HUVSMC細胞（原代人臍靜脈平滑肌細胞）

人臍靜脈平滑肌細胞（HUVSMC）來源於(yu) 人類臍帶中的臍靜脈，是一種重要的血管平滑肌細胞類型。HUVSMC細胞是研究心血管疾病、血管生物學及相關(guan) 藥理學研究等的模型細胞。

HUVSMC細胞來源與分離

• HUVSMC從(cong) 足月分娩的新生兒(er) 的臍帶中分離而來。臍帶是連接胎兒(er) 與(yu) 胎盤的管狀結構，其中臍靜脈負責將氧氣和營養(yang) 物質從(cong) 胎盤輸送至胎兒(er) 。

• 組織采集：在分娩後，從(cong) 新生兒(er) 臍帶中提取臍靜脈組織。整個(ge) 采集過程在無菌環境下進行，以確保所獲得細胞的純淨性和活性。

• 細胞分離：采用膠原酶和胰酶等酶類進行消化處理，以分離臍靜脈中的平滑肌細胞。通過酶解可以去除周圍的細胞和基質，獲得較高純度的HUVSMC。

• 細胞培養(yang) ：分離後的HUVSMC被接種於(yu) 特定的培養(yang) 基中進行體(ti) 外培養(yang) ，通常在37°C的恒溫培養(yang) 箱中，維持5% CO2的環境下進行培養(yang) 。HUVSMC在培養(yang) 基中展現出貼壁生長特性。

HUVSMC細胞特性特征

• HUVSMC細胞在體(ti) 外培養(yang) 中呈長梭形或不規則形態。在低密度培養(yang) 時，細胞常交織成網狀結構，而在高密度條件下，細胞則排列成旋渦狀或柵欄狀。
  

• HUVSMC細胞具有豐(feng) 富的胞漿和分枝狀突起，能夠形成單層或多層重疊的生長模式。

• HUVSMC細胞屬於(yu) kaiyun网站安全，傳(chuan) 代次數一般不超過10代，增殖能力可達到10倍增。

• HUVSMC細胞表達平滑肌特異性蛋白，如α-平滑肌肌動蛋白（α-SMA）。免疫組化染色顯示98%的細胞對肌動蛋白呈陽性反應，證實其平滑肌細胞的身份。

• 基因表達：HUVSMC細胞中與(yu) 平滑肌功能相關(guan) 的基因（如平滑肌特異性基因）會(hui) 被激活，參與(yu) 調控細胞的收縮、增殖和遷移等功能
  

HUVSMC細胞參數表

HUVSMC原代人臍靜脈平滑肌細胞培養教程

HUVSMC細胞複蘇

• 預熱水浴鍋至37℃。
  

• 準備一個(ge) 已包被的T25培養(yang) 瓶，加入7 mL預熱的完全培養(yang) 基。

• 將凍存管的管身浸入水浴鍋中（確保管蓋部分暴露在外），輕輕搖晃使HUVSMC細胞液體(ti) 完全融化，通常在1-2分鍾內(nei) 完成。

• 將融化後的HUVSMC細胞懸液轉移到培養(yang) 瓶中，輕輕混勻。

• 將培養(yang) 瓶放入37℃、5% CO2的培養(yang) 箱中培養(yang) 24小時，讓HUVSMC細胞適應新環境。

HUVSMC細胞傳代

• HUVSMC細胞在達到約80%匯合度時進行傳(chuan) 代。避免細胞過度匯合，以防影響細胞狀態和實驗結果。
  

• 傳(chuan) 代比例：通常為(wei) 1:2至1:3。

• 觀察HUVSMC細胞生長情況，確保細胞達到80%匯合度。
  

• 去除舊的培養(yang) 基，使用0.25%胰蛋白酶消化細胞。輕輕搖晃培養(yang) 瓶以幫助HUVSMC細胞脫落。

• 添加適量的培養(yang) 基以中和胰蛋白酶，輕輕吹打使細胞均勻懸浮。

• 將HUVSMC細胞懸液轉移至離心管中，以1000 rpm離心10分鍾，去除上清液。

• 加入適量的新培養(yang) 基重懸HUVSMC細胞，然後將細胞懸液轉移至新的培養(yang) 瓶中繼續培養(yang) 。

HUVSMC細胞凍存

• 在HUVSMC細胞凍存前一天更換培養(yang) 基，以確保細胞處於(yu) 對數生長期，狀態最佳。

• 準備HUVSMC細胞懸液，濃度應為(wei) 3×10^6至1×10^7細胞/mL。

• 將細胞懸液與(yu) 凍存液按1:1的比例混合，輕輕吹打均勻。

• 將混合液分裝至凍存管中，並標記細胞名稱和凍存日期。

• 將凍存管放入-80℃的冰箱中冷凍過夜，然後轉入液氮罐中長期保存。

注意事項

• 操作HUVSMC細胞時應在無菌條件下進行，以防止細胞汙染。

• 使用多聚賴氨酸包被的培養(yang) 器皿可以提高HUVSMC細胞的貼壁率和存活率。

• HUVSMC細胞為(wei) kaiyun网站安全，其傳(chuan) 代次數有限，應合理安排實驗，以避免細胞老化對實驗結果的影響。