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hcmec/d3細胞（人腦微血管內(nei) 皮細胞）貨號：STM-CL-5158 規格：1×10⁶cells/T25培養(yang) 瓶或1mL凍存管

hcmec/d3細胞（人腦微血管內(nei) 皮細胞）

  • 來源：大腦微血管
  • 細胞特征：貼壁細胞 ，紡錘形細胞
  • 培養(yang) 基：生長培養(yang) 基：hCMEC/D3 細胞專(zhuan) 用培養(yang) 基
  • 其他：hCMEC/D3細胞表達多種血腦屏障標誌物，如CD34、CD31、CD40、CD105和CD144。
Tags： 腦微血管細胞    
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價(jia) 格：￥ 1,900.00

hcmec/d3細胞係源自人類顳葉微血管（癲癇手術中切除的組織）。

hcmec/d3細胞特性

  • hcmec/d3細胞係通過慢病毒載體(ti) 轉導與(yu) 人端粒酶催化亞(ya) 基（hTERT）和SV40大T抗原連續永生化。

  • hcmec/d3細胞通過有限稀釋克隆選擇性分離CEC，經鑒定hCMEC/D3細胞係特定表型特征與(yu) 腦內(nei) 皮細胞（Cerebral Endothelial Cell, CEC）相符。

  • hcmec/d3細胞係是一種穩定、易於(yu) 生長的血腦屏障（BBB）模型。

  • hcmec/d3細胞適用於(yu) 藥物攝取和主動轉運研究，以及了解大腦內(nei) 皮細胞對不同病原體(ti) 和炎症刺激的反應。

  • hcmec/d3細胞表達多種血腦屏障標誌物，如CD34、CD31、CD40、CD105和CD144。

  • hcmec/d3細胞可用於(yu) 研究中樞神經係統（CNS）病理學、藥物轉運機製、神經毒性和神經係統細胞與(yu) 分子機製。

hcmec/d3細胞參數表

細胞名稱hcmec/d3細胞（人腦微血管內皮細胞）
細胞簡稱HCMEC/D3；hcmecd3
種屬來源人類
組織來源顳葉微血管，從癲癇手術中切除的組織分離
細胞形態上皮細胞樣，細長型
生長特性貼壁生長，形成毛細血管樣結構
主要分離物腦內皮細胞（CECs）
凍存液90% FBS，10% DMSO 或非程序凍存液
培養基礎永生化人腦微血管內皮細胞基礎培養基
培養條件氣相：95% 空氣，5% 二氧化碳；溫度：37攝氏度，濕度70%-80%
培養周期傳代比例：1:2-1:4，每2-3天換液一次
生長因子內皮細胞生長因子（EGF）+ 5% FBS
生長倍增時間每周2至3次
表型鑒定鑒定為腦內皮細胞表型
質控細菌、真菌、支原體檢測均為陰性
用途僅限科學研究，不可作為動物或人類疾病的治療產品使用
應用神經科學、神經退行性疾病、藥物轉運機製、神經毒性和細胞分子研究等
凍存條件60% 基礎培養基 + 30% FBS + 10% DMSO，液氮儲存
保藏機構BCRJ 0401

培養教程

hcmec/d3人腦微血管內皮細胞培養

細胞複蘇過程

  • 快速將凍存管放入37°C水浴中，搖動直至完全解凍（<1分鍾）。

  • 將解凍後的細胞轉移至預先加熱至37°C的離心管中，含有3 mL完全培養(yang) 基。

  • 在1000 rpm下離心5分鍾，去除上清液。

  • 使用新的完全培養(yang) 基完全重懸細胞，確保細胞單個(ge) 化，並將其接種到10cm培養(yang) 皿中。

  • 培養(yang) 過夜，並在第二天進行液體(ti) 更換並檢查細胞密度。

細胞凍存過程

  • 配置凍存液為(wei) 血清：二甲基亞(ya) 碸（DMSO）= 9:1的比例。

  • 取長勢良好、無細菌汙染的hCMEC/D3細胞，匯合度達80%-90%。

  • 使用含0.25% EDTA的胰蛋白酶溶液消化細胞（1-2分鍾），並用完全培養(yang) 基終止消化。

  • 將細胞以1.5 mL凍存液重懸，並轉移至預標記好的凍存管中。

  • 標記好細胞種類、日期和操作者信息，並放入梯度凍存盒中。

  • 置於(yu) -80°C冰箱中快速冷凍。

細胞傳代過程

  • 當hCMEC/D3細胞匯合達到80%時，丟(diu) 棄舊的培養(yang) 基。

  • 用PBS潤洗細胞兩(liang) 次，每次使用2 mL。

  • 使用1 mL含0.25% EDTA的胰蛋白酶溶液消化細胞，放入培養(yang) 箱中1-2分鍾直至細胞圓形化。

  • 使用1 mL完全培養(yang) 基終止消化，用九宮格法將細胞吹落並收集至離心管中。

  • 以800-1000 rpm室溫離心5分鍾，去除上清液。

  • 使用2-3 mL完全培養(yang) 基重懸細胞，確保細胞沉澱為(wei) 單個(ge) 狀態。

  • 將細胞以“Z”字形播撒至預先加入7 mL培養(yang) 基的10cm培養(yang) 皿中。

  • 輕柔十字交錯晃動並靜置數分鍾，然後放入37°C培養(yang) 箱中培養(yang) 。

相關資料

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STR鑒定及相關

AmelogeninX
CSF1PO10,12
D1S165615.3,17.3
D2S44113
D2S133816,20
D3S135816,17
D5S81811
D7S82010,12
D8S117915,16
D10S124814,15
D12S39119.3,22
D13S31711,14
D16S5399,12
D18S5112,19
D21S1130,32.2
D22S104511,15
FGA22,26
Penta D10,12
Penta E5,10
TH017,9
TPOX10,11
vWA14,17

參考文獻

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