SJSA1細胞（人骨肉瘤細胞）

SJSA-1細胞係最初於(yu) 1982年建立，源自一名19歲黑人男性患者的原發性股骨骨肉瘤。SJSA1細胞係最初被稱為(wei) OsA-CL，後改名為(wei) SJSA-1。
SJSA-1細胞表現為(wei) 上皮樣，並具有貼壁生長的特性。
SJSA1細胞係的核型特征為(wei) 44XY-1、-4、-7、-9、-11、-14、-15，伴有染色體(ti) 異常，包括+del(1)(q32;q42)、+5p+、+der(7)t(4;HSR;7)(4qter-4q12::HSR::7p22-7qter)、+9p+，擴增的gli原癌基因序列在衍生的7號染色體(ti) 的HSR中。

SJSA1細胞（人骨肉瘤細胞）特征特性

• SJSA-1細胞含有編碼p53相關(guan) 蛋白MDM2的基因，且該基因有擴增。

• gli原癌基因在SJSA1細胞中有15倍的擴增。

• 編碼p53相關(guan) 蛋白的基因存在，這可能對p53通路的研究有重要意義(yi) 。

• MDM2基因擴增，這是一個(ge) 重要的腫瘤抑製基因p53的負調控因子。

• gli基因的擴增可能與(yu) 細胞的惡性轉化有關(guan)

SJSA1細胞參數表

SJSA1人骨肉瘤細胞培養教程

SJSA-1細胞複蘇

• 將1 mL SJSA-1細胞凍存液在37°C水浴中快速解凍。

• 將解凍的SJSA-1細胞懸液加入到4-6 mL預熱的完全培養(yang) 基中。

• 1000 rpm離心5分鍾，棄去上清。

• 用新鮮完全培養(yang) 基重懸SJSA-1細胞。

• 將SJSA-1細胞轉移到T25培養(yang) 瓶中，總體(ti) 積約6-8 mL。

• 放入37°C、5% CO2培養(yang) 箱中培養(yang) 。

SJSA-1細胞傳代

• 當SJSA-1細胞密度達到70%-80%時進行傳(chuan) 代。

• 用PBS輕輕清洗SJSA-1細胞1-2次。

• 加入適量胰蛋白酶-EDTA消化液，在37°C下消化2-3分鍾。

• 顯微鏡下觀察，當SJSA-1細胞變圓並開始脫落時，輕拍培養(yang) 瓶。

• 加入含血清的完全培養(yang) 基終止消化。

• 1000 rpm離心5分鍾，棄去上清。

• 用新鮮完全培養(yang) 基重懸SJSA-1細胞。

• 按1:3至1:6的比例進行傳(chuan) 代（首次傳(chuan) 代建議1:2）。

日常維護

• 每2-3天更換SJSA-1細胞培養(yang) 基一次。

• 觀察SJSA-1細胞形態和生長狀態。

• 控製SJSA-1細胞密度，避免過度生長。

SJSA-1細胞凍存

• 製備凍存液：90%血清 + 10% DMSO。

• 收集對數生長期的SJSA-1細胞。

• 調整SJSA-1細胞濃度至>1x10^6細胞/mL。

• 將SJSA-1細胞懸液分裝到凍存管中。

• 使用程序降溫儀(yi) 或逐步降溫法將SJSA-1細胞凍存。

• 轉移到-80°C冰箱（短期）或液氮（長期）保存。

收到SJSA-1細胞後的處理

• 使用75%酒精消毒SJSA-1細胞培養(yang) 瓶的外壁。

• 將培養(yang) 瓶置於(yu) 37°C細胞培養(yang) 箱內(nei) 靜置2-4小時，以便穩定SJSA-1細胞狀態。

• 在顯微鏡下觀察SJSA-1細胞狀態，確認細胞是否完好，拍攝細胞顯微照片（10×，20×）各2-3張，以及培養(yang) 瓶外觀照片作為(wei) 記錄。

• 如果SJSA-1細胞密度低於(yu) 60%，去除培養(yang) 瓶中的灌液培養(yang) 基，將未貼壁的SJSA-1細胞離心回收後重懸於(yu) 新配製的完全培養(yang) 基中，再加入到原培養(yang) 瓶中。

• 如果SJSA-1細胞密度達到70%-80%以上，可進行傳(chuan) 代處理。由於(yu) 運輸振動可能導致細胞脫落，需要離心回收SJSA-1細胞後進行傳(chuan) 代。

• 運輸用的培養(yang) 基（灌液培養(yang) 基）不能繼續使用，應更換為(wei) 新配製的完全培養(yang) 基。

注意事項

• 操作過程中保持無菌環境。

• 定期檢查SJSA-1細胞是否有汙染。

• 避免SJSA-1細胞過度生長或密度過低。

• 不要使用運輸用的灌液培養(yang) 基繼續培養(yang) SJSA-1細胞。

• 首次傳(chuan) 代後，密切關(guan) 注SJSA-1細胞狀態，必要時調整培養(yang) 條件。