Nthy-ori 3-1細胞（人甲狀腺正常細胞）

Nthy-ori 3-1 細胞係來源於(yu) 人類甲狀腺濾泡上皮細胞，是正常而非癌變的甲狀腺細胞係。科學家將含有起源缺陷的 Simian virus 40 (SV40) 基因組（SV-ori）質粒轉染至正常的人類甲狀腺濾泡上皮細胞中實現永生化。SV40 DNA 的作用不僅(jin) 能使這些細胞永生化，還能保留它們(men) 的多種功能。

Nthy-ori 3-1 細胞係有著廣泛應用，包括轉染實驗和病毒學研究，還用於(yu) 探索人類甲狀腺的生長和調控機製，並在 microRNA（miRNA）表達譜分析中發揮重要作用。

Nthy-ori 3-1細胞特征特性

分子特征

• 表達甲狀腺特異性蛋白：Nthy-ori 3-1細胞表達多種甲狀腺特異性蛋白，包括甲狀腺球蛋白（Thyroglobulin, TG）、甲狀腺過氧化物酶（Thyroid peroxidase, TPO）和鈉/碘共轉運體(ti) （Sodium/iodide symporter, NIS）。

• 激素反應性：這些細胞對甲狀腺刺激激素（TSH）具有反應性，可以模擬正常甲狀腺細胞的激素調節機製。

表達特征

• 上皮細胞標誌物：Nthy-ori 3-1細胞表達典型的上皮細胞標誌物，如細胞角蛋白（Cytokeratin）。

• 甲狀腺功能相關(guan) 基因：這些細胞表達與(yu) 甲狀腺激素合成和分泌相關(guan) 的基因，包括甲狀腺球蛋白（TG）、甲狀腺過氧化物酶（TPO）和鈉/碘共轉運體(ti) （NIS）基因。

基因特征

• 正常核型：Nthy-ori 3-1細胞保持正常的人類二倍體(ti) 核型，沒有明顯的染色體(ti) 異常。

• 無癌基因突變：這些細胞不攜帶常見的甲狀腺癌相關(guan) 基因突變，如BRAF V600E或RAS突變，這使它們(men) 成為(wei) 研究甲狀腺癌發生機製的理想對照。

其他特性

• 生長特性：Nthy-ori 3-1細胞呈貼壁生長，形態為(wei) 上皮樣。

• 穩定性：這些細胞在體(ti) 外培養(yang) 條件下保持相對穩定的表型和基因型特征。

• 可轉染性：Nthy-ori 3-1細胞可以被用來構建穩定表達外源基因的細胞係，如熒光素酶表達細胞係（Nthy-ori 3-1-Luc），這為(wei) 更複雜的實驗設計提供了可能。

• 碘代謝：這些細胞保留了正常甲狀腺細胞的碘攝取和代謝能力，可用於(yu) 研究甲狀腺激素合成過程

Nthy-ori 3-1細胞參數表

Nthy-ori 3-1人甲狀腺正常細胞培養教程

細胞複蘇

• 解凍：將凍存的 Nthy-ori 3-1 細胞在 37°C 水浴中快速解凍。

• 混合：緩慢將 Nthy-ori 3-1 細胞懸液加入預熱的培養(yang) 基中。

• 離心：以 1000 rpm 離心 5 分鍾去除凍存液，重懸 Nthy-ori 3-1 細胞。

• 接種：將 Nthy-ori 3-1 細胞接種到培養(yang) 瓶中，確保均勻分布。

常規培養

• 接種密度：2-4 × 10⁴ Nthy-ori 3-1 細胞/cm²。

• 細胞形態觀察：觀察 Nthy-ori 3-1 細胞形態，細胞應呈圓形、橢圓形或不規則形狀。

• 培養(yang) 基更換：每 2-3 天更換 Nthy-ori 3-1 細胞的培養(yang) 基，去除代謝廢物。

傳代

• 傳(chuan) 代時機：當 Nthy-ori 3-1 細胞達到 80% 匯合度時進行傳(chuan) 代。

• 洗滌：用無鈣鎂的 PBS 緩衝(chong) 液輕輕清洗 Nthy-ori 3-1 細胞。

• 消化：加入適量胰酶，在 37°C 消化 1-2 分鍾，輕輕拍打培養(yang) 瓶，觀察 Nthy-ori 3-1 細胞脫落情況。

• 終止消化：加入含血清的培養(yang) 基以終止消化。

• 收集：離心收集 Nthy-ori 3-1 細胞，按 1:2 或 1:3 的比例重新接種。

細胞凍存

• 凍存液：使用 90% 培養(yang) 基 + 10% DMSO 作為(wei) Nthy-ori 3-1 細胞的凍存液。

• 細胞密度：凍存時 Nthy-ori 3-1 細胞密度約為(wei) 1 × 10⁶ cells/mL。

• 降溫：緩慢降溫，最終將 Nthy-ori 3-1 細胞保存在液氮中。

注意事項

• 無菌操作：確保所有操作在無菌條件下進行，以避免 Nthy-ori 3-1 細胞汙染。

• 觀察細胞：定期觀察 Nthy-ori 3-1 細胞形態和生長狀況，確保其處於(yu) 最佳狀態。

• 消化時長：避免過度消化，以免損傷(shang) Nthy-ori 3-1 細胞。

• 穩定環境：保持 Nthy-ori 3-1 細胞培養(yang) 條件的穩定性。

質量控製

• 純度檢測：定期進行短串聯重複序列（STR）鑒定，確保 Nthy-ori 3-1 細胞係的純度和真實性。

• 汙染檢測：檢測可能的微生物汙染，確保 Nthy-ori 3-1 細胞培養(yang) 的可靠性。

Nthy-ori 3-1 細胞純度的重要性

• Nthy-ori 3-1 細胞的純度對培養(yang) 效果和實驗結果的可靠性至關(guan) 重要。高純度的 Nthy-ori 3-1 細胞能夠更準確地反映人甲狀腺正常細胞的特性和功能，通常規格為(wei) 1 × 10⁶ cells/T25 培養(yang) 瓶。

• 高純度的益處：高純度 Nthy-ori 3-1 細胞有助於(yu) 保持細胞的正常形態和功能，如甲狀腺特異性蛋白的表達和激素反應性。

• 低純度的風險：可能導致其他細胞類型的混入，影響 Nthy-ori 3-1 細胞的生長速度和特性表達。

• 純度對培養(yang) 參數的影響：可能需要根據 Nthy-ori 3-1 細胞的純度調整傳(chuan) 代比例和生長條件。