
TPC-1細胞(人乳頭瘤狀甲狀腺癌細胞)
- 來源:甲狀腺
- 細胞特征:貼壁細胞 , 上皮細胞樣
- 培養(yang) 基:DMEM+10% FBS+1% P/S
- 其他:TPC-1細胞是一種分化型甲狀腺癌細胞
TPC-1細胞係起源於(yu) 一位患有甲狀腺乳頭狀癌(Papillary Thyroid Carcinoma, PTC)的日本成年女性。TPC-1細胞是一種分化型甲狀腺癌細胞,來源於(yu) 人類甲狀腺組織。TPC-1細胞是研究人類甲狀腺乳頭狀癌的重要模型。
TPC-1人乳頭瘤狀甲狀腺癌細胞參數表
細胞名稱 | TPC-1細胞(人乳頭瘤狀甲狀腺癌細胞) |
細胞別稱 | tpc1; |
中英文名稱 | 人甲狀腺乳頭狀癌細胞 ; Human papillary thyroid cancer cell |
組織來源 | 人類甲狀腺 |
形態 | 上皮細胞樣 |
生長特性 | 貼壁生長 |
規格數量 | T25瓶或1mL凍存管,>1 x 10^6 細胞/瓶或管 |
培養基 | 90% DMEM + 10% FBS 或 RPMI-1640 + 10% FBS |
培養環境 | 37°C,5% CO2 |
傳代信息 | 比例1:5至1:8,70%-80%匯合時傳代 |
換液頻率 | 每2-3天 |
凍存條件 | 液氮或-80°C,50% DMEM + 40% FBS + 10% DMSO |
無菌檢測 | 細菌、真菌、支原體均為陰性 |
細胞活性 | >90% |
關鍵基因改變 | RET/PTC1融合基因陽性 |
BRAF狀態 | BRAF V600E突變陰性 |
甲狀腺標誌物 | 表達甲狀腺球蛋白(Tg)和鈉碘共轉運體(NIS) |
生長因子受體 | 表達EGFR, VEGFR等 |
細胞黏附分子 | 表達E-鈣黏蛋白 |
增殖能力 | 高增殖性 |
侵襲能力 | 中等(相對於其他甲狀腺癌細胞係) |
成瘤性 | 在免疫缺陷小鼠中可形成腫瘤 |
主要用途 | 甲狀腺癌機製研究、藥物篩選、基因功能研究 |
運輸方式 | 幹冰運輸或常溫發貨(T25瓶活細胞) |
保存注意 | 凍存細胞立即轉入液氮或-80°C;避免長時間常溫 |
培養注意 | 可選擇添加雙抗;開封後瓶口需封口膜 |
培養教程
TPC-1人乳頭瘤狀甲狀腺癌細胞培養教程
TPC-1細胞複蘇
從(cong) -80°C冰箱中取出凍存的TPC-1細胞,並暫時放置於(yu) 幹冰上。
用鑷子夾住凍存管蓋子,迅速將其放入37°C水浴中並輕輕晃動,確保在1分鍾內(nei) 完全解凍(注意:水不能沒過管子的蓋子)。
解凍後,使用75%乙醇消毒凍存管的外表麵,並在超淨工作台中進行後續操作以保護TPC-1細胞。
將TPC-1細胞懸液轉移至15mL離心管中,加入10mL預熱的完全培養(yang) 基(可使用90% DMEM + 10% FBS 或 RPMI-1640 + 10% FBS)。
以1000rpm離心5分鍾,棄去上清液。
將TPC-1細胞沉澱輕輕重懸於(yu) 10mL新鮮預熱的完全培養(yang) 基中。
將TPC-1細胞懸液轉移至T25培養(yang) 瓶中,並置於(yu) 37°C,5% CO2的培養(yang) 箱中培養(yang) 。
TPC-1細胞傳代
傳(chuan) 代準備:當TPC-1細胞匯合度達到70%-80%時,可以進行傳(chuan) 代。
吸棄舊培養(yang) 基,加入5mL無鈣鎂的PBS,輕輕潤洗瓶底1-2次,吸棄PBS。
加入1-2mL 0.25%胰蛋白酶-EDTA溶液,37°C孵育2-5分鍾,觀察TPC-1細胞脫落情況。
輕輕敲打瓶壁,確保TPC-1細胞完全脫落。
加入5-10mL完全培養(yang) 基中和胰蛋白酶,輕輕吹打混勻TPC-1細胞懸液。
將TPC-1細胞懸液轉移至15mL離心管中,以1000rpm離心5分鍾,棄去上清液。
輕輕重懸TPC-1細胞沉澱於(yu) 適量新鮮培養(yang) 基中,按1:5至1:8的比例分裝至新的培養(yang) 瓶中。
TPC-1細胞凍存
凍存準備:配製凍存液:50% DMEM + 40% FBS + 10% DMSO。
按傳(chuan) 代步驟收集TPC-1細胞,並離心後重懸於(yu) 凍存液中。
將TPC-1細胞懸液分裝至凍存管中,每管1mL。
逐步降溫:首先將凍存管置於(yu) -80°C冰箱中過夜,隨後轉移至液氮中進行長期保存。
傳代頻率控製
傳(chuan) 代時機:當TPC-1細胞匯合度達到70%-80%時,建議進行傳(chuan) 代。
傳代比例
首次傳(chuan) 代建議使用1:3的比例。
之後的傳(chuan) 代比例可以在1:5至1:8之間調整。
如果TPC-1細胞在兩(liang) 天內(nei) 長滿,可以增加傳(chuan) 代比例;若TPC-1細胞生長三至四天仍未長滿,可適當減小傳(chuan) 代比例。
相關資料
STR鑒定及相關
Amelogenin | X |
CSF1PO | 11,12 |
D3S1358 | 16,17 |
D5S818 | 8,10 |
D7S820 | 11 |
D8S1179 | 11,17 |
D13S317 | 11,12 |
D16S539 | 9 |
D18S51 | 13,16 |
D21S11 | 30,31.2 |
FGA | 20,21 |
Penta D | 9,13 |
Penta E | 18 |
TH01 | 9 |
TPOX | 11 |
vWA | 14,18 |