143B人骨肉瘤細胞（胸腺激酶缺陷細胞）

143B人骨肉瘤細胞是一種源自於(yu) 患有骨肉瘤的13歲白人女性的細胞係，由HOS細胞係衍生而來。
HOS細胞是在1971年從(cong) 患者的骨骼中分離出來的，最初被命名為(wei) TE-85 clone F5。後來，研究者在1975年使用Kirsten鼠肉瘤病毒感染了HOS細胞，產(chan) 生了亞(ya) 克隆R970-5。直到1979年，另一種稱為(wei) “143”的R970-5的衍生細胞係被報道，具有“5-溴脫氧尿苷(BUdR)抗性”、“胸苷激酶陰性突變體(ti) ”特征，之後該細胞係被命名為(wei) 143B。

143B細胞是一種胸苷激酶陰性（TK-）細胞，具有抗性對5-溴脫氧尿苷（BUdR）。這些細胞屬於(yu) 腫瘤細胞，呈上皮細胞樣，並且貼壁生長，被廣泛應用於(yu) 骨肉瘤癌症相關(guan) 研究中。

將143B細胞注射到免疫缺陷小鼠的脛骨內(nei) ，可以迅速發展出腫瘤，並且在注射後兩(liang) 周內(nei) 產(chan) 生溶骨性原發性腫瘤，並伴有廣泛的肺轉移現象。

143B細胞產品參數表

1. 培養(yang) 基準備：

• 使用DMEM/F12培養(yang) 基，並添加10%胎牛血清。

• 可選擇使用推薦的培養(yang) 試劑，如DMEM/F12(CellCook cat:CM2012或Gibco cat:11330)和南美級別胎牛血清(CellCook cat:CM1002L)。

• 需要配套完全培養(yang) 基(CellCook cat：CC2004M)時，按照說明書(shu) 的配方進行製備。

2. 培養(yang) 條件：

• 將培養(yang) 基預先加熱至37°C，保持在合適的溫度。

• 氣相環境設定為(wei) 空氣95%和二氧化碳5%。

• 準備好消化液，一般使用0.25%胰酶/0.02% EDTA。

3. 培養(yang) 過程：

• 將143B細胞培養(yang) 物從(cong) 液氮罐中取出，並迅速放入37°C的水浴中解凍。

• 解凍後，將細胞懸浮液轉移到預先加熱的培養(yang) 基中，並輕輕混合。

• 將含有143B細胞的培養(yang) 基轉移到預先消毒的T25細胞培養(yang) 瓶中。

• 將細胞培養(yang) 瓶放入37°C的培養(yang) 箱中，確保培養(yang) 環境穩定。

• 每周2-3次更換新鮮培養(yang) 基，以保持143B細胞的健康生長。

• 當143B細胞密度達到80%時，進行傳(chuan) 代，傳(chuan) 代比例為(wei) 1:2至1:4。

4. 細胞處理：

• 使用消化液對143B細胞進行消化，一般消化時間為(wei) 2-3分鍾。

• 後續操作時，需注意避免細胞過度消化或過度吸管。

• 在傳(chuan) 代過程中，應注意保持143B細胞培養(yang) 物的無菌狀態，避免細菌或真菌汙染。

5. 凍存條件：

• 使用DMEM/F12培養(yang) 基加入10%FBS和10%DMSO的凍存液，或使用非程序凍存液進行凍存。

• 將凍存液與(yu) 含有143B細胞的培養(yang) 物混合均勻後，迅速放入液氮罐中進行凍存。

注意事項：

• 所有操作需在無菌條件下進行，避免細菌、真菌等汙染。

• 143B細胞培養(yang) 過程中應定期檢查細胞狀態，確保細胞的健康生長。

• 氣相和溫度的穩定性對於(yu) 143B細胞生長至關(guan) 重要，需定期檢查培養(yang) 箱的環境參數。