小鼠臍靜脈平滑肌細胞（kaiyun网站安全）

小鼠臍靜脈平滑肌細胞（Mouse Primary Umbilical Vein Smooth Muscle Cells，mPUVSMCs）是一種從(cong) 小鼠臍帶組織中分離得到的重要細胞類型，對心血管疾病的研究具有重要價(jia) 值。

臍帶作為(wei) 連接胎兒(er) 和胎盤的管狀結構，其中的臍靜脈主要負責將胎盤提供的氧氣和營養(yang) 物質輸送至胎兒(er) ，而臍動脈則運送胎兒(er) 的代謝廢物返回胎盤。由於(yu) 臍帶是分娩後的廢棄組織，其獲取方便且無倫(lun) 理爭(zheng) 議，結合成熟的分離技術，臍靜脈平滑肌細胞廣泛應用於(yu) 血管相關(guan) 研究。臍靜脈平滑肌細胞在培養(yang) 早期具有貼壁生長能力，形態多樣，包括梭形、不規則形、三角形或扇形，細胞核通常為(wei) 卵圓形並居中。培養(yang) 3天後開始貼壁伸展，約2周後細胞匯合，呈現長梭形態，胞質豐(feng) 富，有分枝狀突起，低密度時細胞交織成網狀，高密度時則排列成旋渦狀或柵欄狀，傳(chuan) 代後細胞生長迅速並保持典型形態學特征。臍靜脈平滑肌細胞在調節血管收縮、舒張及修複方麵發揮關(guan) 鍵作用，是研究動脈硬化、高血壓等疾病機製的重要模型，亦在藥物篩選和再生醫學領域具有廣泛應用潛力。

小鼠臍靜脈平滑肌細胞特性特征

• 標誌性蛋白：臍靜脈平滑肌細胞表達α-平滑肌肌動蛋白（α-SMA）、波形蛋白和組織因子等平滑肌特異性標誌物。
  

• 表麵標誌物：常見的表麵標誌物包括CD10、CD13、CD44、CD73和CD90，而不表達CD31、CD34或CD45。

• 基因表達：臍靜脈平滑肌細胞在培養(yang) 中能自我更新和擴增，並且具有向血管平滑肌、周細胞或血管內(nei) 皮表型的分化潛能。其基因表達譜顯示出與(yu) 平滑肌功能相關(guan) 的基因活躍

小鼠臍靜脈平滑肌細胞參數表

kaiyun网站安全小鼠臍靜脈平滑肌細胞培養教程

細胞複蘇

• 從(cong) 液氮中取出臍靜脈平滑肌細胞凍存管，迅速放入37℃水浴中，輕輕搖晃加速解凍。
  

• 解凍後，立即將細胞懸液轉移至含10%胎牛血清（FBS）和2%青黴素-鏈黴素的培養(yang) 基中，以終止凍存液作用，確保臍靜脈平滑肌細胞的生存率。

• 將細胞懸液轉移至離心管，以1000 rpm離心5分鍾，去除凍存液殘留。
  

• 棄去上清液，加入適量培養(yang) 基重懸臍靜脈平滑肌細胞。

• 將重懸的臍靜脈平滑肌細胞均勻接種至預先用1%明膠包被的培養(yang) 瓶中。
  

• 將培養(yang) 瓶放置於(yu) 37℃、5% CO₂培養(yang) 箱中靜置24小時，確保臍靜脈平滑肌細胞貼壁穩定。

細胞傳代

• 觀察臍靜脈平滑肌細胞的生長狀態，待細胞融合度達到80%-90%時進行傳(chuan) 代。
  

• 用無鈣鎂PBS清洗培養(yang) 瓶2次，去除殘留培養(yang) 基，避免影響臍靜脈平滑肌細胞的後續消化效果。
  

• 加入0.125%胰蛋白酶-EDTA消化液，覆蓋細胞表麵後放入37℃ CO₂培養(yang) 箱中消化1-2分鍾。

• 觀察顯微鏡下，當臍靜脈平滑肌細胞變圓並脫壁時，立即加入含20% FBS的培養(yang) 基終止消化。

• 用移液器輕輕吹打瓶底，製備單細胞懸液，確保臍靜脈平滑肌細胞均勻分散。
  

• 以1000 rpm離心5分鍾，棄去上清液後，加入新鮮培養(yang) 基重懸臍靜脈平滑肌細胞。

• 按1:3至1:5比例將臍靜脈平滑肌細胞接種至新培養(yang) 瓶中。
  

• 將培養(yang) 瓶放入37℃、5% CO₂培養(yang) 箱中，繼續培養(yang) ，並定期更換培養(yang) 基以維持臍靜脈平滑肌細胞的最佳狀態。

細胞凍存

• 配製凍存液，使用90% FBS和10% DMSO的混合液，以最大限度保護臍靜脈平滑肌細胞的活性。
  

• 在傳(chuan) 代前24小時更換培養(yang) 基以優(you) 化臍靜脈平滑肌細胞的活性。
  

• 收集生長良好的臍靜脈平滑肌細胞，胰酶消化後製備單細胞懸液。

• 以1000 rpm離心5分鍾，棄去上清液後，按每5×10⁶/mL濃度將臍靜脈平滑肌細胞重懸於(yu) 凍存液中。
  

• 將裝有臍靜脈平滑肌細胞的凍存管靜置於(yu) 4℃環境1小時後，轉移至-20℃冷凍1小時，再置於(yu) 液氮表麵冷卻2小時。
  

• 最後，將凍存管浸入液氮中長期保存，確保臍靜脈平滑肌細胞的長期存儲(chu) 穩定性。