MPAF細胞（原代小鼠肺動脈成纖維細胞）

原代小鼠肺成纖維細胞（Primary Mouse Lung Fibroblasts）是從(cong) 健康小鼠肺組織中分離獲得的高度活躍細胞類型，廣泛應用於(yu) 肺部疾病和纖維化研究。小鼠肺成纖維細胞來源於(yu) 小鼠胚胎期的間充質細胞，形態上呈紡錘形或星形，細胞核卵圓形，核仁清晰，貼壁後具有良好的增殖能力。小鼠肺成纖維細胞是研究肺動脈高壓、慢性阻塞性肺病和肺纖維化等疾病的重要工具，這些細胞在分子機製研究和藥物開發中具有重要價(jia) 值。

MPAF小鼠肺動脈成纖維細胞特性特征

• 組織修複：MPAF成纖維細胞在組織損傷(shang) 後能夠迅速聚集並參與(yu) 修複過程。
  

• 合成與(yu) 分泌：具備合成和釋放細胞外基質（ECM）的能力，對維持肺動脈的正常結構和功能至關(guan) 重要。

  標誌物表達

• α-SMA（平滑肌α-肌動蛋白）：作為(wei) 成纖維細胞的標誌性蛋白，其表達水平可以通過免疫熒光染色法進行檢測。

• 膠原蛋白：主要合成Ⅰ型膠原蛋白，是構成細胞外基質的重要成分。

• Vimentin：中間纖維蛋白，常用於(yu) 鑒定成纖維細胞。

  
  

• CXCL12：在某些刺激條件下（如IL-17A的作用），CXCL12的表達可能增加，這與(yu) 細胞的遷移和活化相關(guan) 。

• 小鼠肺動脈成纖維細胞的基因表達譜顯示出與(yu) 成纖維化相關(guan) 的多種基因上調，包括與(yu) ECM 生成、細胞增殖和遷移相關(guan) 的基因。

• 轉錄因子：小鼠肺成纖維細胞可能受到多種轉錄因子的調控，如TGF-β信號通路中的SMAD家族成員，這些轉錄因子在纖維化過程中發揮關(guan) 鍵作用

MPAF小鼠肺動脈成纖維細胞參數表

MPAF原代小鼠肺動脈成纖維細胞培養教程

細胞培養

• 培養(yang) 基：每2-3天更換一次，保持培養(yang) 基清澈並提供充分營養(yang) 。
  

• 貼壁後的小鼠肺動脈成纖維mpaf細胞狀態：呈紡錘形或星形，增殖活躍。
  

• 定期顯微鏡觀察，避免汙染或過度融合（細胞融合度不宜超過90%）。

細胞傳代

• mpaf小鼠肺動脈成纖維細胞融合度達到80%-90%時進行傳(chuan) 代。
  

• 向培養(yang) 瓶中加入適量0.25%胰蛋白酶，覆蓋細胞後在37℃孵育2-5分鍾。
  

• 待細胞變圓、脫落後，加入完全培養(yang) 基中和酶溶液。

• 以300g離心5分鍾，棄去上清後用新鮮培養(yang) 基重懸細胞。

• 按1:2或1:3的比例將細胞接種至新的培養(yang) 瓶中，維持小鼠肺動脈成纖維細胞的活性。

細胞凍存

• 將小鼠肺動脈成纖維mpaf細胞懸液分裝入凍存管中，每管500 μL至1 mL。
  

• 凍存管放置於(yu) 程序性降溫盒中，-80℃凍存過夜。

• 第二天轉移至液氮中長期保存，保證小鼠肺動脈成纖維細胞的狀態。

細胞複蘇

• 取凍存管迅速置於(yu) 37℃水浴中解凍（1-2分鍾），確保冰晶完全融化。
  

• 將細胞懸液轉移至預熱的完全培養(yang) 基中，離心300g，5分鍾，棄去上清以去除DMSO。

• 用新鮮培養(yang) 基重懸細胞，接種至培養(yang) 瓶中，放入培養(yang) 箱繼續培養(yang) 。

• 解凍後的細胞應盡快更換培養(yang) 基以去除殘留DMSO。
  

• 初次貼壁可能較慢，應耐心觀察小鼠肺動脈成纖維細胞的狀態。