掌握HepG2細胞培養(yang) 技巧:常見問題一覽

摘要:HepG2細胞是一種來源於(yu) 人肝癌的細胞係,在肝癌研究、藥物篩選等領域有著重要的應用價(jia) 值。
問:HepG2細胞為(wei) 什麽(me) 會(hui) 呈現疊加生長的現象?
答:HepG2細胞生長特性是緊密連接成片狀從(cong) 四周延展增殖,形成一座座的小島狀,因此在增殖過程中可能會(hui) 出現輕微的細胞堆積,這是正常現象。在消化過程中,需要耐心等待細胞自然脫落,切勿拍打培養(yang) 瓶或過度吹打細胞,以免損傷(shang) 細胞。
問:HepG2細胞培養(yang) 過程中貼壁速度慢、漂浮細胞多怎麽(me) 辦?
答:HepG2細胞傳(chuan) 代後會(hui) 有許多簇狀仍處於(yu) 懸浮狀態,這是正常現象。建議在傳(chuan) 代後的2-3天內(nei) 減少對細胞的觀察和移動。凍存後複蘇的細胞通常會(hui) 出現大量漂浮細胞,這也是正常現象。如果漂浮細胞仍然存在且較多,且具有良好的細胞活性,可以在3天後重新收集並接種到新的培養(yang) 瓶中。此外,若需要加快細胞貼壁速度,可以考慮將血清濃度提高至15%。
問:HepG2細胞培養(yang) 中出現的空泡現象是什麽(me) 情況?
答:HepG2細胞中出現的空泡是正常現象,不會(hui) 影響細胞的生長,無需過分擔心。
問:為(wei) 什麽(me) HepG2細胞生長速度慢?
答:在適宜的培養(yang) 條件下,HepG2細胞在T25培養(yang) 瓶中以1:2傳(chuan) 代後,通常需要2-3天才能達到80%的匯合率。如果細胞生長過慢或不生長,可以考慮將血清濃度增加至15%-20%,待細胞恢複正常生長後再將血清比例降至10%。此外,細胞接種密度不可過低,否則也會(hui) 導致生長速度緩慢。
問:如何解決(jue) HepG2細胞聚團或不貼壁的問題?
答:HepG2細胞貼壁性受到血清品牌和培養(yang) 基pH的影響。為(wei) 了更好地促進細胞貼壁,建議使用高質量、低內(nei) 毒素、未滅活的胎牛血清。另外,及時觀察培養(yang) 器皿中培養(yang) 基的顏色,偏黃時及時換液,偏紫時檢查CO2供應是否正常,培養(yang) 瓶是否透氣,並及時換液。
問:複蘇後HepG2細胞漂浮細胞較多怎麽(me) 處理?
答:排除血清和pH對細胞貼壁的影響後,若複蘇後有大量漂浮細胞,可使用台盼藍檢查細胞活性。若大部分是活細胞,可以將這些細胞離心收集後重新接種至原瓶。此外,增加血清量(總比例不超過20%)可以促進細胞貼壁。
問:HepG2細胞中出現圓形細胞粘附在貼壁的單層細胞上,如何處理?
答:這是HepG2培養(yang) 過程中常見的現象,這些細胞可能是尚未完全貼壁或正處於(yu) 分裂期,無需特殊處理。
您感興趣的內容
- 細胞培養容器介紹
- 細胞培養容器培養容器提供了一道汙染屏障,保護培養物免受外部環境的影響,同時保持適當的內部環...
- 收到細胞培養物後的處理方法
- 一些細胞以培養容器的形式運輸。這些容器中接種細胞,進行培養以確保細胞生長,然後用培養基完全...
- 無血清細胞培養基與天然細胞培養基的優缺點比較
- 無血清細胞培養基與天然細胞培養基在細胞培養中有著明顯的差異,它們的優缺點如下:
- Hep G2細胞培養常見問題
- 在90%融合的T-75燒瓶中有多少Hep G2細胞?融合燒瓶中的細胞數量各不相同,因為細胞...
- 永生化支氣管上皮細胞
- 由於正常和患病原代支氣管上皮細胞對數量有限、供體之間存在顯著差異以及其有限的增殖能力,正常...
- 細胞培養基品種大全
- 細胞培養基是鹽、碳水化合物、維生素、氨基酸、代謝前體、生長因子、激素和微量元素的複雜混合物...
- 細胞房汙染和生物安全
- 培養細胞的汙染可能來自許多來源,包括其他細胞係、試劑、移液管和培養容器等耗材、組織培養罩和...
- Barrett永生化食管上皮細胞
- 原代Barrett食管上皮細胞在培養中的壽命有限,並且通常不含有可導致Barrett食管癌...
- 查看完整內容 >
上一篇:沒有了