
U2OS細胞(人骨肉瘤細胞)
- 來源:人骨肉瘤
- 細胞特征:貼壁細胞 , 上皮細胞樣
- 培養(yang) 基:McCoy's 5A+10% FBS+1% P/S
- 其他:基因表達:骨肉瘤衍生生長因子;A型血;Rh+;HLA:(A2;Aw30;B12;Bw35;B40(+/-))
U2OS (U-2 OS) 細胞係是一種源自人類骨肉瘤的細胞係,具有上皮樣細胞形態。U2OS細胞最早於(yu) 1964年由瑞典研究人員Pontén和Saksela從(cong) 一名15歲白人女性患者的脛骨中分離,患者患有中度分化的原發性骨肉瘤。U2OS細胞廣泛應用於(yu) 腫瘤生物學、細胞生物學及藥物篩選等多個(ge) 研究領域。
U2OS細胞表現出高度的染色體(ti) 結構變化,染色體(ti) 數目通常在超三倍體(ti) 範圍內(nei) 。U2OS細胞中幾乎沒有發現正常染色體(ti) ,但大量穩定的標記染色體(ti) 可以被鑒定出來,可以看到涉及相同染色體(ti) (特別是N1、N7、N9和N11)的不同染色體(ti) 重排。共發現22個(ge) 標記染色體(ti) ,例如t(9qter→9q21::1p36→1p::?)、7p+、iso(17q)、t(15q;?)、4q+、del(3)(q21)、5q異常等。
U2OS細胞係曾於(yu) 1972年進行檢測,並成功消除支原體(ti) 汙染。
U2OS細胞特性特征
抗原表達:A型血,Rh+,以及多種HLA抗原(HLA A2、Aw30、B12、Bw35、B40)。
基因表達:表達骨肉瘤衍生生長因子(ODGF)和胰島素樣生長因子I(IGF-I)及II(IGF-II)。
同工酶特征:AK-1,1;ES-D,1;G6PD,B;GLO-I,2;PGM1,2;PGM3,1;
在與(yu) WI-38細胞共培養(yang) 及使用補體(ti) 結合試驗(CF法)檢測猴空泡病毒SV40、呼吸道合胞病毒RSV或腺病毒時,均未發現病毒感染。
U2OS細胞參數表
細胞名稱 | U2OS細胞(人骨肉瘤細胞) |
別名 | U-2 OS; U-2OS; U-2-OS; U2-OS; U20-S; U20S; 2T |
來源 | 人類骨肉瘤細胞,來自一名15歲女性患者的脛骨 |
細胞形態 | 上皮細胞樣,貼壁生長 |
培養基 | McCoy's 5A + 10% 胎牛血清 + 1% 雙抗 |
培養條件 | 氣相:95%空氣,5%二氧化碳;溫度:37°C;濕度:70%-80% |
傳代比例 | 1:2 - 1:4 |
傳代周期 | 每2-3天一次 |
凍存液 | 90% 胎牛血清 + 10% DMSO |
凍存條件 | -80°C 保存後轉入液氮 |
抗原表達 | A型血,Rh+,HLA A2、Aw30、B12、Bw35、B40 |
基因表達 | 骨肉瘤衍生生長因子(ODGF),IGF-I,IGF-II |
同工酶 | AK-1, ES-D, G6PD, GLO-I, PGM1, PGM3 |
汙染檢測 | 無支原體、細菌、酵母和真菌汙染 |
細胞用途 | 僅供科研使用 |
細胞生長特性 | 適合轉染,生長穩定 |
培養教程
U2OS人骨肉瘤細胞培養教程
U2OS細胞複蘇
解凍:將凍存的U2OS細胞懸液在37°C水浴中快速解凍,避免U2OS細胞受損。
離心:將解凍的U2OS細胞懸液移至離心管中,加入4-6mL完全培養(yang) 基,1000rpm離心3-5分鍾,去除冷凍保護劑。
重懸:棄去上清後,用完全培養(yang) 基重懸U2OS細胞。
接種:將U2OS細胞懸液接種到含有6-8mL完全培養(yang) 基的培養(yang) 瓶中,並在37°C培養(yang) 箱中過夜培養(yang) ,以恢複U2OS細胞的活力。
U2OS細胞常規傳代
更換培養(yang) 基:用新鮮的完全培養(yang) 基替換舊的培養(yang) 基,以提供U2OS細胞新的營養(yang) 物質。
細胞消化:使用預熱的0.25%胰蛋白酶-EDTA溶液,在37°C作用5-10分鍾,使U2OS細胞從(cong) 培養(yang) 瓶底部分離。
