
L6 大鼠骨骼肌成肌細胞
- 來源:L6細胞是一種大鼠成肌細胞,最初由Yaffe從(cong) 大鼠大腿肌的原代培養(yang) 物中分離得到,Yaffe和Sara Neuman在1967年建立了這個(ge) 細胞係
- 細胞特征:成肌細胞樣;貼壁細胞;骨胳肌;成肌細胞
- 培養(yang) 基:DMEM+10% FBS+1% P/S
- 其他:L6 大鼠骨骼肌成肌細胞在培養(yang) 基中可融合形成多核的肌管和橫紋肌纖維,其融合程度隨著傳(chuan) 代次數的增加而下降
L6細胞是一種大鼠成肌細胞,由Yaffe從(cong) 大鼠大腿肌的原代培養(yang) 物中分離得到。
L6 大鼠骨骼肌成肌細胞在培養(yang) 基中可融合形成多核的肌管和橫紋肌纖維,其融合程度隨著傳(chuan) 代次數的增加而下降。建議在細胞傳(chuan) 代較低時進行冷凍保存,並定期通過重新克隆的方式選擇融合度高的細胞。
L6細胞來源於(yu) 大鼠的骨胳肌組織,在培養(yang) 基中表現出成肌細胞的特征。
L6 大鼠骨骼肌成肌細胞係由D·舒伯特保藏。
L6細胞的主要特點
細胞來源:由大鼠大腿肌原代培養(yang) 物中分離。
發現曆史:Yaffe和Sara Neuman在1967年建立。
細胞特性:良好的貼壁生長,成肌細胞樣形態。
細胞功能:可融合形成多核肌管和橫紋肌纖維。
傳(chuan) 代與(yu) 保存:傳(chuan) 代次數增加會(hui) 降低融合程度,建議在傳(chuan) 代較低時冷凍保存並定期重新克隆。
應用領域:適用於(yu) 轉染宿主、研究肌肉細胞生物學、肌肉發育及生長機製。
安全性:確認不含鼠痘病毒。
L6 大鼠骨骼肌成肌細胞產品參數表
細胞名稱 | L6 (大鼠骨骼肌成肌細胞) |
別稱 | L-6; L-6 myoblast |
種屬 | 大鼠 |
組織來源 | 骨胳肌;成肌細胞 |
生長特性 | 貼壁細胞 |
細胞形態 | 成肌細胞樣;轉化細胞係 |
生物安全等級 | 1 |
基因表達情況 | myosin |
生長培養基 | DMEM+10% FBS+1% P/S |
凍存液 | 55% 基礎培養基+40%FBS+5%DMSO;液氮 |
培養條件 | 氣相:空氣,95%;CO2,5%;溫度:37℃ |
推薦傳代比例 | 1:3-1:4 |
推薦換液頻率 | 2~3次/周 |
細胞數量 | >1x10^6 細胞數 |
背景描述 | L6細胞是從(cong) 大鼠大腿肌的原代培養(yang) 物中分離得到的,可在培養(yang) 基中形成多核的肌管和橫紋肌纖維。 隨著代數增加,細胞融合程度下降,建議冷凍於(yu) 低代次階段並重新克隆以選擇融合能力強的細胞。 長時間培養(yang) 會(hui) 導致成肌組分迅速耗盡。檢測顯示陰性肢骨發育畸形病毒(鼠痘)。 |
培養教程
L6 大鼠骨骼肌成肌細胞培養(yang) 資料
細胞特性: L6 細胞在培養(yang) 基中可融合形成多核的肌管和橫紋肌纖維。細胞融合的程度隨著代數的增加而下降,因此建議在低代次階段冷凍並重新克隆以選擇融合能力強的細胞。
培養(yang) 條件: 氣相條件為(wei) 空氣 95% 和二氧化碳 5%,溫度為(wei) 37 攝氏度,濕度為(wei) 70%-80%。培養(yang) 基配方為(wei) DMEM,含有 10% 胎牛血清和 1% 抗生素/抗菌素。
培養(yang) 步驟:
細胞傳(chuan) 代:
棄去培養(yang) 上清,用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。
加入 1-2ml 消化液(0.25% Trypsin-0.53mM EDTA)於(yu) 培養(yang) 瓶中,置於(yu) 37℃培養(yang) 箱中消化 1-2min,然後在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓並脫落,迅速停止消化並加入含 10% 血清的培養(yang) 基終止消化。
輕輕吹打細胞,脫落後吸出,在 1000RPM 條件下離心 8-10 分鍾,棄去上清液,補加 1-2mL 培養(yang) 液後吹勻。
按照比例分到新的含 5-6 ml 培養(yang) 液的新皿中或者瓶中。
複蘇細胞: 將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入 5mL 培養(yang) 基混合均勻。在 1000RPM 條件下離心 5 分鍾,棄去上清液,補加 4-6mL 培養(yang) 基後吹勻。然後將所有細胞懸液加入培養(yang) 瓶中培養(yang) 過夜(或將細胞懸液加入 6cm 皿中培養(yang) 過夜)。第二天換液並檢查細胞密度。
特別注意事項:
細胞在培養(yang) 前 3 代時建議凍存一批細胞種子以備後續實驗使用。
收到凍存細胞後,若發現幹冰已揮發幹淨、凍存管瓶蓋脫落、破損及細胞有汙染,請立即與(yu) 供應商聯係。
細胞接收後請在 10或 20X 顯微鏡下確認細胞狀態,並拍照存檔,作為(wei) 後續售後的依據。
所有動物細胞均視為(wei) 有潛在的生物危害性,必須在二級生物安全台內(nei) 操作,並請注意防護。
L6 大鼠骨骼肌成肌細胞 是用於(yu) 科研目的的,未通過直接用於(yu) 活體(ti) 動物和人的審核,也未通過用於(yu) 活體(ti) 診斷的審核。
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參考文獻
- 第一軍醫大學學報 2005年11期
- 摘要:目的探討氧化應激對L6成肌細胞生長分化的影響。方法MTT法檢測H2O2對L6細胞活力的影響...
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- F1000Res . 2020 Oct 15:9:1240. doi: 10.12688
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