
原代小鼠臍帶間充質幹細胞
- 來源:臍帶
- 細胞特征:貼壁細胞 , 成纖維細胞樣
- 培養(yang) 基:kaiyun网站安全專(zhuan) 用培養(yang) 基
- 其他:小鼠臍帶間充質幹細胞表達CD105、CD73和CD90,而缺乏CD45、CD34等造血標誌物
原代小鼠臍帶間充質幹細胞(Wharton's Jelly Mesenchymal Stem Cells, WJ-MSCs)是從(cong) 孕鼠臍帶組織中分離獲得的間充質幹細胞,通常取自孕齡15至19天的孕鼠臍帶。臍帶是連接胎兒(er) 與(yu) 胎盤的重要結構,由羊膜包裹的管狀組織組成,最初由卵黃囊和尿膜的柄狀延長部分形成。臍帶內(nei) 包含臍動脈、臍靜脈,以及稀疏膠狀的結締組織,為(wei) 幹細胞提供了豐(feng) 富的來源。
小鼠臍帶間充質幹細胞能夠分泌多種細胞因子和生長因子,支持造血幹細胞(HSCs)的增殖與(yu) 分化。此外,這些細胞具備顯著的免疫調節和抗炎能力,可以有效減輕移植物抗宿主病(GVHD)及其他移植相關(guan) 並發症。通過在不同誘導條件下,小鼠臍帶間充質幹細胞可分化為(wei) 多種非造血組織細胞,包括骨、軟骨和脂肪細胞等,在組織損傷(shang) 修複及風濕免疫性疾病治療中顯示出廣闊的應用前景。
原代小鼠臍帶間充質幹細胞特性特征
增殖能力:小鼠臍帶間充質幹細胞具有較強的自我更新能力和增殖潛力,即使經過多次傳(chuan) 代仍能保持其幹細胞特性。它們(men) 在體(ti) 外培養(yang) 時能夠迅速增殖,適合用於(yu) 大規模細胞生產(chan) 。
小鼠臍帶間充質幹細胞屬於(yu) 成體(ti) 幹細胞,具有自我更新和多向分化的能力。
小鼠臍帶間充質幹細胞可以分化為(wei) 多種類型的細胞,包括:骨細胞:可用於(yu) 骨組織再生;軟骨細胞:用於(yu) 關(guan) 節修複;脂肪細胞:參與(yu) 脂肪組織的形成。
小鼠臍帶間充質幹細胞的表麵標誌物包括:陽性標誌物:CD73、CD90、CD105;陰性標誌物:CD45、CD34等造血標誌物
小鼠臍帶間充質幹細胞表達與(yu) 幹細胞相關(guan) 的一些基因,如Oct4、Sox2和Nanog,這些基因與(yu) 維持幹細胞特性及多向分化能力密切相關(guan) 。
在不同誘導條件下,小鼠臍帶間充質幹細胞能夠調節多種信號通路,從(cong) 而影響其分化方向和功能。
小鼠臍帶間充質幹細胞能夠分泌多種生長因子和細胞因子,如VEGF(血管內(nei) 皮生長因子)、HGF(肝細胞生長因子)等,這些因子在組織修複、免疫調節和炎症反應中發揮重要作用。
由於(yu) 其低免疫原性和良好的組織相容性,小鼠臍帶間充質幹細胞在風濕免疫疾病、組織再生、器官移植及其他臨(lin) 床治療領域顯示出廣泛的應用潛力
原代小鼠臍帶間充質幹細胞參數表
細胞名稱 | 原代小鼠臍帶間充質幹細胞 |
英文名稱 | Mouse Umbilical cord mesenchymal stem cells,MU-MSCs |
細胞來源 | 小鼠臍帶組織(孕鼠,孕齡15-19天) |
細胞形態 | 長梭狀或多角形,貼壁生長 |
細胞純度 | 高於90%(通過免疫熒光染色鑒定) |
表麵標誌物 | CD73、CD90、CD105陽性;CD34、CD45陰性 |
免疫原性 | 低免疫原性,適合臨床應用 |
幹細胞特性 | 具有自我更新和多向分化潛能 |
培養基 | kaiyun网站安全專用培養基 |
培養條件 | 37℃,5% CO₂ |
傳代方法 | 使用0.25%胰酶消化,細胞生長至80-90%融合時傳代 |
更換培養基頻率 | 每2-3天更換一次 |
傳代次數 | 可傳 5-10 代左右;3-5 代以內狀態最佳 |
基因表達 | 表達Oct4、Sox2、Nanog等幹細胞相關基因 |
分化潛能 | 能夠分化為骨細胞、軟骨細胞、脂肪細胞等多種類型 |
陽性標誌物 | CD73、CD90、CD105 |
陰性標誌物 | CD34、CD45等造血標誌物 |
生長因子分泌 | 能分泌VEGF、HGF等生長因子,促進組織修複和免疫調節 |
凍存方法 | 使用含有DMSO的冷凍保護劑進行凍存 |
最佳凍存速率 | 1℃/min(具體根據細胞類型調整) |
凍存溫度 | -80℃或液氮中(-196℃) |
臨床應用 | 再生醫學、組織工程、風濕免疫疾病治療等 |
培養教程
原代小鼠臍帶間充質幹細胞培養教程
細胞培養與傳代
1. 初代培養觀察
在培養(yang) 24-48小時後,小鼠臍帶間充質幹細胞通常會(hui) 以紡錘形或多角形貼附於(yu) 培養(yang) 皿表麵。每隔12小時觀察一次,確保細胞生長狀況良好。
2. 初代細胞收集(P0代)
當小鼠臍帶間充質幹細胞生長至80%-90%融合時,用0.25%胰酶-EDTA消化細胞,37℃孵育3-5分鍾。隨後加入含血清的培養(yang) 基終止消化,並將細胞懸液轉移至離心管,以300×g離心3-5分鍾收集細胞。
3. 傳代培養
將收集的小鼠臍帶間充質幹細胞重懸於(yu) 新鮮培養(yang) 基中,按1:2或1:3比例接種到新的培養(yang) 皿或T75培養(yang) 瓶中繼續培養(yang) 。根據細胞密度情況,每2-3天更換一次培養(yang) 基,維持小鼠臍帶間充質幹細胞的健康生長狀態。
長期維護與注意事項
1. 傳代範圍
小鼠臍帶間充質幹細胞通常可穩定傳(chuan) 代至P20代左右,但建議使用P5-P10代細胞進行實驗,以確保其保持多向分化潛能和增殖能力。
2. 細胞密度管理
在細胞融合度達到70%-90%時進行傳(chuan) 代,避免過度融合導致細胞功能下降。
3. 細胞狀態監測
定期觀察小鼠臍帶間充質幹細胞形態是否均一,紡錘狀細胞表明其處於(yu) 良好狀態。如出現形態異常或增殖速度下降,應及時優(you) 化培養(yang) 條件或重新分離新細胞株。
4. 無菌操作
所有實驗操作應嚴(yan) 格在無菌環境下進行,定期檢查培養(yang) 基是否汙染。如發現汙染,可更換抗生素濃度或重新分離小鼠臍帶間充質幹細胞。
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參考文獻
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