u87mg細胞 （人腦星形膠質母細胞瘤細胞）

U-87 MG人腦星形膠質母細胞瘤細胞是一種具有上皮形態的細胞係，從(cong) 一名男性患者的惡性膠質瘤中分離出來，可能患有膠質母細胞瘤。用於(yu) 神經科學和免疫腫瘤學研究。

u87mg細胞係為(wei) 亞(ya) 二倍體(ti) ，模式染色體(ti) 數為(wei) 44，出現在48%的細胞中，並具有高達5.9%的高倍性率。U-87 MG細胞係包含12個(ge) 標記物，包括der（1）t（1；3）（p22；q21）、der（16）t（2；p12）、del（9）（p13）等，標記der（1）在大多數細胞中具有兩(liang) 個(ge) 拷貝。正常的X染色體(ti) 隻有一個(ge) 拷貝，N1，N6和N9染色體(ti) 沒有找到。

U-87 MG細胞係具有致瘤性，在裸鼠皮下接種後能夠成瘤。其同工酶譜為(wei) AK-1,1；ES-D,1；G6PD,B；GLO-I,1；Me-2,1；PGM1,2；PGM3,1。通過STR圖譜、Y染色體(ti) 圖譜和Q帶分析，確認該細胞係起源於(yu) 雄性，且可能為(wei) 中樞神經係統起源的膠質母細胞瘤（Allen，2016）。

u87mg細胞由Ponten J等於(yu) 1966年至1969年間建立，支原體(ti) 汙染於(yu) 1975年9月消除。U-87 MG細胞適用於(yu) 3D細胞培養(yang) 、神經科學和免疫腫瘤學研究，也是合適的轉染宿主。

u87mg細胞特性

• U-87 MG細胞係具有上皮形態。

• 該細胞係為(wei) 亞(ya) 二倍體(ti) ，模式染色體(ti) 數為(wei) 44，出現在48%的細胞中，高倍性率為(wei) 5.9%。

• 細胞係具有12個(ge) 標記物，包括der（1）t（1；3）（p22；q21）、der（16）t（2；p12）、del（9）（p13）等。

• 標記der（1）在大多數細胞中具有兩(liang) 個(ge) 拷貝，隻有一個(ge) 拷貝的正常X染色體(ti) ，N1，N6和N9沒有找到。

• 裸鼠皮下接種可成瘤。

• 同工酶：AK-1,1；ES-D,1；G6PD,B；GLO-I,1；Me-2,1；PGM1,2；PGM3,1。

• U-87 MG細胞適用於(yu) 3D細胞培養(yang) 、神經科學和免疫腫瘤學研究，也是合適的轉染宿主。

u87mg細胞參數表

u87mg人腦星形膠質母細胞瘤細胞培養教程

細胞複蘇

• 解凍後，將含有1 mL 細胞懸液的凍存管中的細胞懸液緩慢加入含有4-6 mL 完全培養(yang) 基的離心管中，輕輕混合均勻。

• 在1000 RPM 條件下離心3-5 分鍾，棄去上清液。

• 重新懸浮細胞沉澱，將細胞懸液加入含有6-8 mL 完全培養(yang) 基的培養(yang) 瓶或培養(yang) 皿中。

• 將培養(yang) 瓶或培養(yang) 皿放入37°C培養(yang) 箱中，培養(yang) 過夜。

傳代步驟

• 當U-87 MG細胞密度達到70%-80%時進行傳(chuan) 代。

• 準備好新的培養(yang) 瓶或培養(yang) 皿，以及所需的傳(chuan) 代培養(yang) 基（MEM培養(yang) 基含有NEAA、10% FBS、1% P/S）。

• 棄去舊的培養(yang) 基，用不含鈣、鎂離子的PBS輕輕衝(chong) 洗細胞1-2 次，使細胞表麵清潔。

• 向培養(yang) 瓶中加入適量的0.25% 胰蛋白酶-0.53 mM EDTA 消化液（T25 瓶約1-2 mL，T75 瓶約2-3 mL），放置於(yu) 37°C培養(yang) 箱中消化1-2 分鍾（需要視覺觀察消化情況）。

• 當絕大多數細胞變圓並脫落時，立即將培養(yang) 瓶拿回操作台，輕輕敲擊幾下促進細胞的分散。

• 加入3-4 mL 含10% FBS的培養(yang) 基終止消化作用。

• 將消化後的細胞收集到離心管中，以1000 RPM 離心5分鍾，棄去上清液。

• 補加1-2 mL 培養(yang) 基，輕輕懸浮混勻。

• 按照1：2 的比例將細胞懸液分配到新的培養(yang) 瓶或培養(yang) 皿中，加入6-8 mL 新鮮配置的完全培養(yang) 基。

• 將培養(yang) 瓶或培養(yang) 皿放入37°C培養(yang) 箱中繼續培養(yang) 。

凍存步驟

• 在細胞生長狀態良好時進行細胞凍存。

• 棄去培養(yang) 基，用PBS洗滌瓶底1-2 次，使細胞表麵清潔。

• 加入1 mL 胰蛋白酶消化液（0.25%）至瓶中，放置於(yu) 37°C培養(yang) 箱中消化1-2 分鍾，直到細胞大多數變圓並脫落。

• 加入2 mL 完全培養(yang) 基終止消化作用，輕輕懸浮混勻。

• 離心5分鍾以1000 RPM 速度離心，去除上清液。

• 加入適量含10% DMSO的完全培養(yang) 基，使DMSO最終濃度達到10%。

• 按每管至少1x10^6 個(ge) 細胞的數量，將細胞懸液分裝到凍存管中。

• 記錄凍存管的標識信息。

• 將凍存管置於(yu) 程序降溫盒中快速冷卻，然後轉移到液氮罐中長期存儲(chu) 。