
HMC3細胞係(人腦小膠質細胞係)
- 來源:腦組織
- 細胞特征:貼壁細胞 , 上皮細胞樣
- 培養(yang) 基:MEM(含NEAA)+10% FBS+1%P/S
- 其他:HMC3細胞可以無限期生長,適合用於(yu) 小膠質細胞功能生化分析。
HMC3細胞是一種通過SV40永生化人胎兒(er) 大腦原代小膠質細胞培養(yang) 物建立的人腦小膠質細胞係。HMC3細胞係保留了原代小膠質細胞的特性,可以無限期生長的同質細胞群。
HMC3細胞對小膠質細胞/巨噬細胞標記物IBA1呈強陽性,對內(nei) 毒素受體(ti) CD14呈陽性,但對星形膠質細胞標記物GFAP呈陰性。
HMC3細胞係特性
通過SV40永生化的HMC3細胞保留了原代小膠質細胞的特性。
HMC3細胞可以無限期生長,適合用於(yu) 小膠質細胞功能生化分析。
HMC3細胞支持轉染,可用於(yu) 研究各種基因的表達調控。
靜息狀態下,HMC3細胞對小膠質細胞/巨噬細胞標記物IBA1和內(nei) 毒素受體(ti) CD14呈陽性,但對星形膠質細胞標誌物GFAP呈陰性。
活化狀態下,HMC3細胞的MHCII、CD68和CD11b在靜息狀態下為(wei) 陰性,但在被IFN-γ(10ng/ml,24小時)激活後上調。
HMC3細胞係參數表
細胞名稱 | HMC3細胞係(人腦小膠質細胞係) |
別稱 | Human Microglia Clone 3 (CHME-3, CHME3, HMC-3) |
種屬 | 人類 |
年齡(性別) | 胎兒 |
組織來源 | 腦組織 |
細胞類型 | 轉化細胞係 |
細胞形態 | 上皮細胞樣,貼壁生長 |
生長特性 | 貼壁細胞 |
生物安全等級 | BSL-2 |
背景描述 | HMC3細胞係是通過SV40依賴性永生化人類胎兒(er) 腦源性原代小膠質細胞培養(yang) 物建立的。 永生化的小膠質細胞群能無限性生長,用於(yu) 小膠質細胞的生化功能分析; HMC3細胞也易於(yu) 轉染而通常用於(yu) 轉染基因的表達研究,具有原代小膠質細胞的特性。 |
主要標記物 | 靜息狀態下:IBA1(強陽性)、CD14(陽性)、GFAP(陰性)。活化狀態 下(IFN-γ 10ng/mL,24小時):MHCII、CD68、CD11b上調。 |
生長培養基 | MEM(含NEAA)+10% FBS+1% P/S |
培養條件 | 氣相:空氣,95%;CO2,5%;溫度:37℃;濕度:70%-80% |
推薦傳代比例 | 1:3-1:8 |
推薦換液頻率 | 2-3次/周 |
凍存條件 | 凍存液:55% 基礎培養基+40% FBS+5% DMSO;溫度:液氮 |
支原體檢測 | 陰性 |
應用 | 神經科學,神經炎症研究。HMC3細胞用於(yu) 小膠質細胞功能的生化分析,並支持各種基因 的轉染表達調控研究。 |
保藏機構 | ATCC; CRL-3304 |
培養教程
HMC3人腦小膠質細胞係培養教程
HMC3細胞的複蘇
將含有1mL HMC3細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍。
加入解凍的HMC3細胞懸液到含8-10mL完全培養(yang) 基的離心管中,混合均勻。
在1000RPM條件下離心3-5分鍾,棄去上清液,重懸HMC3細胞。
將HMC3細胞懸液加入含6-8ml完全培養(yang) 基的培養(yang) 瓶(或皿)中,在37℃培養(yang) 過夜。第二天使用顯微鏡觀察HMC3細胞生長情況和密度。
HMC3細胞的傳代
當HMC3細胞密度達到80%-90%時,進行傳(chuan) 代培養(yang) 。
使用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗HMC3細胞,加入0.25%(w/v)胰蛋白酶-0.53mM EDTA於(yu) 培養(yang) 瓶中消化1-2分鍾。
消化後觀察HMC3細胞狀態,絕大多數細胞變圓並脫落時,加入含10% FBS的培養(yang) 基終止消化。
離心並去除上清液,重懸HMC3細胞並按1:3的比例分到新培養(yang) 瓶中,根據需要調整培養(yang) 基。
HMC3細胞的凍存
在HMC3細胞培養(yang) 前3代時,凍存一批細胞種子以備後續實驗使用。
製備凍存液(推薦配比:55%(基礎培養(yang) 基DM/F12)+ 40%(血清)+ 5%(DMSO))。
將HMC3細胞懸液加入凍存液後,分裝到凍存管中,放入-80℃冰箱過夜,隨後轉移到液氮長期保存。
相關資料
STR鑒定及相關
Amelogenin | X |
CSF1PO | 10,11 |
D2S1338 | 17,25 |
D3S1358 | 16,18 |
D5S818 | 11,12 |
D6S1043 | 11 |
D7S820 | 9,11 |
D8S1179 | 13,14 |
D12S391 | 16,21 |
D13S317 | 11 |
D16S539 | 12,13 |
D18S51 | 18 |
D19S433 | 15,15.2 |
D21S11 | 30,31.2 |
FGA | 21,25 |
Penta D | 10,14 |
Penta E | 7,13 |
TH01 | 6 |
TPOX | 8,9 |
vWA | 17,19 |