SK-N-BE(2)細胞（人神經母細胞瘤細胞）

SK-N-BE(2)細胞係是一種人神經母細胞瘤細胞係，於(yu) 1972年從(cong) 一名2歲男孩的骨髓活檢樣本中建立。該男孩患有擴散性神經母細胞瘤，並接受過多次化療和放療。SK-N-BE(2)細胞主要用於(yu) 神經科學和免疫學的研究。

SK-N-BE2細胞係的模態染色體(ti) 數為(wei) 44，包含一條或多條攜帶HSR（擴增區）的染色體(ti) 。SK-N-BE2細胞在培養(yang) 中達到超過1 x 10^6個(ge) 細胞/cm²的飽和密度。細胞形態多樣化，有些細胞帶有長突起，而另一些則呈現上皮樣結構。細胞常常聚集形成團塊並漂浮在培養(yang) 基中。

SK-N-BE2細胞特性特征

• 酶活性：SK-N-BE2細胞顯示中等水平的多巴胺-β-羥化酶活性

• 致瘤性：SK-N-BE2細胞在皮質化倉(cang) 鼠頰囊中，107個(ge) 細胞的接種物產(chan) 生腫瘤的頻率為(wei) 18%

• 轉移性：SK-N-BE2細胞具有骨髓轉移能力

• 應用價(jia) 值：可用於(yu) 神經科學和免疫學研究、作為(wei) 神經母細胞瘤研究的重要細胞模型

SK-N-BE2細胞參數表

SK-N-BE2人神經母細胞瘤細胞培養教程

複蘇步驟

• 將完全培養(yang) 液（DMEM/F-12，10%胎牛血清，1%雙抗）放入37°C水浴中預熱30分鍾，以準備用於(yu) SK-N-BE2細胞的複蘇。
  

• 從(cong) 液氮中取出SK-N-BE2細胞的凍存管，轉移至-80°C冰箱，放置數分鍾以揮發殘餘(yu) 液氮。

• 在超淨台中，吸取6-7 mL完全培養(yang) 液至15 mL離心管。
  

• 從(cong) -80°C冰箱中取出SK-N-BE2細胞的凍存管，輕輕甩動以去除殘留幹冰和液氮。

• 用鑷子夾住凍存管蓋子，迅速放入37°C水浴中，快速晃動約1分鍾，直至SK-N-BE2細胞完全融化（注意：水浴不能淹沒蓋子）。

• 用酒精棉球擦拭凍存管外壁消毒，待其稍微晾幹。

• 用單道移液器將融化的細胞懸液全部轉入準備好的離心管中，1100 rpm室溫離心4分鍾以收集SK-N-BE2細胞。

• 棄去上清，用1 mL新鮮完全培養(yang) 液重懸SK-N-BE2細胞，再轉移至裝有4 mL完全培養(yang) 液的T25培養(yang) 瓶中。

• 標記SK-N-BE2細胞的名稱、複蘇日期、代次，將其放入37°C、5% CO2飽和濕度培養(yang) 箱中進行培養(yang) 。

培養步驟

• 使用DMEM/F-12培養(yang) 基，加入10%胎牛血清和1%雙抗，專(zhuan) 用於(yu) SK-N-BE2細胞的培養(yang) 。
  

• 細胞觀察：SK-N-BE2細胞的形態多樣，包括長突起細胞和上皮樣細胞，細胞會(hui) 聚集形成團塊並漂浮。

傳代步驟

• 傳(chuan) 代比例：1:2至1:3，用於(yu) SK-N-BE2細胞的傳(chuan) 代。

• 棄去SK-N-BE2細胞的培養(yang) 上清，用PBS潤洗細胞1-2次。
  

• 加入0.25%胰蛋白酶-0.53mM EDTA消化液，輕輕晃動瓶子使胰酶完全覆蓋SK-N-BE2細胞。

• 將培養(yang) 瓶放入培養(yang) 箱中孵育1-2分鍾，觀察SK-N-BE2細胞是否開始脫落。

• 加入含血清的培養(yang) 基以終止消化，收集SK-N-BE2細胞懸液，1100 rpm離心4分鍾。

• 棄去上清，用新鮮培養(yang) 基重懸SK-N-BE2細胞，按1:2至1:3比例分裝到新的培養(yang) 瓶中繼續培養(yang) 。

凍存步驟

• 凍存液：90%胎牛血清 + 10% DMSO，專(zhuan) 用於(yu) SK-N-BE2細胞的凍存。

• 收集SK-N-BE2細胞，1100 rpm離心4分鍾，棄去上清。
  

• 用凍存液重懸SK-N-BE2細胞，確保細胞密度不低於(yu) 1 x 10^6細胞/mL。

• 將SK-N-BE2細胞懸液分裝到凍存管中，每管1 mL。

• 逐步降溫至-80°C過夜，隨後轉移至液氮中長期保存。

接收處理

• 收到SK-N-BE2細胞後，用75%酒精消毒瓶壁。

• 將T25瓶置於(yu) 37°C培養(yang) 箱中放置2-3小時，顯微鏡下確認SK-N-BE2細胞狀態。

• 若SK-N-BE2細胞密度低於(yu) 60%，收集懸浮細胞離心後用完全培養(yang) 基重懸，並返回原培養(yang) 瓶繼續培養(yang) 。

• 若SK-N-BE2細胞密度在70%-90%，則進行傳(chuan) 代，收集培養(yang) 基中的懸浮細胞，離心後回收。