MG63細胞係（人骨肉瘤細胞係）

MG-63細胞是源自14歲白人男性骨肉瘤患者骨組織的成纖維細胞樣人骨肉瘤細胞係。MG-63細胞係最早於(yu) 1980年代被分離，現已成為(wei) 研究骨肉瘤的重要模型。
MG-63細胞呈亞(ya) 二倍體(ti) ，約44%的細胞具有66條染色體(ti) ，倍性較高的細胞比例為(wei) 2.0%。在這些細胞中，可以觀察到18至19條標記染色體(ti) 。MG-63細胞在貼壁條件下生長，表現出成纖維細胞樣形態，適用於(yu) 研究骨肉瘤的生物學特性。

MG-63細胞特性特征

• 基因表達：MG-63細胞能夠高水平表達幹擾素，且在特定條件下（如使用聚肌苷酸、放線菌酮和放線菌素D）可誘導其產(chan) 生。

• 受體(ti) 表達：MG63細胞係表達轉化生長因子β（TGF-β）受體(ti) Ⅰ和Ⅱ，參與(yu) 細胞增殖和生長調節。

• MG-63細胞在無血清條件下能夠形成細胞球，表現出幹細胞特性，相關(guan) 幹性標誌物（如CD105）表達顯著提高
  

MG-63細胞參數表

MG-63人骨肉瘤細胞培養教程

MG63細胞複蘇

• 從(cong) 液氮罐中取出凍存的MG63細胞，將凍存管立即置於(yu) 37°C的水浴中迅速融化，直到僅(jin) 剩少量冰塊。

• 使用無菌移液管小心吸取融化的MG63細胞懸液，緩慢加入含10%胎牛血清(FBS)的預熱培養(yang) 基中，以逐步稀釋DMSO的濃度。

• 輕輕混勻後，將MG63細胞懸液轉移到T25培養(yang) 瓶中。

• 將培養(yang) 瓶置於(yu) 37°C、5% CO₂培養(yang) 箱中培養(yang) 過夜，以促進MG63細胞的貼壁。

MG63細胞貼壁與生長

• 次日檢查MG63細胞的貼壁情況。如大部分MG63細胞已經貼壁，可進行第一次傳(chuan) 代。

• 棄去培養(yang) 基，使用預熱的PBS緩衝(chong) 液輕輕衝(chong) 洗MG63細胞層1-2次，去除殘留的血清和雜質。

• 加入0.25%胰酶-EDTA溶液，置於(yu) 37°C下消化3-5分鍾，觀察MG63細胞開始脫落時，立即加入含10%FBS的培養(yang) 基終止消化。

• 使用移液管輕輕吹打混勻，得到單細胞懸液。

• 按照1:3的比例將MG63細胞接種到新的培養(yang) 瓶中，並加入適量預熱的培養(yang) 基。

• 將培養(yang) 瓶置於(yu) 培養(yang) 箱中繼續培養(yang) ，每2-3天更換培養(yang) 基一次，確保MG63細胞的健康生長。

MG63細胞傳代

• 當MG63細胞達到80%左右的融合度時，準備進行傳(chuan) 代。

• 棄去舊的培養(yang) 基，用PBS緩衝(chong) 液輕輕衝(chong) 洗MG63細胞層1-2次。

• 加入0.25%胰酶-EDTA溶液，在37°C下消化3-5分鍾，待MG63細胞層開始脫落時終止消化。

• 加入新鮮的含10%FBS的培養(yang) 基，輕輕吹打，使MG63細胞形成單細胞懸液。

• 以1:3至1:4的比例將MG63細胞接種到新的培養(yang) 瓶中，加入適量預熱的培養(yang) 基。

• 將培養(yang) 瓶置於(yu) 培養(yang) 箱中培養(yang) ，繼續按照每2-3天換液的頻率進行培養(yang) 維護。

MG63細胞凍存

• 在MG63細胞處於(yu) 對數生長期時收集MG63細胞，通過離心分離MG63細胞，棄去上清液。

• 用凍存液（由55%基礎培養(yang) 基、40%FBS和5%DMSO組成）重懸MG63細胞，並將細胞濃度調整為(wei) 1×10⁶-5×10⁶ cells/mL。

• 將MG63細胞懸液分裝至凍存管中，置於(yu) -80°C冰箱中過夜進行初步冷凍。

• 次日將凍存管轉移至液氮罐中長期保存，以確保MG63細胞的活性和存儲(chu) 穩定性。

補充說明

• 根據實驗需求，可能會(hui) 額外添加特定的成分，例如：

• 生長因子：如TGF-β，用於(yu) 促進MG63細胞特定生物學行為(wei) 。

• 誘導劑：如聚肌苷酸、放線菌酮和放線菌素D，用於(yu) 誘導MG63細胞產(chan) 生高水平的幹擾素。