原代小鼠下丘腦神經元細胞

小鼠下丘腦神經元細胞源自下丘腦，這個(ge) 位於(yu) 大腦腹麵、丘腦下方的區域是調節內(nei) 髒活動和內(nei) 分泌活動的重要神經中樞。

下丘腦神經元不僅(jin) 通過神經和血管途徑調節腦垂體(ti) 前、後葉激素的分泌和釋放，還參與(yu) 調節自主神經係統，例如調控水鹽代謝、體(ti) 溫、攝食、睡眠、生殖、內(nei) 髒活動以及情緒。下丘腦神經元還與(yu) 其他部位的神經纖維有著廣泛的突觸聯係，能夠接受多種神經衝(chong) 動，成為(wei) 內(nei) 分泌係統和神經係統的中心。

下丘腦神經元還能調節垂體(ti) 前葉功能，合成神經垂體(ti) 激素，並控製自主神經和植物神經功能。

下丘腦神經元特性

• 下丘腦的解剖位置和功能，包括其三個(ge) 部分的描述，以及調節內(nei) 髒活動和內(nei) 分泌活動的功能。

• 下丘腦神經元的特性，包括具有許多細胞核團和纖維束，與(yu) 其他部位密切相互聯係，以及調節腦垂體(ti) 前、後葉激素分泌和釋放的能力。

• 下丘腦神經元參與(yu) 調節自主神經係統的功能，如水鹽代謝、體(ti) 溫調節、攝食、睡眠、生殖、內(nei) 髒活動和情緒等。

• 下丘腦神經元具有廣泛的突觸聯係，能接受多種神經衝(chong) 動，是內(nei) 分泌係統和神經係統的中心。

• 下丘腦神經元能夠調節垂體(ti) 前葉功能，合成神經垂體(ti) 激素，控製自主神經和植物神經功能。

小鼠下丘腦神經元細胞參數表

小鼠下丘腦神經元細胞培養

培養條件

• 包被條件：PLL（0.1 mg/ml）

• 培養(yang) 基：神經元專(zhuan) 用培養(yang) 基

• 換液頻率：每2-3天換液一次

• 培養(yang) 環境：空氣95%，CO₂ 5%

細胞操作步驟

細胞消化

• 使用0.125%胰蛋白酶進行細胞消化。

• 消化時間為(wei) 37°C下20-30分鍾。

• 消化結束後加入PBS緩衝(chong) 液稀釋消化液，轉移到15ml離心管中，最終PBS緩衝(chong) 液的體(ti) 積為(wei) 消化液體(ti) 積的3倍。

• 吹打混勻後，置於(yu) 離心機2000轉，離心15分鍾。

細胞傳(chuan) 代

• 將上清吸入15ml管中。

• 用1ml PBS緩衝(chong) 液潤洗2次，加入15ml管中。

• 離心2000轉，15分鍾。

• 吸去上清，加入500微升消化液，放入培養(yang) 箱中橫放5-10分鍾（消化好後，會(hui) 變成絮狀，輕輕吹打則變透明）。

• 加入1500微升PBS緩衝(chong) 液稀釋消化液，吹打幾次，至溶液變澄清。

• 離心，轉速2000轉，5分鍾。

• 吸去上清，用新鮮NSC培養(yang) 基重懸，分盤。

• 傳(chuan) 代比例：不傳(chuan) 代。

• 懸浮細胞（6厘米培養(yang) 皿）：

細胞凍存

• 使用10% DMSO的神經幹細胞完全培養(yang) 基凍存。

細胞鑒定

形態觀察：神經幹細胞一般懸浮培養(yang) ，形成神經球。

標誌物鑒定

• Sox2及Nestin免疫熒光鑒定，純度可達90%以上。

• SOX2+≥90%；

• β-Tubulin+≤10%，排除神經元細胞；

• GFAP+≤10%，排除星形膠質細胞；

• GalC或OSP+≤10%，排除少突膠質細胞。