終止消化:加入等量的完全培養(yang) 基中和胰酶的作用,保護U2OS細胞不受胰酶損傷(shang) 。
離心:1000rpm離心5分鍾,去除消化過程中產(chan) 生的廢液,確保U2OS細胞的完整性。
細胞重懸:用完全培養(yang) 基重懸U2OS細胞,並按1:2至1:4的比例接種到新的培養(yang) 瓶中進行繼續培養(yang) 。
U2OS細胞凍存
收集細胞:在U2OS細胞處於(yu) 對數生長期時進行收集,1000rpm離心5分鍾以去除培養(yang) 基。
凍存:用凍存液重懸U2OS細胞,並將其分裝至凍存管中。
冷凍過程:將凍存管先置於(yu) -80°C冰箱中過夜,隨後轉入液氮中長期保存,確保U2OS細胞的活性。
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STR鑒定及相關
Amelogenin | X |
CSF1PO | 12,13 (CLS=300364; DSMZ=ACC-785) |
13 (ATCC=HTB-96; CCRID; Cosmic-CLP=909776; ECACC=92022711; Technion Genomics Center BCF; KCLB=30096; PubMed=25877200) | |
D1S1656 | 16,17.3 |
D2S441 | 10,14 |
D2S1338 | 20,24 |
D3S1358 | 16 |
D5S818 | 8,11 (CLS=300364; DSMZ=ACC-785) |
11 (ATCC=HTB-96; CCRID; Cosmic-CLP=909776; ECACC=92022711; Technion Genomics Center BCF; KCLB=30096; PubMed=19787792; PubMed=25877200) | |
D6S1043 | 11 |
D7S820 | 11,12 (ATCC=HTB-96; CCRID; CLS=300364; Cosmic-CLP=909776; DSMZ=ACC-785; ECACC=92022711; Technion Genomics Center BCF; KCLB=30096) |
12 (PubMed=25877200) | |
D8S1179 | 12,14 |
D10S1248 | 13,14 |
D12S391 | 19,20 |
D13S317 | 13 |
D16S539 | 11,12 |
D18S51 | 12,14 (CLS=300364; DSMZ=ACC-785; Technion Genomics Center BCF) |
14 (ATCC=HTB-96; CCRID; PubMed=19787792; PubMed=25877200) | |
D19S433 | 15 |
D21S11 | 31 |
D22S1045 | 15,16 |
FGA | 20 |
Penta D | 9 |
Penta E | 10,13 (ATCC=HTB-96; Technion Genomics Center BCF; PubMed=25877200) |
13 (DSMZ=ACC-785) | |
SE33 | 19 |
TH01 | 6,9.3 |
TPOX | 11,12 |
vWA | 14,18 |
參考文獻
- 《第十四屆中國中西醫結合基礎理論學術年會會議資料》 2018年
- 摘要:...分子機製。方法:應用MTT比色法測定白皮杉醇對骨肉瘤U2OS細胞活性的影響;利用FI...
- 《中國臨床藥理學雜誌》 2019年18期
- 摘要:目的觀察華蟾素毒基聯合順鉑對人骨肉瘤U2OS細胞增殖及凋亡的影響。方法對照1組、對照2組、...
- 《第四屆中國腫瘤學術大會暨第五屆海峽兩岸腫瘤學術會議論文集》 2006年
- 摘要:目的:骨形態發生蛋白(bone morphogenetic proteins, BMPs)...
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