SK-N-AS細胞（人神經母細胞瘤細胞）

SK-N-AS細胞是一種人類神經母細胞瘤細胞係，源自一名6歲白人女性患者的神經母細胞瘤。雖然SK-N-AS細胞最初是從(cong) 患者腦中的神經母細胞瘤組織分離出來的，但真正的組織來源是患者骨髓中的轉移性病灶。

SK-N-AS細胞特征特性

• sk-n-as細胞源自6歲白人女性患者的神經母細胞瘤、實際取自骨髓轉移灶，而非原發腦腫瘤

• sk-n-as細胞具有致瘤性，能在裸鼠體(ti) 內(nei) 形成腫瘤；具有骨髓轉移能力

• sk-n-as細胞表達胰島素樣生長因子I（IGF-I）、合成胰島素樣生長因子II（IGF-II）及其RNA、具有I型IGF受體(ti) 、MDR1基因表達低或完全不表達

• sk-n-as細胞對Ref-維甲酸部分抑製增殖、不能被維甲酸誘導分化、低MDR1表達可能影響其在多藥耐藥性研究中的應用

SK-N-AS細胞參數表

SK-N-AS人神經母細胞瘤細胞培養教程

SK-N-AS細胞複蘇

• 從(cong) 液氮中取出凍存的SK-N-AS細胞，迅速置於(yu) 37°C水浴中，輕輕搖動直至完全解凍。

• 將解凍後的SK-N-AS細胞懸液轉移至含有預熱完全培養(yang) 基的離心管中。

• 以1000rpm離心5分鍾，棄去上清。

• 用新鮮的完全培養(yang) 基重懸SK-N-AS細胞，並將其轉移至培養(yang) 瓶中，置於(yu) 37°C、5% CO2培養(yang) 箱中。

SK-N-AS細胞常規培養

• 培養(yang) 器皿：使用T25或T75培養(yang) 瓶

• 換液頻率：每2-3天更換一次培養(yang) 基

• 細胞密度：保持在30-80%之間

SK-N-AS細胞傳代步驟

• 頻率：每周2次

• 比例：1:2至1:6

• 用無菌PBS洗滌SK-N-AS細胞1-2次。

• 加入適量的胰蛋白酶-EDTA，37°C孵育2-3分鍾，觀察SK-N-AS細胞脫落。

• 輕拍培養(yang) 瓶，使SK-N-AS細胞充分脫落。

• 加入等體(ti) 積的完全培養(yang) 基中和胰蛋白酶。

• 以1000rpm離心5分鍾，棄去上清。

• 用新鮮完全培養(yang) 基重懸SK-N-AS細胞，按所需比例接種至新的培養(yang) 瓶中。

SK-N-AS細胞凍存

• 配製凍存液：90% FBS + 10% DMSO。

• 調整SK-N-AS細胞密度至1-2×10^6 cells/mL。

• 將SK-N-AS細胞懸液分裝入凍存管中，置於(yu) 程序降溫盒中，先在-80°C過夜，然後轉入液氮中長期保存。

SK-N-AS細胞常見問題及其解決方法

• SK-N-AS細胞貼壁不良：確保培養(yang) 基新鮮，培養(yang) 條件（37°C，5% CO2）合適；解凍後立即更換培養(yang) 基以去除DMSO。

• SK-N-AS細胞汙染：嚴(yan) 格執行無菌操作，使用無菌培養(yang) 基；定期進行支原體(ti) 檢測。

• SK-N-AS細胞過度匯合：適時傳(chuan) 代，保持SK-N-AS細胞密度適中；傳(chuan) 代時遵循1:2至1:6的比例。

• 培養(yang) 基pH值變化對SK-N-AS細胞的影響：及時更換培養(yang) 基，確保其新鮮度；每2-3天更換一次培養(yang) 基。

• SK-N-AS細胞形態異常：定期觀察SK-N-AS細胞形態，及時發現和解決(jue) 異常情況。