
NG108-15細胞係是一種由小鼠神經母細胞瘤(N18TG2)和大鼠神經膠質瘤(C6-BU-1)通過融合技術獲得的細胞係。NG108-15細胞最初是在1971年由德國科學家Bernd Hamprecht利用滅活的仙台病毒作為(wei) 融合媒介建立。NG108-15細胞兼具小鼠神經細胞瘤和大鼠神經膠質瘤的特性,展示出神經元樣形態,如突起和神經元結構,特別適用於(yu) 研究神經分化和藥物機製。
NG108-15細胞不僅(jin) 能夠在體(ti) 外條件下維持良好的增殖能力,還能在特定誘導條件下分化為(wei) 神經元樣細胞。NG108-15細胞是研究神經係統功能、神經發育及神經退行性疾病的理想細胞模型。NG108-15細胞的另一顯著特性是其在培養(yang) 條件改變時表現出的適應性,例如當培養(yang) 基酸化時,細胞會(hui) 從(cong) 貼壁狀態轉為(wei) 懸浮狀態,但補充新鮮培養(yang) 基後,細胞可再次附著生長。
NG108-15細胞特性特征
在添加特定生長因子的刺激下,如二丁酰cAMP(dbcAMP),NG108-15細胞能夠分化為(wei) 具有神經元特性的細胞,並形成突觸。
神經元特異性蛋白:分化後的NG108-15細胞表達多種神經元特異性蛋白,包括乙酰膽堿酯酶(AChE)、突觸素(synaptophysin)、微管相關(guan) 蛋白2(MAP2)和膽堿乙酰轉移酶(ChAT)等。
中間絲(si) 蛋白:在未分化和分化的NG108-15細胞中均可檢測到神經纖維蛋白200(NF200)和波磷酸化NF200(p-NF200),這些蛋白是神經元的重要標誌物。
分化後的NG108-15細胞中,AChE mRNA的表達顯著上調,表明其具備釋放乙酰膽堿的功能。
其他相關(guan) 基因如突觸體(ti) 相關(guan) 蛋白25(SNAP-25)和煙堿型乙酰膽堿受體(ti) 也在分化過程中被激活。
電生理特性:作為(wei) 一種膽堿能細胞係,NG108-15細胞能夠模擬電壓門控鈣通道的電生理變化,並參與(yu) 研究神經遞質的釋放機製。
NG108-15細胞參數表
細胞名稱 | NG108-15小鼠神經細胞瘤與大鼠神經膠質瘤之融合細胞 |
細胞別稱 | NG108-15; NG-108-15; NG 108-15; NG10815 |
ATCC編號 | HB-12317 |
描述 | NG108-15 [108CC15]由小鼠N18TG2神經母細胞瘤與大鼠C6-BU-1神經膠質瘤用滅活的仙台病毒融合得到。1971年由Bernd Hamprecht建立,起初命名為108CC15。 |
種屬 | 小鼠X大鼠 |
組織來源 | 腦 |
形態 | 扁平或圓形,直徑10至100微米 |
生長方式 | 貼壁 |
無菌檢測 | 細菌、酵母、支原體檢測均為陰性 |
病原體檢查 | HIV、乙型肝炎、丙型肝炎檢測均為陰性 |
運輸方式 | 幹冰冷凍運輸 |
安全性 | 視為有潛在的生物危害性,需在二級生物安全台內操作 |
培養基 | DMEM+10% FBS+1% P/S |
培養條件 | 氣相:空氣,95%;CO2,5% 溫度:37℃ |
凍存液組成 | 90%胎牛血清,10% DMSO |
保存條件 | 液氮存儲 |
用途限製 | 僅供科學研究使用 |
培養教程
NG108-15小鼠神經細胞瘤與大鼠神經膠質瘤之融合細胞培養教程
NG108-15細胞複蘇步驟
從(cong) 液氮罐中取出凍存的NG108-15細胞,並立即將凍存管放入37℃水浴中快速解凍(約1-2分鍾)。期間輕輕搖晃以均勻解凍。
將解凍的NG108-15細胞迅速轉移至一個(ge) 含有4-6 mL預溫好的完全培養(yang) 基的離心管中,混勻後輕輕離心(1000 RPM,3-5分鍾)。
離心後小心棄去上清,避免擾動沉澱的NG108-15細胞,隨後加入1-2 mL新鮮的完全培養(yang) 基將細胞重懸。
將重懸的NG108-15細胞接種到含有6-8 mL完全培養(yang) 基的T25培養(yang) 瓶或10 cm培養(yang) 皿中,輕輕搖勻後放入37℃培養(yang) 箱中過夜。
NG108-15細胞傳代
次日用顯微鏡檢查NG108-15細胞,待細胞融合度達到80%-90%時可進行傳(chuan) 代。
棄去培養(yang) 基,用無鈣、無鎂的PBS緩衝(chong) 液輕輕洗滌細胞1-2次。
加入適量的胰蛋白酶-EDTA溶液(0.25% 胰蛋白酶 + 0.53 mM EDTA),放入培養(yang) 箱中消化1-2分鍾,觀察細胞形態變化,待NG108-15細胞變圓且開始脫落時終止消化。
用含有血清的完全培養(yang) 基中和胰蛋白酶,輕輕吹打以幫助NG108-15細胞脫落,並將細胞轉移至離心管中。
以1000 RPM離心4分鍾,棄去上清後加入適量新鮮培養(yang) 基重懸細胞。
根據需要將重懸的NG108-15細胞按1:2或1:3比例分瓶,並加入新鮮培養(yang) 基,置於(yu) 37℃培養(yang) 箱中繼續培養(yang) 。
NG108-15細胞凍存
凍存液由90%胎牛血清和10% DMSO組成。
當NG108-15細胞達到80%-90%的融合度時,可進行細胞凍存。按傳(chuan) 代步驟消化並收集細胞。
以1000 RPM離心4分鍾,棄去上清液後,用預冷的凍存液將細胞重懸。
將重懸後的NG108-15細胞等量分裝至凍存管中,每管約1 mL。
凍存管先放入-80℃冰箱中逐漸冷凍24小時,然後轉移至液氮罐中進行長期保存。
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