EL-4-B5細胞（小鼠胸腺淋巴瘤細胞）

EL-4-B5小鼠胸腺淋巴瘤細胞是EL4小鼠胸腺瘤的亞(ya) 克隆，EL4B5細胞係是一種溴脫氧尿苷的抗性突變體(ti) ，可作為(wei) B細胞的飼養(yang) 層，用於(yu) 人單克隆抗體(ti) 的產(chan) 生。

EL-4-B5細胞是通過甲烷磺酸乙酯處理產(chan) 生IL-2的EL-4小鼠胸腺瘤細胞後，突變篩選獲得。突變後發現了一種胸苷激酶缺陷且對瓦巴因有抗性的克隆EL-4 BurOUr 6.1，這些細胞能通過細胞接觸激活小鼠和人類的B細胞，經過亞(ya) 克隆獲得了EL-4-B5細胞係，它能夠有效地激活B細胞，促進其增殖、分化並誘導抗體(ti) 分泌。

EL-4-B5細胞特性特征

• 增殖能力：EL4B5細胞具有較高的增殖率，可以承受較大比例的傳(chuan) 代（如1:10）

• 突變特性：溴脫氧尿嘧啶（bromo-deoxyuridine）抗性突變體(ti) 、胸苷激酶缺陷（thymidine kinase-deficient）、烏(wu) 阿巴因抗性（ouabaine-resistant）

• 飼養(yang) 層功能:EL4B5細胞 可作為(wei) 飼養(yang) 層細胞（feeder cell）用於(yu) B細胞培養(yang)
  

• EL4B5細胞可用於(yu) 產(chan) 生人源單克隆抗體(ti)

• 基因特征：IL-2產(chan) 生: 原始EL-4細胞係能產(chan) 生IL-2，但EL-4-B5的IL-2產(chan) 生能力需進一步確認

• 基因突變: 經過乙基甲烷磺酸酯（ethyl-methane-sulfonate）誘導突變

• EL4B5細胞具備半貼壁半懸浮生長的特點，其中懸浮狀態的細胞表現出更健康的生長
  

• EL-4-B5細胞係提供了一種從(cong) 用熒光VLP選擇的單個(ge) 抗原特異性B細胞克隆產(chan) 生重組人mAb的方法，並且可以用於(yu) 產(chan) 生許多其他病毒的人mAb，這些病毒的蛋白質可以自組裝成VLP。
  

EL-4-B5細胞參數表

EL4B5小鼠胸腺淋巴瘤細胞培養教程

細胞複蘇

• 在37°C水浴中快速解凍凍存的EL4B5細胞凍存管。

• 將EL4B5細胞懸液轉移到含4-6mL完全培養(yang) 基的離心管中。

• 1000RPM離心3-5分鍾，棄去上清液。

• 用完全培養(yang) 基重懸EL4B5細胞。

• 將細胞懸液轉移到含6-8mL完全培養(yang) 基的培養(yang) 瓶中，37°C培養(yang) 過夜。

細胞傳代

• EL4B5細胞為(wei) 半貼壁半懸浮培養(yang) 。

• 不需要酶處理，直接收集培養(yang) 基中的懸浮細胞。

• 輕拍培養(yang) 瓶收集貼壁EL4B5細胞。

• 首次傳(chuan) 代建議比例為(wei) 1:2。

• 保持EL4B5細胞密度低於(yu) 10^6細胞/mL。

培養注意事項

• 懸浮狀態的EL4B5細胞通常更健康。

• 當EL4B5細胞密度低於(yu) 60%時，需收集懸浮細胞離心後重懸，再回加到原培養(yang) 瓶中。

• EL4B5細胞生長至70%-90%時進行傳(chuan) 代。

• 傳(chuan) 代時需收集培養(yang) 基中的懸浮細胞。

凍存

• 凍存液：90% FBS + 10% DMSO

• 細胞密度：>1x10^6細胞/mL

• 緩慢降溫後轉入液氮保存EL4B5細胞。