
C6大鼠腦膠質瘤細胞源自Benda等科學家使用N-亞(ya) 硝基甲脲成功誘導的大鼠膠質瘤克隆,並在經過多次體(ti) 外培養(yang) 和動物傳(chuan) 代的過程中逐步建立。
C6大鼠膠質瘤細胞是從(cong) 患有膠質瘤的大鼠大腦中分離得到的膠質細胞係。經過一係列的培養(yang) 和動物傳(chuan) 代後,這些細胞通過N-亞(ya) 硝基甲基脲誘導形成神經膠質瘤。在文獻中有報道C6細胞係中的一些細胞的細胞遺傳(chuan) 學具有不穩定性。
C6細胞病毒易感性有:痘苗病毒,水泡性口腔炎,奧賽(印第安納州),水泡性口腔炎,格拉斯哥(印第安納州)。單純皰疹病毒。
C6細胞的基因表達:S-100蛋白;甘油磷酸脫氫酶對糖皮質激素的反應;生長激素。
C6細胞表達式標記:糖皮質激素受體(ti)
C6大鼠膠質瘤細胞參數表
名稱 | C6 (大鼠膠質瘤細胞) |
別稱 | C-6; C 6; RGC-6; RGC6; RGc6 |
種屬 | 大鼠 |
年齡(性別) | 不詳 |
組織來源 | 膠質瘤,腦,膠質細胞 |
形態 | 成纖維細胞樣 |
貼壁生長 | 是 |
表達S-100 | 是 |
產生生長激素 | 是 |
產生磷酸甘油脫氫酶 | 是(在糖皮質激素作用下) |
S-100產量增加倍數 | 10倍(從低密度到充分密集狀態時) |
生長培養基 | Ham's F-12K + 15% HS + 2.5% FBS + 1% P/S |
傳代比例 | 1:2-1:4 |
換液頻率 | 2~3次/周 |
倍增時間 | ~25-30小時 |
凍存液配方 | 55% 基礎培養基 + 40% FBS + 5% DMSO |
凍存溫度 | 液氮 |
氣相條件 | 空氣,95%;CO2,5% |
培養溫度 | 37℃ |
受體表達情況 | Glucocorticoid receptor |
基因表達情況 | S-100 protein; produce glyceryl phosphate dehydrogenase in response to glucocorticoids; somatotrophin |
適用領域 | 細胞學研究、癌症研究 |
細胞活力 | >90%(Viability by Trypan Blue Exclusion) |
細胞檢測 | 不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌 |
大鼠c6膠質瘤細胞特性:
形態和生長特性: C6細胞呈現出成纖維細胞樣的形態,主要通過貼壁生長。
生物學特性: C6細胞表達S-100蛋白,並能夠產(chan) 生生長激素。引人注目的是,在細胞從(cong) 低密度生長到充分密集狀態時,S-100的產(chan) 量會(hui) 顯著增加10倍。此外,C6細胞在糖皮質激素作用下還能夠產(chan) 生磷酸甘油脫氫酶,進一步增加其在研究中的生物學價(jia) 值。
C6細胞在科研領域中有廣泛的應用:
細胞學研究: C6細胞可用於(yu) 膠質瘤和腦細胞相關(guan) 研究,幫助深入了解這些疾病的發生機製。
癌症研究: 由於(yu) 其源自膠質瘤的特性,C6細胞在癌症研究中也具有重要意義(yi) ,有助於(yu) 揭示癌細胞的生物學行為(wei) 和可能的治療靶點。
C6大鼠膠質瘤細胞生長速率圖
培養教程
步驟 | 操作 | 注意事項 |
1 | 複蘇細胞 | - 在37℃水浴中解凍含有1mL細胞懸液的凍存管 - 加入9mL培養(yang) 基混勻,離心5分鍾,棄去上清液。 - 補加4-6mL培養(yang) 基,將所有細胞懸液加入培養(yang) 瓶中培養(yang) 過夜。 |
2 | 檢查細胞密度並換液 | - 持續觀察檢查細胞密度,細胞達80%-90%前,可進行培養(yang) 。 - 棄去培養(yang) 上清並更換預熱的完全培養(yang) 基。 - 換液後檢查細胞密度。 |
3 | 細胞傳代 | 對於(yu) 貼壁細胞:使用0.25%Trypsin-0.53mM EDTA進行胰酶消化,注意觀察細胞變圓並脫落的情況 - 終止消化並離心,吹勻細胞懸液,按1:2到1:4的比例傳(chuan) 到新的培養(yang) 皿或瓶中。 |
4 | 細胞冷凍保存 | - 準備凍存液:55% 基礎培養(yang) 基 + 40% FBS + 5% DMSO。 - 終止消化後,加入含5% DMSO的凍存液; - 降溫過程:4度30min,-20度30min,-80度過夜,液氮保存。 |
注意事項:
每一步操作需在超淨台或安全櫃內(nei) 進行,嚴(yan) 格遵循無菌操作規程。
貼壁細胞在消化過程中避免細胞過度消化,細胞狀態發生變化及時終止。
對於(yu) 不同生長速度的細胞,傳(chuan) 代比例需根據實際情況進行調整。
細胞凍存時,確保凍存液中的DMSO充分混勻,防止細胞受損。
凍存液現配現用,DMSO溶解放熱,建議先配製凍存液,後重懸細胞。
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參考文獻
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- 《浙江大學》 2008年
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