產生白介素8（IL-8），是中性粒細胞趨化因子
技術評估	使用改良的Boyden室技術評估細胞的趨化活性，通過DNA克隆鑒定細胞因子
實驗驗證	在裸鼠體內移植實驗中觀察到中性粒細胞的浸潤
細胞汙染檢測	HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌檢測均為陰性
培養基配方	RPMI-1640 + 10% FBS + 1% P/S
培養條件	氣相：空氣，95%；CO2，5%；溫度：37℃；飽和濕度
凍存條件	基礎培養基 + 10% DMSO + 20% FBS；液氮
傳代方法	1:2傳代，消化時間約2-3分鍾
傳代比例	1:3 - 1:6
推薦換液頻率	每周2-3次
培養保存機構	JCRB; JCRB0148
使用限製	僅限於科學研究，不可作為動物或人類疾病的治療產品使用。

當KHM-5M細胞密度達到80%-90%時，可以進行傳(chuan) 代培養(yang) 。
棄去培養(yang) 上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗KHM-5M細胞1-2次。
加入0.25%（w/v）胰蛋白酶和0.53 mM EDTA於(yu) 培養(yang) 瓶中（例如T25瓶1-2mL，T75瓶2-3mL），在37℃培養(yang) 箱中消化1-2分鍾。
觀察KHM-5M細胞消化情況，若大部分細胞變圓並脫落，迅速拿回操作台輕敲幾下培養(yang) 瓶後加入3-4mL含10% FBS的培養(yang) 基終止消化。
輕輕打勻後吸出，在1000 RPM條件下離心3-5分鍾，棄去上清液，補加1-2mL培養(yang) 液後吹勻。
將KHM-5M細胞懸液按1:2的比例分到新的T25瓶中，添加6-8mL新鮮配置的完全培養(yang) 基以保持細胞的生長活力。
後續傳(chuan) 代根據實際情況按1:2~1:5的比例進行。

在KHM-5M細胞培養(yang) 的前3代建議凍存一批細胞種子以備後續實驗使用。
收集消化好的KHM-5M細胞到離心管中，根據實際需求使用血球計數板計數，確定細胞的凍存密度（一般推薦為(wei) 1×10^6~1×10^7個(ge) 活細胞/mL）。
在1000 RPM條件下離心3-5分鍾，去掉上清液，用配製好的細胞凍存液重懸細胞。
將KHM-5M細胞按每1mL凍存液含1×10^6~1×10^7個(ge) 活細胞/mL分配到凍存管中，標注好名稱、代數、日期等信息。
將凍存的KHM-5M細胞置於(yu) 程序降溫盒中，過夜在-80℃冰箱冷凍，之後轉移到液氮容器中長期保存。
記錄凍存管在液氮容器中的位置以便後續查閱和使用。