Neuro-2a細胞（N2a小鼠腦神經瘤細胞）

Neuro-2a（N2a）小鼠神經母細胞瘤細胞係是由R.J. Klebe和F.H. Ruddle於(yu) 1969年通過A株小鼠的自發腫瘤建立。N2a細胞來源於(yu) 小鼠腦神經母細胞，具有神經元和變形蟲幹細胞的形態特征，常用於(yu) 研究神經生物學過程及相關(guan) 疾病機製，如缺血性腦卒中和焦慮障礙。
Neuro-2a細胞以其大量產(chan) 生微管蛋白而著稱，這些蛋白在神經細胞內(nei) 起著重要作用，參與(yu) 了軸漿流動的收縮係統的調控。N2a細胞係為(wei) 研究長春新堿引發的微管蛋白沉澱機製、GTP與(yu) 分離蛋白的結合動力學、微管蛋白在細胞內(nei) 的周轉與(yu) 合成、以及微管的組裝等提供了寶貴的研究模型。

Neuro-2a細胞的核型不穩定，染色體(ti) 數目介於(yu) 59到193之間，模態數為(wei) 95。染色體(ti) 通常表現出中位或亞(ya) 中位著絲(si) 粒的大染色體(ti) 6至10條，以及2至4條微小染色體(ti) 。這種染色體(ti) 的不穩定性在文獻中也有報道，且通常與(yu) ATCC的初始種子庫信息一致。

N2a小鼠腦神經瘤細胞特性特征

• 抗原表達: N2a細胞表達H-2單倍型抗原，屬於(yu) 小肌肉（Mus musculus）類型。

• 病毒易感性: N2a細胞對單純皰疹病毒、水皰性口炎病毒和人脊髓灰質炎病毒1型敏感。

• 基因表達:乙酰膽堿酯酶（acetylcholinesterase），參與(yu) 神經遞質的代謝；微管蛋白（tubulin），在神經細胞中起到軸漿流動的收縮係統作用。

• Neuro-2a細胞還被世界動物衛生組織（OIE）用於(yu) 狂犬病的常規診斷，並廣泛應用於(yu) 神經科學和毒理學研究。
  

• N2a細胞係經檢測鼠痘病毒陰性。
  

Neuro-2a細胞參數表

Neuro-2a小鼠腦神經瘤細胞培養教程

細胞複蘇

• 從(cong) 液氮中取出冷凍保存的N2a細胞管，迅速放入37℃水浴中，輕輕搖動，直至N2a細胞完全融化（約1-2分鍾）。
  

• 將融化的N2a細胞懸液轉移至一個(ge) 裝有10 ml完全培養(yang) 基的離心管中，輕輕混勻。

• 以900 rpm的速度離心5分鍾，棄去上清液，保留沉澱的N2a細胞。

• 加入1-2 ml新鮮的培養(yang) 基，輕輕重懸N2a細胞。

• 將N2a細胞轉移至一個(ge) T25培養(yang) 瓶中，補充培養(yang) 基至10-12 ml。

• 將培養(yang) 瓶置於(yu) 37℃培養(yang) 箱中培養(yang) N2a細胞，使其恢複生長。

細胞傳代

• 當N2a細胞密度達到80%-90%時，可進行傳(chuan) 代操作。
  

• 吸去培養(yang) 瓶中的舊培養(yang) 基，盡量清除幹淨，以避免殘留物影響N2a細胞的傳(chuan) 代。
  

• 用3-4 ml常溫PBS輕輕洗滌N2a細胞10-20秒，然後吸去PBS。

• 加入1 ml胰酶溶液，輕輕搖動培養(yang) 瓶，使胰酶均勻覆蓋N2a細胞層。

• 將培養(yang) 瓶置於(yu) 37℃培養(yang) 箱中消化，觀察N2a細胞間隙變大但未完全脫落時，加入2-3 ml完全培養(yang) 基以終止消化。

• 輕輕混勻N2a細胞懸液，900 rpm離心3-5分鍾，棄去上清液。

• 用新的完全培養(yang) 基重懸N2a細胞，將細胞均勻分配到新的培養(yang) 瓶中，傳(chuan) 代比例一般為(wei) 1:2至1:4。

• 補充適量的完全培養(yang) 基，並將培養(yang) 瓶置於(yu) 培養(yang) 箱中繼續培養(yang) N2a細胞。

培養基更換

• 換液周期:每2-3天更換一次N2a細胞的培養(yang) 基。

• 小心吸去舊的培養(yang) 基，確保操作過程中不損傷(shang) N2a細胞層。
  

• 加入新鮮的完全培養(yang) 基，輕輕搖動培養(yang) 瓶，使N2a細胞均勻分布。

注意事項

• 不同品牌的胰酶可能需要不同的消化時間，應根據實際情況進行調整，以確保N2a細胞的完整性。

• 定期觀察N2a細胞的形態和生長狀態，確保無汙染。如果發現N2a細胞生長狀態不佳，應及時檢查培養(yang) 基成分和培養(yang) 環境。

• 傳(chuan) 代時操作應輕柔，避免對N2a細胞造成損傷(shang) 。

細胞凍存

• 當N2a細胞密度達到80%-90%時，可進行細胞凍存。
  

• 用無血清凍存液重懸N2a細胞。

• 將N2a細胞懸液分裝至凍存管中，逐步降溫至-80℃，隨後轉移至液氮罐中長期保存。