
A7r5 大鼠胸大動脈平滑肌細胞
- 來源:A7r5細胞的組織來源是大鼠的胸大動脈平滑肌組織。
- 細胞特征:A7r5細胞呈現出成纖維細胞樣的形態特征,其生長特性為(wei) 貼壁生長,即在培養(yang) 基表麵附著生長。
- 培養(yang) 基:生長培養(yang) 基:DMEM+10% FBS+1% P/S
- 其他:基因表達:肌激酶;肌酸激酶(肌肉同工酶);肌球蛋白
A7r5大鼠胸大動脈平滑肌細胞是從(cong) 胚胎大鼠主動脈胸平滑肌中分離的成纖維細胞樣細胞,由W Carlisle 保藏,應用於(yu) 心血管疾病研究。
在A7r5細胞培養(yang) 到穩定期後,表現出增強的肌激酶和肌氨酸磷酸激酶活性。當A7r5細胞停止分裂後,會(hui) 合成骨肉型肌激酶和肌氨酸磷酸激酶活性(CPK)的特性。
A7r5細胞係是研究心血管疾病發展和治療的有效工具。
基因表達:肌激酶;肌酸激酶(肌肉同工酶);肌球蛋白
A7r5細胞係參數表
名稱 | A7r5(大鼠胸大動脈平滑肌細胞) |
別稱 | A7R5 |
種屬 | 大鼠(Rattus norvegicus) |
細胞形態 | 成纖維細胞樣 |
生長特性 | 貼壁細胞 |
凍存條件 | 凍存液:55% 基礎培養基 + 40% FBS + 5% DMSO |
凍存溫度 | 液氮 |
生長培養基 | DMEM + 10% FBS + 1% P/S |
培養條件 | 氣相:空氣,95%;CO2,5%;溫度:37℃ |
年齡(性別) | 胚胎 |
組織來源 | 胸大動脈平滑肌 |
細胞類型 | 自發永生化細胞 |
生物安全等級 | BSL-1 |
基因表達情況 | myokinase; creatine phosphokinase (muscle isoenzyme); myosin |
傳代方法 | 1:2至1:6,每周2次 |
保藏機構 | ATCC; CRL-1444 ECACC; 86050803 |
細胞汙染 | HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌檢測陰性 |
培養教程
培養(yang) 容器準備:
建議平躺著培養(yang) 該細胞,以增大空氣交換麵積,液體(ti) 高度最好不要超過3mm。
對於(yu) T25培養(yang) 瓶,加6-8ml培養(yang) 基;對於(yu) T75培養(yang) 瓶,加15ml左右培養(yang) 基。
培養(yang) 基配製:
培養(yang) 基盡量現配,配好的培養(yang) 基最好兩(liang) 周內(nei) 用完,因為(wei) 葉酸不穩定易分解。
換液頻率:
一般情況下,細胞2-3天換液一次,即使培養(yang) 基沒有變黃。換液時輕輕側(ce) 過培養(yang) 瓶/皿,不要使細胞飄起來。
平常換液建議半換,傳(chuan) 代可直接補加足夠新鮮的培養(yang) 基後直接分瓶。
細胞狀態監測:
細胞團長至肉眼可見,且T25瓶子有幾十上百個(ge) 小團時,細胞數量已經比較多,此時應該2天換液一次。
當一個(ge) 20倍視野有4-5個(ge) 大細胞團時應該進行傳(chuan) 代。
傳(chuan) 代方法:
傳(chuan) 代時加入兩(liang) 倍體(ti) 積的新鮮培養(yang) 基後,輕輕吹打細胞團,將大的細胞團打散成小團,但不要劇烈吹打成單細胞懸液。
或者將細胞懸液轉移至離心管中,1000rpm離心5min後,棄去上清,加入三倍體(ti) 積的新鮮培養(yang) 基輕輕重懸後轉移至三個(ge) 新的培養(yang) 瓶中。
凍存液準備:
凍存液用50%血清 + 40%完全培養(yang) 基 + 10%DMSO。細胞數量應在0.5-1.0×10^6/ml為(wei) 宜。
複蘇時可適當加大胎牛血清的含量,以使細胞盡快長起來。複蘇後細胞需要重新聚團及較長的潛伏期,故複蘇時間較長,期間應多加觀察,並注意更換培養(yang) 基,頻率為(wei) 3天一換(半換)。
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參考文獻
- 《山東師範大學》 2017年
- 摘要:...中膜向內膜遷移過程中的作用,本實驗以血管平滑肌細胞A7r5細胞作為實驗研究對象,利用...
- 《廣東藥科大學》 2021年
- 摘要:...管緊張素Ⅱ(AngiotensinⅡ,AngⅡ)誘導的大鼠血管平滑肌細胞(A7r5細...
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